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公开(公告)号:CN100370030C
公开(公告)日:2008-02-20
申请号:CN200610033307.7
申请日:2006-01-25
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种β-甘露聚糖酶基因及其编码产物的氨基酸序列和制备方法,该制备方法经提取经魔芋精粉诱导的高活性的Armillariella tabescens总RNA,利用Genebank的同源序列设计简并引物进行PCR扩增出保守区,然后再根据保守区设计基因特异性引物进行3’RACE和5’RACE,克隆出β-甘露聚糖酶基因的全长cDNA。可与毕赤酵母等构建真核表达载体建立高效表达的酵母基因工程菌株。
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公开(公告)号:CN1719243A
公开(公告)日:2006-01-11
申请号:CN200410028018.9
申请日:2004-07-09
Applicant: 暨南大学
IPC: G01N27/327 , G01N27/28 , G01N27/403
Abstract: 本发明涉及一种用于检测黄曲霉毒素及杂色曲霉素的生物传感器电极,以及该生物传感器电极的制备方法。本发明所述的用于检测黄曲霉毒素及杂色曲霉素的生物传感器电极,包括基底层与在基底层上形成的反应层,所述的反应层包含电子介体和黄曲霉毒素解毒酶,电子介体固定在基底层上成膜,该膜作为酶载体联结黄曲霉毒素解毒酶,形成黄曲霉毒素解毒酶修饰电极。本发明利用发明人报道的黄曲霉毒素解毒酶首次制备出生物传感器电极,与现有技术相比,具有响应快、信号灵敏、特异性高、使用方便、可定量检测等优点。本发明所述的生物传感器电极的灵敏度可达到1ppm~10ppb的水平。本发明省时、省力,操作简单,几乎无须培训即可推广应用。
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公开(公告)号:CN115786388B
公开(公告)日:2025-01-14
申请号:CN202211674896.2
申请日:2022-12-26
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/81 , C12N1/19 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/56 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12P19/60 , C12R1/865 , C12R1/84 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,涉及一种生产2‑O‑α‑D‑吡喃葡萄糖基‑L‑抗坏血酸(AA‑2G)的基因工程菌,以及该基因工程菌的构建方法和应用。本发明所述的生产2‑O‑α‑D‑吡喃葡萄糖基‑L‑抗坏血酸(AA‑2G)的基因工程菌,含有α‑半乳糖苷酶基因(agal)、木糖还原酶基因(XR)、甘露醇脱氢酶基因(MDH)、S136A突变的L‑半乳糖脱氢酶基因(LGDH)、D‑阿拉伯糖‑1,4‑内酯氧化酶基因(ALO)和蔗糖磷酸化酶基因(SPase)。本发明提供了利用该重组基因工程菌生产AA‑2G的方法。该基因工程菌株实现了全细胞合成AA‑2G,大大缩短AA‑2G的合成生产途径,提高了AA‑2G的产率。
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公开(公告)号:CN114773441B
公开(公告)日:2023-06-02
申请号:CN202210354712.8
申请日:2022-04-06
Applicant: 暨南大学
IPC: C07K14/39 , C07K14/395 , C07K14/40 , C12N15/81 , C12N15/67 , C12N15/113 , C12N1/19 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/72
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用,特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Hot1p的应用。本发明公开了Hot1p作为正调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用,所述Hot1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Hot1基因所编码的;所述应用为通过在启动子Pgap后插入Hot1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能增强毕赤酵母组成型启动子Pgap启动子的转录,从而使其后的外源基因在毕赤酵母中高效表达,而且可以避免多拷贝或者多基因表达时,使用同一启动子产生的稀释效应,导致不同基因表达量差异过大。
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公开(公告)号:CN116004555A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202211120723.6
申请日:2022-09-15
Applicant: 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的黄曲霉毒素氧化酶(AFO)及其应用。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素氧化酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,筛选得到了一种对胃蛋白酶抗性提高的突变体黄曲霉毒素氧化酶。本发明所述的作用于黄曲霉毒素(AFB1)的突变体黄曲霉毒素氧化酶(AFOG475M)对胃蛋白酶的抗性半衰期是野生型AFO的3.78倍。相比于野生型,突变体AFOG475M在10~40℃时保有40%以上的活性;最适反应pH为7.5;在pH5.0~8.0时保有40%以上的活性。
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公开(公告)号:CN114773441A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN202210354712.8
