二硫化钼/纳米银复合物作为基质在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测中的应用

    公开(公告)号:CN105929017B

    公开(公告)日:2018-04-27

    申请号:CN201610415587.1

    申请日:2016-06-14

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了二硫化钼/纳米银复合物作为基质在基质辅助激光解吸电离(MALDI)飞行时间质谱检测中的应用。首先通过改进的化学锂离子插层剥离法制备得到寡片层的二硫化钼,并在此基础上通过原位还原硝酸银制备得到二硫化钼/纳米银复合物。以该复合物作为MALDI基质的分析方法适用于对分子量小于1000的小分子进行质谱分析。适合的分子种类包括氨基酸、寡肽、脂肪酸、生物碱、激素、抗生素、抗菌药和抗癌药物等。采用本方法检测质荷比值(m/z)小于1000的分子时,不存在基质背景干扰现象。本方法可在有机与生物质谱、质谱成像、蛋白质谱学、代谢组学、生物标记物发现和环境分析等领域得到有效的应用。

    多波长可调式表面等离子体共振成像装置及其应用

    公开(公告)号:CN107764776A

    公开(公告)日:2018-03-06

    申请号:CN201710761932.1

    申请日:2017-08-30

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明设计了一种多波段可调式表面等离子体共振成像装置及其应用,将具有宽带光谱的LED光源发出的光束使用线性滤光片进行滤光成单色光束,再通过准直镜和偏振片,形成p偏振光源,投射到SPR发生装置上,该装置的出射光束由CCD相机进行成像;还可以使用移动平台控制线性滤光片对光源波长进行线性调节,可以获得多波段入射光进行SPR成像,可以对芯片表面所有区域同时进行波段扫描来获得每个区域的共振谱图,以及在保证SPRI成像不发生畸变的条件下,对传感芯片表面每个区域的环境变化所产生的共振谱偏移量进行精确测量。使用该方法,能够使得芯片表面所有区域数据达到最佳灵敏度条件和提高仪器检测的动态范围与灵敏度。

    纳米银增强的比率型FRET探针及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN105606580B

    公开(公告)日:2018-01-12

    申请号:CN201610150965.8

    申请日:2016-03-16

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 许丹科 李慧

    Abstract: 本发明公开了纳米银增强的比率型FRET探针,它以十面体的纳米银球为内核,银球外表面键合有三种不同的核酸链形成荧光共振能量转移探针。本发明还公开了上述探针的制备方法和应用。此探针的特点是当存在目标物时,515nm和565nm处的荧光强度会同时发生变化,而两个波长下荧光强度的比值与目标物的浓度存在一定的线性关系。此种定量检测的方式不仅可以提高检测的灵敏度而且可以避免假阳性信号和外界环境的干扰。本发明还公开了包含上述探针的试剂盒及其在检测PDGF‑BB中的应用。本方法检测PDGF‑BB的线性范围为3.12ng/mL‑200ng/mL,检测限低,特异性好。

    一种用于检测乳铁蛋白含量的适配体及其应用

    公开(公告)号:CN106645050A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610894671.6

    申请日:2016-10-13

    Applicant: 南京大学

    CPC classification number: G01N21/6445

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测乳铁蛋白含量的适配体,所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO.5~65所示。本发明还公开了利用上述适配体检测乳铁蛋白的方法,该方法以荧光标记的适配体作为探针分子,通过适配体与乳铁蛋白的特异性结合使荧光偏振信号发生变化。荧光偏振信号与乳铁蛋白浓度之间存在线性关系从而实现对乳铁蛋白的定量检测。此方法灵敏度高,特异性好,检测的线性范围为0.78~50μg/mL。该方法能实现对复杂样品中目标物的测量,如牛奶中乳铁蛋白的测量。此外,该方法使用BioTeK酶标仪对96孔板直接扫描,达到了快速、高通量测量的要求,可以同时对多个样品进行有效测量。

    适配体修饰的纳米银探针及其应用

    公开(公告)号:CN104569420B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410529842.6

    申请日:2014-10-09

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种不同适配体分子同时修饰的纳米银探针以及可与之配套使用的快速显色试剂。纳米银探针以直径为10~30nm的纳米银球为内核,银球外表面键合有不同物质的适配体链和寡核苷酸链。本发明还公开了包含上述探针的试剂盒在同时可视化检测人免疫球蛋白E和血小板衍生生长因子中的应用。本发明的纳米银探针与显色剂联用可同时检测多种待测目标物,且可提高可视化检测的灵敏度,特异性好。此种纳米银探针的合成及修饰方法成熟,显色剂检测性能优良、稳定。两者配合使用可实现样本的多靶标检测,且可提高灵敏度,简化检测过程。

    荧光分子修饰的纳米银探针及其试剂盒与在检测链霉亲和素中的应用

    公开(公告)号:CN102796737B

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201210303189.2

    申请日:2012-08-23

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种荧光分子修饰的纳米银探针。纳米银探针以直径为10~30nm的纳米银球为内核,银球外表面键合有荧光分子链和寡核苷酸链。本发明还公开了包含上述探针的试剂盒与在检测链霉亲和素中的应用。本发明的纳米银探针耦合荧光增强液的方法能大大提高荧光检测的灵敏度,不需要通过改变仪器的结构来提高检测性能,巧妙地提高了检测能力。此种探针的合成及修饰方法成熟,荧光增强液廉价易得,两者的联合使用可以得到惊人的结果。为蛋白质的荧光分析检测提供了一种极好的信号放大的方法。

    一种利用微阵列微流控芯片筛选适配体的方法

    公开(公告)号:CN106480039B

    公开(公告)日:2019-11-12

    申请号:CN201610894672.0

    申请日:2016-10-13

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种新型微阵列微流控芯片应用于适配体筛选的方法。该筛选芯片综合应用微阵列和微流控技术,将正负筛过程集合在一块微流控芯片上,筛选7轮后即获得高亲和力的适配体。同时本发明还公开了乳铁蛋白适配体筛选的具体步骤,包括芯片制备、正负筛过程、PCR扩增等详细过程。该方法筛选出的适配体对靶标蛋白的特异性好,亲和性高;且该适配体较抗体更容易获得,可以大量、快速的体外合成;制备方法更为简单快捷,因此该适配体在许多领域将有望成为抗体技术有益的补充。此外,该正负筛集合的芯片模式方便、快捷、高效,可以用于其它蛋白的适配体筛选,为其他适配体筛选工作者提供了很好的思路设计和参考。

    基于双信号放大的荧光偏振适配体传感器及其应用

    公开(公告)号:CN106770138B

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201710068601.X

    申请日:2017-02-08

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了基于双信号放大的荧光偏振适配体传感器,包括信号产生探针和捕获探针,所述信号产生探针和捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID ON.1~15所示,该传感器用于均相溶液中乳铁蛋白的高灵敏性检测。本发明在不改变适配体高亲和力和特异性的前提下优化了适配体的结构。在该方法中,两段截断适配体分别修饰异硫氰酸荧光素(FITC)和银纳米粒子(Ag10NPs),加入乳铁蛋白后三者组装成截断适配体‑乳铁蛋白的复合物,缩短了Ag10NPs和FITC的空间距离。因此,Ag10NPs可以产生重量扩增效应和荧光表面增强效应,最终引起荧光偏振信号急剧增加。结果表明该传感器相对于传统的均相溶液检测限可以降低三个数量级,达到1.25pM。

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