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公开(公告)号：CN113406065A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110676027.2
申请日：2021-06-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟血清抗体IPMA检测试剂及其制备方法，所述检测试剂中非洲猪瘟病毒选择非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD)，感染细胞选择PK15细胞作为非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD)的接种细胞。检测用抗原是感染细胞的全病毒，检测出的抗体能够较真实地体现抗体本身或接近抗体本身的血清反应，在非洲猪瘟缺乏针对所有毒株有效中和抗体的条件下，IPMA具备成为ASF血清学检测“金标准”的潜在价值。本发明的IPMA检测试剂在检测的敏感性上高于ELISA，特异性和检测时间上与ELISA检测相当，但对仪器设备要求较低，只需借助普通光学显微镜进行观察和判定，同时，IPMA检测结果可长期保存，便于后期实验结果整理与档案调取。
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公开(公告)号：CN113373171A
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN202110579577.2
申请日：2021-05-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒及其构建方法。所述的穿梭质粒是基于细菌‑酵母人工染色体，从pGEN‑MCS质粒上通过PCR扩增得到hok‑sok和par元件，然后通过连接将稳定遗传元件hok‑sok和parA构建入细菌‑酵母人工染色体中，进而获得方便克隆长片段DNA、无抗性且在大肠杆菌内稳定遗传的酵母‑大肠杆菌穿梭质粒。优选的，所述的穿梭质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的穿梭质粒载体，不但可实现酵母、细菌内穿梭，可在酵母中通过同源重组进行多片段DNA组装，还可以稳定的在大肠杆菌中复制、遗传，便于进行DNA提取。
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公开(公告)号：CN112941088A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110155985.5
申请日：2021-02-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种与布氏杆菌毒力相关的基因及其在布氏杆菌毒力评价及制备弱毒布氏杆菌中的应用。本发明首先利用蛋白结构域及3D结构预测鉴定到一种与布氏杆菌毒力相关的基因——abcS基因。利用RecA同源重组的方法，以卡那霉素抗性基因作为筛选标记替换abcS基因，构建了布氏杆菌abcS基因缺失株M28ΔabcS。荧光定量PCR试验表明，M28ΔabcS突变株中毒力因子四型分泌系统的表达严重下降。利用Balb/c小鼠持留感染模型评价了布氏杆菌abcS基因对布氏杆菌M28毒力的影响。结果显示：abcS基因缺失显著降低感染时脾脏的肿胀，同时严重影响细菌在小鼠脾脏内复制存活的能力，证实该基因是布氏杆菌M28的毒力相关基因。本发明的提出为布氏杆菌疫苗和药品的研发，提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN110981944A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911096168.6
申请日：2019-11-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明通过筛选ASFV四种重要结构蛋白p30、p54、p72以及CD2v细胞免疫抗原优势表位，并建立相应酶联免疫斑点试验方法。所筛选得到的多肽具有很高的氨基酸序列保守性，可有效诱导ASFV特异性细胞免疫反应，可作为ASFV表位载体疫苗的候选免疫原。本发明筛选得到的ASFV结构蛋白T细胞表位多肽，并建立了相应的ELISPOT检测方法，为ASFV候选疫苗的效力评价提供了有力工具，也为ASFV多肽载体疫苗的研发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110093324B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201910348878.7
申请日：2019-04-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及可作为疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒及疫苗以及构建方法。本发明采用非洲猪瘟中国流行株Pig/CN/HLJ/2018，经基因工程技术，将非洲猪瘟病毒的毒力基因缺失，获得MGF360‑505R缺失和CD2V与MGF360‑505R联合缺失的基因缺失病毒。经实验表明所述两种毒株均能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100％免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110093324A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910348878.7
申请日：2019-04-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及可作为疫苗的基因缺失减毒非洲猪瘟病毒及疫苗以及构建方法。本发明采用非洲猪瘟中国流行株Pig/CN/HLJ/2018，经基因工程技术，将非洲猪瘟病毒的毒力基因缺失，获得MGF360-505R缺失和CD2V与MGF360-505R联合缺失的基因缺失病毒。经实验表明所述两种毒株均能提供对非洲猪瘟中国流行强毒株的100％免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN109593761A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811572734.1
申请日：2018-12-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/113 , C12N1/21 , A61K39/10 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种与布鲁氏菌毒力相关的small RNA及其在制备弱毒布鲁氏菌中的应用。本发明应用Northern blot证明在布鲁氏菌强毒株M28中存在sRNA Clu7，利用同源重组的方法，构建了该sRNA缺失株M28ΔClu7，以鼠巨噬细胞RAW264.7和Balb/c小鼠为模型评估了该sRNA对M28毒力的影响。结果显示该sRNA缺失后能显著下调强毒株M28在鼠巨噬细胞RAW264.7和小鼠脾脏内复制生存的能力。在接种第5周时，M28ΔClu7从小鼠体内完全清除，与M28相比毒力显著下降。小鼠攻毒保护实验显示：免疫M28ΔClu7对小鼠抵抗强毒M28感染的保护效果达到了疫苗株M5-90的保护力。以上结果预示着sRNA Clu7对布鲁氏菌的毒力有巨大的决定作用。本发明的提出对揭示布鲁氏菌毒力机制起到了巨大的推动作用。为布鲁氏菌新候选疫苗株的研发提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN119060172B
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202411177636.3
申请日：2024-08-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N5/16 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种胶体金检测卡，该检测卡中含有底板、样品垫、吸水垫，胶体金垫和设置有质控线和检测线的透水膜，胶体金垫中含有胶体金标记的微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024207的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体，检测线中含有微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024208的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。该检测卡检测非洲猪瘟病毒P30蛋白，特异性强，敏感性高，可用于非洲猪瘟病原检测，具备临床应用前景。
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公开(公告)号：CN115717129B
公开(公告)日：2025-04-18
申请号：CN202211365536.4
申请日：2022-11-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开一种非洲猪瘟病毒基因缺失的重组减毒株及其制备方法与应用，属于兽用生物制品领域技术领域，本发明的目的是为了提供了一种构建非洲猪瘟减毒株的策略。本发明提供一种非洲猪瘟病毒基因缺失的重组减毒株，所述重组减毒株是采用基因工程手段在非洲猪瘟病毒株Pig/CN/HLJ/2018中联合缺失了H240R基因和MGF505‑7R基因编码蛋白的功能，获得了一株安全性高的减毒非洲猪瘟候选苗株。所述减毒候选疫苗株免疫猪后对猪完全致弱，且能够对Pig/CN/HLJ/2018强毒株攻毒提供100％免疫保护，可作为安全和有效的防控中国非洲猪瘟疫情的疫苗，具有极大的社会价值。
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公开(公告)号：CN116199776B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202310202294.5
申请日：2023-03-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种广谱中和活性新型冠状病毒的单克隆抗体及其应用，属于免疫学与生物技术领域。本发明制备筛选得到了一种具有广谱中和活性单克隆抗体，其重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；其轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明还公开了广谱性中和活性单克隆抗体在鉴定高度保守性中和抗原表位以及制备基因工程治疗性抗体等方面的应用。
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