申请日:2022-04-06
Applicant: 暨南大学
IPC: C07K14/39 , C07K14/395 , C07K14/40 , C12N15/81 , C12N15/67 , C12N15/113 , C12N1/19 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/72
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用,特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Hot1p的应用。本发明公开了Hot1p作为正调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用,所述Hot1p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Hot1基因所编码的;所述应用为通过在启动子Pgap后插入Hot1基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能增强毕赤酵母组成型启动子Pgap启动子的转录,从而使其后的外源基因在毕赤酵母中高效表达,而且可以避免多拷贝或者多基因表达时,使用同一启动子产生的稀释效应,导致不同基因表达量差异过大。
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公开(公告)号:CN114657190A
公开(公告)日:2022-06-24
申请号:CN202210356130.3
申请日:2022-04-06
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及真核基因表达的转录调控因子的应用,特别是涉及一种组成型启动子Pgap的转录调控因子Msn2p的应用。本发明公开了Msn2p作为负调控因子在提高宿主细胞中蛋白表达中的应用,所述Msn2p的氨基酸序列是由核苷酸序列为SEQ ID NO:1的Msn2基因所编码的;所述应用为通过敲除Msn2基因从而提高宿主细胞中蛋白的表达。本发明所述的应用能通过减少阻遏作用来增强毕赤酵母表达系统中组成型启动子Pgap转录调控,进而提高目的蛋白的表达效率和产量。
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公开(公告)号:CN113980932A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202111231828.4
申请日:2021-10-22
Applicant: 暨南大学 , 开平牵牛生化制药有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程和蛋白质工程技术领域,公开了一种定点突变的α‑葡萄糖苷酶。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的α‑葡萄糖苷酶中制造两个氨基酸取代而产生的;所述的氨基酸取代是第120位和第215位的取代。本发明提供了所述的定点突变的α‑葡萄糖苷酶在制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸中的应用。本发明所述定点突变的α‑葡萄糖苷酶能够降低合成AA‑2G时副产物AA‑6G的含量,且提高了AA‑2G产量,其他酶学性质与野生型酶基本一致。
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公开(公告)号:CN113881654A
公开(公告)日:2022-01-04
申请号:CN202111050639.7
申请日:2021-09-08
Applicant: 暨南大学 , 广东方善能动物保健有限公司
IPC: C12N9/30 , C12N15/81 , A23K20/189 , A23L29/00
Abstract: 本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶,它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于米曲霉的α‑淀粉酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶,所述的氨基酸取代是第221和375位的氨基酸取代。本发明通过蛋白质工程技术对野生型α‑淀粉酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造,提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶突变体,该酶对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型提高了2.54倍。突变型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性是野生型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性的1.42倍。突变型α‑淀粉酶的其他酶学性质与野生型α‑淀粉酶基本一致。
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公开(公告)号:CN109536505B
公开(公告)日:2021-11-09
申请号:CN201811495682.2
申请日:2018-12-07
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/115 , G01N27/327
Abstract: 本发明涉及一种核酸适配体,特别涉及能与鬼臼毒素特异性结合的核酸适配体以及利用该核酸适配体制作成的电化学生物传感器。本发明所述的鬼臼毒素的核酸适配体具有如SEQ ID NO.1所示的核酸序列。核酸序列的5’端具有巯基修饰基团。本发明所述的鬼臼毒素核酸适配体对底物鬼臼毒素具有特异性亲和力。本发明所述的核酸适配体组装在电极上,能够制成对鬼臼毒素响应灵敏的电化学生物传感器以及用于检测鬼臼毒素的试剂盒。本发明所述的核酸适配体具有分子量小、性质稳定、成本低廉、易于保存等优点,利用其制成的电化学生物传感器可用于定性定量检测鬼臼毒素,比传统检测方法更快速更灵敏更稳定,大大提高检测效率及成本。
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