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公开(公告)号：CN104004782A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410209121.7
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种延长水稻生育期的育种方法，包含以下步骤：在水稻生育期决定基因Ehd3外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗；利用载体中的表达框实现对水稻细胞中Ehd3外显子区DNA的剪切，从而引起水稻细胞的自我修复；通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位Ehd3基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，确认再生植株生育期的延长。实验表明，本方法可快速获得生育期延长的水稻材料。
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公开(公告)号：CN103993039A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245505.4
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉粳稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103993038A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245313.3
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉籼稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的籼稻品种9m90中。导入结束后，通过PCR检测鉴定，证实外源基因已导入9m90中。该方法成功实现了闭颖授粉的籼稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103981215A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410225911.4
申请日：2014-05-23
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于基因工程的骨干质粒载体，所述骨干质粒载体中，向导RNA表达框和Cas9核酸酶表达框位于同一双元载体中，向导RNA表达框由水稻U6启动子，壮观霉素抗性基因、人工合成的sgRNA骨架序列和Poly-T终止子依次构成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，水稻偏好密码子改造后的Cas9编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了利用所述质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体，及其在水稻基因打靶中的应用。
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公开(公告)号：CN103981212A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410210447.1
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种将黄色颖壳的水稻品种的颖壳颜色改为褐色的育种方法，包含以下步骤：在颖壳颜色决定基因OsCAD2外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗，在通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位OsCAD2基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，实现颖壳颜色的改变。实验表明，本方法可快速改变水稻品种的颖壳颜色。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103981211A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410209551.9
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种创制闭颖授粉水稻材料的育种方法，包含以下步骤：在水稻闭颖授粉决定基因DEP2外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗，通过剪切造成水稻细胞DEP2基因出现功能缺失突变，在通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位DEP2基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，确认再生植株开花授粉由开颖转为闭颖。实验表明，本方法可快速获得闭颖授粉水稻材料。
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公开(公告)号：CN102505013B
公开(公告)日：2013-02-20
申请号：CN201110326770.1
申请日：2011-10-25
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一个与水稻温敏不育基因tms5紧密连锁的InDel(insertion-deletion)标记，可用于水稻温敏核不育系的辅助选育及温敏型两系水稻纯度的快速鉴定。本发明依据水稻温敏核不育系与恢复系(或具恢复能力的杂交亲本)在tms5基因所在区域的DNA序列差异，开发了一个用于水稻温敏核不育系辅助选育及温敏型两系水稻纯度快速鉴定的InDel标记，即SJ001，利用PCR技术扩增该标记位点，携有tms5基因的温敏核不育系仅扩增出一条387bp的谱带；携有tms5基因的温敏型两系杂交水稻会扩增出大小分别为463bp和387bp的两条谱带；不携有tms5基因的水稻(非温敏型水稻)仅扩增出一条463bp的谱带。依据标记SJ001在水稻温敏核不育系和恢复系(或具恢复能力的杂交亲本)中的扩增差异，实现温敏核不育系的辅助选育及温敏型两系水稻纯度的快速鉴定。
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公开(公告)号：CN101818157B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN200910185774.5
申请日：2009-12-02
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/32 , C12N15/10 , C12N15/63 , C12N5/10 , A01H5/00 , A01H5/02 , A01H5/06 , A01H5/10 , A01H5/12 , A01N65/00 , A01P7/04
Abstract: 本发明人工设计出一条全新的Bt基因，命名为mCry1Ab，同时构建了mCry1Ab基因的表达盒和表达载体，并转化水稻。Cry1Ab/Ac试纸条检测结果显示，转基因植株体内存在BT毒蛋白，且BT毒蛋白的平均表达量达7.23ng/mg。室内和田间抗虫性鉴定都显示转基因植株具有明显的抗虫效果。
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公开(公告)号：CN102016040A
公开(公告)日：2011-04-13
申请号：CN200880125066.6
申请日：2008-11-19
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
CPC classification number: C12N15/8223
Abstract: 分离的稻非胚乳组织表达启动子，OsTSP I，及其用途。该载体包括：在说明书中给出的1785bp(SEQ ID NO：1)的限定的序列、或它的片段或变体，或在严格条件下杂交至SEQ ID NO：1、或它的片段或变体上的核苷酸序列。OsTSP I的活性是由转基因方法来证实的。正如组织化学所确定，OsTSP I以组织特异的方式调节了GUS的表达，并且在多种胚乳组织中没有活性。该OsTSP I可以用作针对在稻以及其他农作物中基因表达的研究和控制的有力的工具。它对于安全的转基因食物例如稻的开发是特别有利的。
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公开(公告)号：CN101230348B
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN200710190007.4
申请日：2007-11-19
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
CPC classification number: C12N15/8223
Abstract: 本发明涉及水稻非胚乳组织表达启动子及其应用，该启动子长1785bp，以其取代植物表达载体pCAMBI01305.1上的组成型CaMV35S启动子，构建成为一个新的植物表达载体，命名为pOsTSP？I-GUS。用转基因的方法验证该启动子的启动活性，GUS组织染色结果显示该启动子具有组织表达特异性，即只在水稻非胚乳组织(根、茎、叶等)中表达，在胚乳中不表达。该启动子的获得，为水稻及其它作物胚乳组织基因表达调控研究提供了一个有力的工具，特别是为水稻等转基因食品的安全性研究和开发创造了有利条件。因此，该启动子的获得，具有重要理论和实践意义。
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