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公开(公告)号：CN111088387A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN202010048255.0
申请日：2020-01-16
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了香樟叶绿体全基因组PCR扩增引物及其应用，属于生物科学技术领域。本申请设计了26对特异性樟叶绿体全基因组PCR扩增引物，引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.52所示，将其应用在香樟叶绿体全基因组序列PCR扩增、香樟品种鉴定和樟科叶绿体基因组系统发育研究中，完成了5个香樟不同化学型个体叶绿体基因组的扩增和Sanger测序，并基于贝叶斯法利用19个樟科植物的68个共有叶绿体蛋白编码基因序列构建了系统发育树。本发明引物重复性好，能够特异性的扩增出香樟叶绿体基因组序列，达到快速鉴别的目的，为香樟品种鉴定、亲缘关系分析及遗传进化分析提供了重要的依据。
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公开(公告)号：CN110760610A
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201911216302.1
申请日：2019-12-02
Applicant: 南京林业大学 , 江西省科学院生物资源研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了樟叶绿体SNP分子标记的多态性引物及其应用，属于林业分子生物学技术领域。本发明筛选了11对香樟叶绿体SNP分子标记的多态性引物，将其应用在古樟遗传多样性分析和古樟谱系分析中，基于叶绿体单倍型分析显示，不同单倍型分布差异明显，大部分单倍型只存在于特定的群体中，只有少数单倍型为共享单倍型，表明单倍型间存在一定的地理分化。18个古樟群体的遗传分化系数Fst为0.212，基因流Nm为0.929，表明古樟群体间存在中等的基因流。本发明的SNP分子标记重复性好，能够全面揭示香樟遗传多样性真实水平，为野生香樟资源保护利用提供理论依据。
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公开(公告)号：CN107164530B
公开(公告)日：2019-10-15
申请号：CN201710531477.6
申请日：2017-07-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于对不同银杏进行基因分型的SNP引物及检测方法。本发明的引物共22对，其中11对SNP引物组合可以用于构建银杏古树名木的指纹图谱。本发明利用银杏转录组数据开发的SNP引物能够对银杏不同个体进行基因分型，并且本发明操作方法简单，通量高，成本低。此外，本发明开发的11对SNP引物构建了不同群体中银杏古树名木的指纹图谱，验证的22个SNP位点还可以用来分子标记辅助育种，遗传多样性研究，基于SNP的关联分析，以及用于种质资源鉴定与分类等。
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公开(公告)号：CN109055296A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201810782286.1
申请日：2018-07-16
Applicant: 南京林业大学 , 广西壮族自治区林业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种马尾松嫩茎原生质体分离纯化及瞬时高效转化方法，首先使用组合酶将马尾松嫩茎酶解成原生质体，得到的原生质体经分离、纯化和预处理后，利用PEG法将携带GFP标签的空载体转入马尾松原生质体中，经过培养，使得空载体在原生质体中表达。本发明构建得到马尾松原生质体瞬时表达系统，易于操作和实现，该方法的转化效率可达50％。本发明适用于马尾松实生苗，利用嫩茎可得到较高质量的原生质体，原生质体活力可达80％以上，对于野外的成熟茎段组织也适用，为马尾松功能基因研究提供了快速便捷的研究平台。
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公开(公告)号：CN109055295A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201810782239.7
申请日：2018-07-16
Applicant: 南京林业大学 , 广西壮族自治区林业科学研究院
CPC classification number: C12N5/04 , C12N15/8201 , C12N2509/00
Abstract: 本发明公开了一种马尾松针叶原生质体分离纯化以及瞬时高效转化的方法，首先使用组合酶将马尾松针叶细胞酶解成原生质体，得到的原生质体经分离、纯化和预处理后，利用PEG法将携带GFP标签的空载体转入马尾松原生质体中，经过培养，使得空载体在原生质体中表达。本发明构建得到马尾松原生质体瞬时表达系统，易于操作和实现，该方法的转化效率可达60％，为马尾松功能基因研究提供了快速便捷的研究平台。本发明所使用的酶解体系适用于马尾松实生苗，利用幼嫩的针叶可得到较高质量的原生质体，原生质体活力可达80％以上，对于野外的成熟叶组织也适用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103757031B
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201410039361.7
申请日：2014-01-27
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C12N5/10 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种调控杨树根系构型的转录因子基因PeSHR2及其应用，该转录因子基因PeSHR2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明以南林895杨初生不定根为材料，通过RACE技术克隆了PeSHR2基因。同时，采用通路克隆技术构建其杨树过量表达载体pH35GS-PeSHR2，该基因位于启动子P35S之后，在启动子P35S的驱动下，PeSHR2可在杨树体内高效表达，从而调控根系构型的重塑。其中，PeSHR2基因是调控杨树根系形态检测的关键基因。本发明通过将PeSHR2基因转入杨树，过量表达PeSHR2的转基因杨产生单一粗壮不定根，似主根，同时伴有大量次级不定根和不定芽，且该类根生不定芽可以生长发育为新植株，说明PeSHR2基因是控制杨树根系构型重塑的关键调节因子，在林木基因工程领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN102586273B
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201210017783.5
申请日：2012-01-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/63 , C12N5/10 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种杨树不定根发育关键基因PeWOX11a，其核苷酸序列如SEQNO1所示。本发明通过将PeWOX11a基因转入杨树，过量表达PeWOX11a基因的转基因杨不定根数目增多，茎上有不定根产生，而且在异位不定根上还能再生出新植株，说明PeWOX11a基因是控制杨树不定根发生发育的关键调节因子，在林木基因工程和无性系林业领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN102373235B
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201110314837.X
申请日：2011-10-17
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种将外源基因转入杨树原生质体进行瞬时表达的方法，利用PEG-Ca2+将含有外源基因的瞬时表达载体转入杨树原生质体中，经培养，使外源基因在原生质体中表达。本发明方法构建得到杨树原生质体瞬时表达系统，易于操作和实现，为开展杨树功能基因研究开辟广阔天地，该方法的转化效率可达70％。
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公开(公告)号：CN102559682A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210018319.8
申请日：2012-01-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种杨树根原基特异表达启动子ProWOX11a，其核苷酸序列如SEQNO1所示。本发明以南林895杨DNA为材料，参考杨树基因组序列信息，设计特异性引物，扩增出启动子ProWOX11a序列。采用通路克隆技术构建植物启动子表达载体pBGGUS-ProWOX11a，该启动子序列后接GUS报告基因，在启动子ProWOX11a的驱动下，报告基因GUS可在植物体根原基及根尖分生组织处特异表达。因此，应用本发明提供的启动子，可以在植物基因工程中，诱导相应目的基因在根原基和根尖分生组织中特异表达，具有很好的实用性。
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公开(公告)号：CN101348830A
公开(公告)日：2009-01-21
申请号：CN200810022441.6
申请日：2008-07-21
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸分子检测引物及其用法，专用于鹅掌楸、北美鹅掌楸、杂交鹅掌楸的快速分子检测和鉴定，属于植物新品种分子鉴定领域。设计了一对SSR引物对即LT008L/R，该引物对在鹅掌楸中特异性扩增出190bp的产物，在北美鹅掌楸中特异性扩增出180bp的产物，在杂交鹅掌楸中特异性扩增出180bp和190bp两种产物。本发明采用一对特异性SSR引物，进行一次PCR扩增反应，利用8％聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，可直接根据产物的片断进行判断。本发明可直接应用于杂交鹅掌楸及鹅掌楸、北美鹅掌楸种水平的鉴定。
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