提高HepGL肝癌细胞氨基甲酰磷酸合成酶表达的方法

    公开(公告)号:CN103710360A

    公开(公告)日:2014-04-09

    申请号:CN201310643626.X

    申请日:2013-12-03

    Inventor: 高毅 姜锡男 李阳

    Abstract: 本发明公开一种提高HepGL肝癌细胞氨基甲酰磷酸合成酶表达的方法,包括步骤:将HepGL肝癌细胞中提取的CPS1基因组DNA进行重亚硫酸盐处理;对根据处理后DNA扩增的CPS1启动子区域进行甲基化特异性基因扩增;将扩增出的甲基化序列进行测序;根据甲基化位点周围的碱基序列构建TALENs表达质粒及与甲基化位点同源的非甲基化同源质粒,其中,同源质粒中同源非甲基化序列为CG突变为CA的突变序列;将TALENs表达质粒和同源质粒转染至HepGL肝癌细胞中;筛选发生转染的HepGL肝癌细胞,并对其进行Q-PCR和蛋白质印迹法处理,以检测细胞中CPS1的mRNA及蛋白的表达量。本发明方法能够增强HepGL肝癌细胞代谢氨的能力。

    用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN103690997A

    公开(公告)日:2014-04-02

    申请号:CN201310654387.8

    申请日:2013-12-05

    Abstract: 本发明公开一种用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒,包括溶栓液、灌注液I、灌注液II、灌注液III及灌注液IV。溶栓液的各组分及浓度为:尿激酶100000IU/L、NaCL 9g/L;灌注液I的各组分及浓度为:EDTA 0.2g/L、NaCL 9g/L;灌注液II的各组分及浓度为:十二烷基硫酸钠5g/L、NaCL 9g/L;灌注液III的组分及浓度为:DNase I0.01g/L;灌注液IV的组分及浓度为:过氧乙酸0.01%。溶栓液、灌注液I、灌注液II、灌注液III及灌注液IV依次对肝脏进行灌注,可制备去细胞肝脏支架,此方法去肝脏细胞效果稳定,能够保留完整的细胞外基质结构及胶原蛋白等成分。

    对流式物质交换的生物人工肝系统

    公开(公告)号:CN119607294A

    公开(公告)日:2025-03-14

    申请号:CN202411829232.8

    申请日:2024-12-11

    Inventor: 李阳 高毅

    Abstract: 本申请公开一种对流式物质交换的生物人工肝系统:分浆通路,包括血浆分离器、动脉管路、静脉管路;生物净化通路,包括第一生物反应器、固液分离器、连接第一生物反应器的第一入口至血浆分离器的原血浆出口的净化前管路、连接第一生物反应器的净化出口至固液分离器的分离入口的净化后管路,以及连接固液分离器的净血浆出口至静脉管路的回流管路;生物再生通路,包括第二生物反应器、连接第二生物反应器的回收入口至固液分离器的肝细胞出口的肝细胞回收管路,以及连接第二生物反应器的再生出口至第一生物反应器的第二入口的生物补给管路;第一入口和第二入口在第一生物反应器中相对,使得第一生物反应器内部产生对流式物质交换状态。

    基于离心式血浆分离技术的全肝型生物人工肝系统

    公开(公告)号:CN116832243A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310934534.0

    申请日:2023-07-27

    Abstract: 本申请提供一种采用离心式血浆分离技术的全肝型生物人工肝系统,其至少包括以下依次连接的分管路:血浆输入分管路、第一分浆管路、供氧分管路、生物净化管路、第二分浆管路及返浆分管路,所述第一分浆管路至少包括第一离心式血浆分离器,所述第一离心式血浆分离器包括可旋转的分离腔室,所述分离腔室设有第一血液入口、第一血细胞出口及第一血浆出口,所述第一血细胞出口和第一血浆出口分设于所述分离腔室的内壁和外壁。本申请利用离心泵旋转产生的离心力对血液进行分浆,相较于现有的采用基于中空纤维管结构的膜式分浆器具有更高的分浆效率,并且能够降低分浆过程中血细胞的破坏,减少堵管的情况发生,提高了全肝型人工肝系统开展治疗的完成率。

    细胞规模化培养方法及所使用的微载体

    公开(公告)号:CN113061566A

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN202110321555.6

    申请日:2021-03-25

    Abstract: 本申请公开一种微载体,其包括凝胶分子和外基质分子,所述凝胶分子和外基质分子混合之后诱导进行凝胶化反应,生成水凝胶微载体;其中,所述凝胶分子为海藻酸钠或海藻酸钙,所述外基质分子为胶原蛋白、基质胶蛋白、硫酸软骨素、纤连蛋白和壳聚糖中的一种或一种以上的组合。本申请中的微载体的主要成分含有海藻酸钙复合材料。该材料的最大优势是在钙离子螯合剂存在下,材料易于膨胀变形,从而降低了材料与细胞之间的接触面积,细胞在轻微的物理剪切力下,即可脱落,实现细胞与微载体分离。整个过程不需要胰酶参与,即可实现细胞分离。

