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公开(公告)号：CN115804350A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202211531854.3
申请日：2022-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种软鳍新光唇鱼和中国结鱼杂交方法，属于水产养殖技术领域。本发明将软鳍新光唇鱼和中国结鱼雌雄亲鱼置于培育池中亲鱼养殖，培育池的环境参数如下：水流的流速20～45m/min，水质透明度90～100cm，水溶解氧为6.0～7.5mg/L，水pH值7.2～7.8，水温为16～25℃，光照周期为9～12h；培育池上进行遮光处理，每天投喂颗粒饲料2次；从亲鱼中收集卵子和精子，经人工授精，孵化，饲养后得到软鳍新光唇鱼和中国结鱼杂交种。本发明亲鱼培育过程避免使用催产剂，不仅能自然产卵产精且可获得较高的受精率。该方法为高档淡水水产养殖业培育出一种更适宜观赏，便于人工规模养殖的杂交新品种。
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公开(公告)号：CN112352712B
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202011410487.2
申请日：2020-12-04
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种犀角金线鲃人工繁殖方法，属于水产繁殖技术领域。一种犀角金线鲃人工繁殖方法是将犀角金线鲃雌雄亲本置于预先放置有黑色洞穴模拟物的培育容器中，严格控制亲鱼培育条件，使犀角金线鲃在人工条件下自然产卵产精，从根本上解决了洞穴鱼类从野外洞穴环境到人工模拟环境的应激和适应性以及人工条件下洞穴鱼类生殖功能紊乱的双重问题，而且人工繁殖过程不使用催产剂，不仅能获得较高的受精率和孵化率而且降低生产成本使操作更加简便；同时鱼苗饲养阶段根据犀角金线鲃鱼苗各阶段不同生长特点设置分阶段投喂不同饲料，从而提高鱼苗的存活率的同时也降低了鱼苗的畸形率，因此本发明提供的方法实现高效人工繁育犀角金线鲃的目的。
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公开(公告)号：CN112352712A
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN202011410487.2
申请日：2020-12-04
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种犀角金线鲃人工繁殖方法，属于水产繁殖技术领域。一种犀角金线鲃人工繁殖方法是将犀角金线鲃雌雄亲本置于预先放置有黑色洞穴模拟物的培育容器中，严格控制亲鱼培育条件，使犀角金线鲃在人工条件下自然产卵产精，从根本上解决了洞穴鱼类从野外洞穴环境到人工模拟环境的应激和适应性以及人工条件下洞穴鱼类生殖功能紊乱的双重问题，而且人工繁殖过程不使用催产剂，不仅能获得较高的受精率和孵化率而且降低生产成本使操作更加简便；同时鱼苗饲养阶段根据犀角金线鲃鱼苗各阶段不同生长特点设置分阶段投喂不同饲料，从而提高鱼苗的存活率的同时也降低了鱼苗的畸形率，因此本发明提供的方法实现高效人工繁育犀角金线鲃的目的。
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公开(公告)号：CN110542603B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201811620374.8
申请日：2018-12-28
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: G01N1/31
Abstract: 本发明提供了一种滇池金线鲃肌间刺的染色方法及其应用，属于鱼类骨骼染色技术领域；所述染色方法包括以下步骤：1)用麻醉液麻醉滇池金线鲃后，置于多聚甲醛溶液中进行固定；2)将所述固定样本清洗后，置于漂白剂溶液中去除体表色素，获得去除体表色素的样本；3)将所述去除体表色素样本置于酶消化液中消化至样本头部肌肉透明获得肌肉透明样本；4)将所述肌肉透明样本置于染色液中进行肌间刺染色获得整体均被染色的样本；5)将所述整体均被染色的样本置于脱水脱色液中进行梯度脱水脱色获得肌间刺染色的样本。所述方法能够实现对滇池金线鲃肌间刺进行快速染色，达到清晰的观察滇池金线鲃肌间刺的数量、形态，附着位置等预期效果的要求。
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公开(公告)号：CN106479960B
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201610970091.0
申请日：2016-10-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种光倒刺鲃鳍细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)光倒刺鲃鳍的获取：采用亚甲基蓝和酒精联合对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有细胞生长因子、胎牛血清、青霉素、链霉素、庆大霉素和两性霉素B的DMEM/F12或L‑15培养液进行培养；3)传代培养：传至第8代时，细胞培养液换成基础培养液，所述光倒刺鲃鳍细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的光倒刺鲃鳍细胞系能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，能满足对光倒刺鲃这一经济物种种质资源保存和理论研究的需要，还可以反复冻融，可应用于细胞生物学、病毒学、毒理学、分子生物学、遗传学和免疫学等重要研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106508891B
