一种无毒Ⅱ型伪狂犬病毒毒株及其应用

    公开(公告)号:CN116024182A

    公开(公告)日:2023-04-28

    申请号:CN202310096073.4

    申请日:2023-01-18

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株PRV‑DX经过基因组突变,使UL39基因编码的蛋白RR1带有K759R点突变而获得,本发明无毒II型伪狂犬病毒致病力减弱,免疫原性强,用该无毒II型伪狂犬病毒制备活疫苗可对小鼠和猪等伪狂犬病毒易感动物提供有效免疫。

    一种促进青蟹种蟹再次抱卵的方法

    公开(公告)号:CN115997711A

    公开(公告)日:2023-04-25

    申请号:CN202211664671.9

    申请日:2022-12-23

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了一种促进拟穴青蟹种蟹再次抱卵的方法,属于水产养殖技术领域。本发明提供的促进青蟹种蟹再次抱卵的方法,通过投喂鲜活缢蛏和花蛤,同时在膏蟹促产进行转池处理,使种蟹提高抱卵数量和产卵数量。可见本发明提供的方法不仅能有效提高青蟹种蟹利用率,缓解育苗期间青蟹种蟹不足的难题,而且能有效保障青蟹苗种的数量,有利于青蟹养殖产业的可持续健康发展。

    一种用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN113151586B

    公开(公告)日:2022-09-13

    申请号:CN202110081815.7

    申请日:2021-01-21

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了用于检测、鉴别猪伪狂犬病毒Ⅰ型和Ⅱ型的引物组合、试剂盒及方法。所述引物组合包括:上游引物Ⅰ:5’‑GAAGCCCCCGCGGAACAA‑3’,上游引物Ⅱ:5’‑CGCGGCCTCCACGCCCGC‑3’,下游引物:5’‑GCGAGGGAGGCGTTGGCG‑3’,其中,上游引物Ⅰ与下游引物配合用于扩增Ⅰ型猪伪狂犬病毒获得283bp序列,上游引物Ⅱ与下游引物配合用于扩增Ⅱ型猪伪狂犬病毒获得351bp序列。本研究通过生物信息学分析方法明确可用于基因分型的gC靶基因,并首次利用AS‑PCR原理来设计分型引物,并通过实验筛选到特异性分型的上游引物,而共用保守下游引物,进而减少了体系中的引物种类与数量,降低错配的可能,从而提高扩增效率,最终建立了灵敏度为104的单重PCR和灵敏度为104的双重PCR检测体系。

    一种非洲猪瘟病毒基因II型和非II型的快速鉴别方法及其应用

    公开(公告)号:CN114645099A

    公开(公告)日:2022-06-21

    申请号:CN202210140250.X

    申请日:2022-02-16

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 一种非洲猪瘟病毒基因II型和非II型的快速鉴别方法及其应用,本发明对B646L基因的特异性差异位点1500位核苷酸进行检测,非洲猪瘟病毒基因II型为C,基因非II型为T。通过设计病毒不同基因型差异位点的特异性引物来有效区分非洲猪瘟病毒基因II型和非II型。筛选得到的引物对非洲猪瘟病毒基因II型的扩增效率高,对非洲猪瘟病毒基因非II型扩增效率低,不需通过测序即可判断非洲猪瘟病毒基因型为II型或非II型,检测速度快,成本低。

    一种提高大鲵繁殖出苗率的方法

    公开(公告)号:CN112772554A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202011626365.7

    申请日:2020-12-30

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高大鲵繁殖出苗率的方法,所述方法为:在大鲵产卵后的第35‑38天,收集洞穴内的大鲵卵,置于塑料筛中,将同一洞穴内的大鲵受精卵收集在同一塑料筛中;将塑料筛置于水温17‑18℃、溶氧5‑7mg/L、水深20‑40cm、黑暗的养殖池中;待产卵40天后,同一塑料筛内的大鲵卵有35~45%出苗时,对无法顺利出苗的大鲵卵进行人工破膜:取一无菌的探针平行于胚胎方向,在胚胎头边缘3mm处扎入卵膜,并用探针划破卵膜,胚胎即可沿卵膜破口游出,顺利孵化。本发明人工破膜操作可提升出苗率100%以上,最终出苗率可提高到98‑100%。人工破膜方法操作简单、实用,普适性广,人工破膜操作的大鲵苗后续生长正常,解决了大鲵繁殖出苗率低的关键问题,大幅提升大鲵繁殖的经济效益。

    一种用于制备DNA Ladder的引物对、DNA片段及方法

    公开(公告)号:CN108504655B

    公开(公告)日:2020-10-20

    申请号:CN201810257231.9

    申请日:2018-03-27

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 董伟仁

    Abstract: 本发明公开了一种用于制备DNA Ladder的引物对、DNA片段及方法。该引物对扩增获得的双链DNA片段5’端和3’端具有相同的一段序列,该双链DNA片段既能作为PCR反应的引物,又能作为模板。随着PCR循环数的增加,小片段的DNA片段在PCR体系中逐渐减少,而扩增得到的大片段则逐渐增加,控制PCR循环数即可获得分子量相差固定核苷酸数量大小的DNA Ladder。利用本发明中的DNA Ladder制备方法,可以在一次PCR反应中制备出片段浓度相对均一的DNALadder,该方法克服了单片段PCR扩增法所需劳动强度大、多片段PCR扩增法条件优化复杂等缺陷,能够快速地制备DNA Ladder。

    Prx I重组蛋白在制备抗细菌性败血症药物中的应用

    公开(公告)号:CN104548073B

    公开(公告)日:2017-08-11

    申请号:CN201410766259.7

    申请日:2014-12-12

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种过氧化物氧化还原酶Prx I重组蛋白在制备抵抗急性细菌性败血症药物中的应用,所述的重组蛋白是在过氧化物氧化还原酶Prx I氨基酸序列的氨基末端或羧基末端连接回输肽序列构建而成;所述回输肽的氨基酸序列为AAVLLPVLLAAP;本发明首次提供了过氧化物氧化还原酶Prx I重组蛋白除了具有分解H2O2的经典生化功能外,还具有新的抵抗急性细菌败血症的免疫学功能;通过对该蛋白分子进行重组改造,显著增强活性蛋白进入细胞的效率,通过提高利用效率而赋予其具有更高的生物学活性,从而降低生产成本,具有良好的应用前景。

    猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组及分型试剂盒和分型方法

    公开(公告)号:CN118957149B

    公开(公告)日:2025-05-16

    申请号:CN202411044675.6

    申请日:2024-07-31

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组及分型试剂盒和分型方法,属于基因检测技术领域。本发明提供了一套猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组,包括一对通用引物和基因分型TaqMan探针。本发明所述基因分型探针引物组在稀释度(101copies/μL~106copies/μL)范围内线性关系良好,最低检测限度均为101copies/μL,具有良好的灵敏性;与其他病毒不存在交叉反应,特异性良好;组内和组间各稀释度的变异系数均小于3%,重复性良好,因此,本发明所述基因分型探针引物组能够稳定地鉴定PRV基因型。

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