一种新型嗜盐古菌胞外蛋白酶的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111705050B

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202010425190.7

    申请日:2020-05-19

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种新型嗜盐古菌胞外蛋白酶的制备方法及其应用;步骤为:首先基于嗜盐古菌DYF 46的基因组获得编码基因hly;通过分子克隆技术将hly连接到载体上构建重组质粒;将重组质粒转化原核生物宿主,得到转化后的重组宿主细胞在含有卡那霉素的LB液体培养基中培养,经培养、诱导表达后低温离心收集菌体,于细胞裂解液中进行重悬,经超声破碎、离心收集上清液,用于重组蛋白纯化;采用镍亲和层析纯化蛋白结合柱上复性方法获得成熟酶,经凝胶过滤层析纯化后获得高纯度Hly。本发明得到的Hly具有优良的酶学特性,可应用于洗涤剂、废水处理、制药和环境修复等复杂、含盐的降解蛋白质的生产加工过程中。

    一种重组嗜盐古菌蛋白酶的制备方法

    公开(公告)号:CN110862978B

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN201910938849.6

    申请日:2019-09-30

    Applicant: 江苏大学

    Inventor: 崔恒林 韩冬 侯靖

    Abstract: 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种重组嗜盐古菌蛋白酶的制备方法;步骤为:以Halostella sp.DL‑M4的基因组为模板,pET28a质粒为表达载体构建重组质粒;重组质粒转化大肠杆菌细胞,诱导表达,离心收集菌体进行细胞重悬及破碎,再次离心取上清液,加入β‑巯基乙醇得到混合液过镍柱,酶原与镍介质结合复性,最后经二次除杂蛋白及目标蛋白洗脱、超滤离心浓缩、凝胶过滤层析,得到重组嗜盐古菌蛋白酶;本发明具有良好的通用性,纯化步骤更简单,生产周期更短,获得的蛋白酶纯度高,最终获得比酶活为1159.15U/mg的嗜盐古菌蛋白酶。

    一种新型嗜盐古菌亚硝酸盐还原酶的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114134125A

    公开(公告)日:2022-03-04

    申请号:CN202110593384.2

    申请日:2021-05-28

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种新型嗜盐古菌亚硝酸盐还原酶的制备方法及其应用;步骤为:首先基于嗜盐古菌(Haloterrigena sp.)KZCA68‑1的基因组获得编码基因nirKHtg;通过分子克隆技术将nirKHtg连接到载体上构建重组质粒;将重组质粒转化嗜盐古菌宿主,得到转化后的重组宿主细胞在Hv‑YPC液体培养基中培养至稳定期后低温离心收集菌体,于细胞裂解液中进行重悬,经超声破碎、离心收集上清液,用于重组蛋白纯化;采用镍亲和层析纯化以及凝胶过滤层析纯化后,获得高纯度还原酶,记为NirKHtg。本发明得到的NirKHtg具有良好的酶学特性,高盐腌制食品、废水处理等过程中降解亚硝酸盐。

    基于醋糟和杂粕的一种高效低成本的微生物饲料蛋白

    公开(公告)号:CN102696860B

    公开(公告)日:2014-04-09

    申请号:CN201210176742.0

    申请日:2012-06-01

    Applicant: 江苏大学

    CPC classification number: Y02P60/873

    Abstract: 本发明涉及利用醋糟、杂粕经益生菌三期发酵,生产一种高效低成本的微生物饲料蛋白。是以醋糟为主要碳源,棉粕为主要氮源兼部分碳源,经食品级霉菌一期发酵预处理,再以芽孢杆菌和酵母菌为发酵菌种同时补料添加部分棉粕进行二期发酵,最后再添加部分豆粕和菜子粕作为氮源兼部分碳源,接种乳酸菌和耐酸双歧杆菌并充分混匀后,分装在单向膜厌氧袋中密封保存,即三期发酵获得成品。本发明生产成本极低,所以可以作为饲料组份,添加量达5-40%。由于成品不需要干燥处理,活菌数极高,酶量丰富,杂菌极少,饲养效果明显:大幅度提高畜禽饲料利用率,提高产量,改善肠道环境,提高免疫力和抵抗力,代替抗生素,改善动物产品品质。

    一种基于啤酒糟和米糠粕的饲用微生态制剂

    公开(公告)号:CN102687792A

    公开(公告)日:2012-09-26

    申请号:CN201210176743.5

    申请日:2012-06-01

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及利用啤酒糟和米糠粕经益生菌三期发酵,生产一种高效、极低成本的饲用微生态制剂,或者叫微生物饲料添加剂。其特征是:啤酒糟和米糠粕经过脉孢菌一期初步发酵预处理,充分降解木质素、纤维素等,再添加部分米糠粕和少量豆粕经芽孢杆菌和酵母菌二期发酵,吸收霉菌降解废弃物产生的营养物质及霉菌本身解体的营养物质。然后加部分米糠粕和少量豆粕,经乳酸菌、双歧杆菌等最后在单向膜厌氧袋中经三期厌氧发酵成成品。本发明固体原料不需高温灭菌,成品不需要干燥处理,保质期一年以上,添加量达5-30%,活性益生菌数极高,酶量丰富,杂菌极少,饲养效果明显,具有明显的生态和社会效益。

    芝麻抗氧化多肽组合物及其生产方法

    公开(公告)号:CN101423860B

    公开(公告)日:2011-07-06

    申请号:CN200810243669.8

    申请日:2008-12-11

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明涉及一种从芝麻饼粕中提取芝麻分离蛋白及制取芝麻抗氧化多肽的生产工艺。该方法采用碱提酸沉提取芝麻蛋白,采用酶解技术制取芝麻抗氧化多肽,生产过程包括芝麻饼粕脱脂、干燥、蛋白的提取,浓缩及干燥、酶解及喷雾干燥。工艺简单,产品形式多样,适于工业化生产。产品可直接食用,作食品营养强化剂,以提高蛋白质含量,如用于植物蛋白饮料、火腿,微生物培养基中等;还可作为食品抗氧化剂,延长食品保质期,如肉糜冷藏、油炸食品外衣等。

    小麦胚芽在线微波灭酶的方法和装置

    公开(公告)号:CN101120698A

    公开(公告)日:2008-02-13

    申请号:CN200710130943.6

    申请日:2007-09-03

    Applicant: 江苏大学

    Abstract: 本发明公开了一种小麦胚芽的在线微波灭酶的方法和装置,将微波灭酶装置安装在小麦面粉加工车间并与生产线相连接,从高方平筛上分离出的新鲜小麦胚芽通过溜管输送进入微波灭酶装置,该微波灭酶装置主要由控制系统、微波发生系统、传动系统、物料输送系统、温控系统和空气调节系统等六部分组成,物料输送滚筒连接上方进料口和下方出料口,微波发生系统安装在物料输送滚筒的下部,控制系统与微波发生系统电连接,温控系统安装在下方出料口附近,传动系统安装在上方进料口附近,本发明能提高小麦胚芽的稳定性,并实现工业化生产,生产能力为每小时处理麦胚5~50kg,麦胚可进行真空包装并可长期保存,为小麦胚芽的深度加工创造了条件。

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