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201610976570.3
申请日：2016-10-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种大理裂腹鱼肾脏细胞系的构建方法，该方法包括如下步骤：1)大理裂腹鱼肾脏组织的获取：采用高锰酸钾和酒精联合对大理裂腹鱼进行消毒；2)原代培养：采用含有细胞生长因子、青霉素、链霉素、两性霉素B，渗透压为的280‑300mOsm/L的L‑15或DMEM/F12培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述大理裂腹鱼肾脏细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的大理裂腹鱼肾脏细胞系形态为成纤维样，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，不仅能满足对大理裂腹鱼这一珍稀物种种质资源保存和理论研究的需要，同时也是大理裂腹鱼的首个细胞系，为大理裂腹鱼细胞水平的高原适应性研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103436490A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310400065.0
申请日：2013-09-05
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种昆明裂腹鱼鳍细胞系的构建和超低温冷冻保存方法，属淡水水生生物细胞培养和超低温冷冻保存技术领域。该方法是以昆明裂腹鱼腹鳍组织为材料，采用组织块法，在含有胎牛血清和细胞生长因子，pH值为7.0-7.2的DMEM/F12培养液中培养；采用胰蛋白酶消化法进行传代培养；具体包括制备细胞培养液、原代培养及传代培养步骤。本发明的有益效果在于：1、原代培养耗时短，细胞量大，能用于染色体分析；2、构建的昆明裂腹鱼鳍细胞系形态为成纤维样，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，满足了对昆明裂腹鱼种质资源保存和理论研究及应用的需要；3、该构建方法也适用于其他鱼类构建鳍细胞系。
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公开(公告)号：CN102766595B
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201210288477.5
申请日：2012-08-07
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种鱇浪白鱼心脏细胞系的构建方法，属于淡水生物细胞培养技术领域。该方法以鱇浪白鱼心脏组织为材料，清洗剪碎后，采用透明质酸酶和II型胶原酶联合消化获得游离心脏细胞和疏松组织块，接种于25 cm2培养瓶中，加入含有胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子和硫酸软骨素的L-15培养液，置于28℃培养箱培养。每隔3天半更换培养液，待细胞长成单层后，采用胰蛋白酶消化法进行传代。本发明的有益效果在于：1、操作简便；2、构建的鱇浪白鱼心脏细胞系的细胞生长状态良好，形态为成纤维样细胞，能连续传代40代以上，直接用于环境毒理学研究环境污染物的模型，进行污染检测和安全性评价； 3、该方法也适用于其他鱼类构建心脏细胞系。
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公开(公告)号：CN102757932A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210277861.5
申请日：2012-08-07
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种滇池金线鲃鳍细胞系的构建方法，属于淡水水生生物细胞培养技术领域。该方法是以滇池金线鲃鳍条组织为材料，采用组织块法，在含有胎牛血清和人碱性成纤维细胞生长因子，pH值为7.2-7.4的L-15培养液中培养；采用胰蛋白酶消化法进行继代培养；具体包括制备细胞培养液、鳍组织微创取样、原代培养及传代培养步骤。本发明的有益效果在于：1、采用微创处理，在保证鱼体存活的前提下，操作简便易行；2、构建的滇池金线鲃鳍细胞系形态为成纤维样，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，满足了对滇池金线鲃种质资源保存和理论研究及应用的需要；3、该构建方法也适用于其他鱼类构建鳍条的细胞系。
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公开(公告)号：CN116076404A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211532602.2
申请日：2022-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种滇池金线鲃和犀角金线鲃的杂交方法，属于水产繁殖技术领域。本发明提供的滇池金线鲃和犀角金线鲃的杂交方法，包括亲鱼培育、人工授精、鱼卵孵化和鱼苗饲养，严格控制亲鱼培育环境参数和饲料种类，为滇池金线鲃和犀角金线鲃模拟良好的生存条件，有利于野生滇池金线鲃和犀角金线鲃较快适应人工养殖环境，同时避免催产剂使用实现人工环境下自然产精产卵，为人工杂交提供质量、数量俱佳的卵子精子，同时还限定孵化时的关键参数(包括孵化水位、水温、水流速度、pH值、溶解氧以及受精卵消毒等)，为受精卵的顺利孵化提供适宜的环境条件。该方法为洞穴鱼类研究提供了优良的研究素材。
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