    实时监控的细胞培养系统及其培养方法

    公开(公告)号:CN110551632B

    公开(公告)日:2021-02-05

    申请号:CN201910677906.X

    申请日:2019-07-25

    Abstract: 为了在维持培养细胞微环境的稳定性的情况下观察细胞培养装置内部环境,本申请提供一种实时监控的细胞培养系统,所述实时监控的细胞培养系统包括:影像采集装置,用于采集所述培养系统内细胞的影像;细胞培养装置,包括用于培养细胞的细胞培养腔并与影像采集装置相对运动;旋转传动装置,用于提供所述影像采集装置和细胞培养装置之间相对周向运动的动力。本申请的技术方案可以令使用者无需开启细胞培养腔就可以观察到细胞培养的状态,有利于维持培养细胞的微环境平衡,同时降低使用者频繁开启或闭合的工作量,还有利于降低细胞培养过程中细菌侵入的风险,提升细胞培养的存活率。

    实时监控的细胞培养系统及其培养方法

    公开(公告)号:CN110551632A

    公开(公告)日:2019-12-10

    申请号:CN201910677906.X

    申请日:2019-07-25

    Abstract: 为了在维持培养细胞微环境的稳定性的情况下观察细胞培养装置内部环境,本申请提供一种实时监控的细胞培养系统,所述实时监控的细胞培养系统包括:影像采集装置,用于采集所述培养系统内细胞的影像;细胞培养装置,包括用于培养细胞的细胞培养腔并与影像采集装置相对运动;旋转传动装置,用于提供所述影像采集装置和细胞培养装置之间相对周向运动的动力。本申请的技术方案可以令使用者无需开启细胞培养腔就可以观察到细胞培养的状态,有利于维持培养细胞的微环境平衡,同时降低使用者频繁开启或闭合的工作量,还有利于降低细胞培养过程中细菌侵入的风险,提升细胞培养的存活率。

    生物人工肝系统
    38.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110478548A

    公开(公告)日:2019-11-22

    申请号:CN201910703308.5

    申请日:2019-07-31

    Abstract: 本申请提供了一种生物人工肝系统,至少包括以下依次连接的分管路:上游末端设定为血液输入端的血液输入分管路、至少包括第一血浆分离器的第一分浆分管路、至少包括上游设定为人造血接入端的供氧分管路、至少包括全肝灌注组件的生物净化分管路、下游末端设定为血液输出端的返浆分管路。本申请生物人工肝系统能够给予体外肝脏充分氧合以发挥体外肝脏的分解、解毒以及生物合成等的作用,为肝衰竭患者和桥接患者等待肝移植过程争取足够的时间,同时为患者提供了肝自我再生的机会,并且能够避免血液与体外肝脏直接接触导致的免疫反应,克服了生物相容性问题。

    微流控装置及其使用方法、制备方法

    公开(公告)号:CN110241003A

    公开(公告)日:2019-09-17

    申请号:CN201910463809.0

    申请日:2019-05-30

    Abstract: 本发明提供了一种微流控装置,包括设有出口端和入口端的第一管道、若干组从所述第一管道的出口端汇入的第二管道,以及连通所述出口端的反应管道,所述第一管道的高度低于所述第二管道的高度,所述第二管道的高度低于或等于所述反应管道的高度。本发明还提供一种微流控装置用于生产微囊的方法,以及微流控装置的制备方法。本发明微流控装置能够提高包埋率且能够避免核心层微生物及组织细胞损伤。

    接管结构、器官灌注舱及生物人工肝系统

    公开(公告)号:CN110012900A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910294261.1

    申请日:2019-04-12

    Abstract: 本发明提供了一种接管结构、器官灌注舱及生物人工肝系统,其中接管结构包括端部设为连接端的第一接头和第二接头、以及供所述连接端接合的接头固定卡位,所述接头固定卡位设有两个相贯通的开口以形成分别导通所述第一接头和第二接头的接合通道,所述接合通道的外形与所述第一接头和所述第二接头的外形相匹配。本发明接管结构不仅结构组成简单,而且操作便捷;运用于器官灌注舱能够实现多管路的器官灌注舱的便捷化操作;运用于生物人工肝系统,能够大大缩短了肝脏的缺血时间,从而保持体外肝脏的活力。

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