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公开(公告)号:CN104673938A
公开(公告)日:2015-06-03
申请号:CN201510100532.7
申请日:2015-03-06
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2549/119
Abstract: 本发明属于分子生物学病毒检测领域,提供一种高灵敏度检测菊花B病毒的引物、利用该特异引物检测菊花B病毒的方法及引物的应用。其中,本方法步骤如下:1)设计针对菊花B病毒的两轮特异性引物;2)以CVB1-R为引物,对待检测菊花DNA进行反转录得到cDNA,并以步骤1)所述两轮特异性引物进行巢式PCR扩增;3)将步骤2)进行的第二轮PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,当获得381bp特异性片段时,表示待检测菊花感染菊花B病毒。本发明由于加入了特异的反转录引物进行巢式PCR,极大地提高了菊花B病毒检测灵敏度,经过验证灵敏度达到10-9ug/ul。本发明提供的方法,菊花CVB检测特异性强,工序简单,成本低廉。
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公开(公告)号:CN104372019A
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201410569007.5
申请日:2014-10-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程和转基因育种领域,提供包括有CmWRKY48基因的重组载体、转化细胞、转CmWRKY48基因切花菊的培育、鉴定方法及应用。转CmWRKY48基因切花菊的培育方法包括如下步骤:(1)菊花CmWRKY48基因的克隆(2)植物表达载体pMDC43-CmWRKY48的构建(3)农杆菌EHA105介导叶盘法转化菊花。对转化植株进行PCR、定量RT-PCR检测证实CmWRKY48基因已整合到转基因植株基因组DNA中并发生转录。对转基因植株进行抗蚜性检测,转基因植株抗蚜能力有很大提高,为利用基因工程技术选育菊花抗逆品种提供新颖而实用的方法,将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号:CN101513167B
公开(公告)日:2011-08-17
申请号:CN200910029625.X
申请日:2009-04-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明获得菊属与近缘属属间远缘杂种的方法,属于生物技术育种领域。选择栽培菊花品种为母本,以野生的抗病虫能力强或具特异观赏价值的近缘属物种为父本,采用组织培养手段进行杂种胚的离体培养,以克服菊属与近缘属远缘杂交后合子胚败育的障碍。对获得的后代材料进行杂种形态学鉴定和原位杂交鉴定,选择茎、叶、花序、表皮毛等形态学特征介于双亲之间、与母本不同、出现父本特异性状或双亲不具有的新性状的后代材料,进行原位杂交,若染色体组成为分别来源于双亲,即为获得的属间远缘杂交种。应用本方法成功地实现了菊属与多个近缘属的属间远缘杂交种,对现有栽培菊花品种进行了改良,并创造了一批有应用价值的新种质。
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公开(公告)号:CN116445645A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202310252064.X
申请日:2023-03-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6841 , C12N15/11 , G16B25/20 , G16B20/30 , G16B50/00
Abstract: 本发明公开了一种荧光原位杂交探针组,该寡核苷酸探针组包括重复序列寡核苷酸探针SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ IDNO.6。同时,公开了该荧光原位杂交探针的基于转录组快速获得方法,包含该荧光原位杂交探针的寡核苷酸探针杂交液,进行染色体高分辨率荧光原位杂交的方法。本发明方法简单易行,可操作性强,高效性和实用性突出。
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公开(公告)号:CN115813999A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211459774.1
申请日:2022-11-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K36/815 , A23L19/00 , A23L33/10 , A23L33/125 , C08B37/00 , A61K31/715
Abstract: 本发明公开了一种基于多糖提取制作无水菊花枸杞原浆的方法,该方法包括:(1)将菊花采用高压剪切、超临界流体萃取及等温降压工艺流程提取有效成分多糖,该过程不添加任何水;(2)将提取的多糖进行烘干,粉碎过筛,用枸杞制得的原浆稀释后加入枸杞原浆母液中混合既得。该方法采用高压剪切、超临界流体萃取及等温降压等一定的工艺流程提取有效成分,提取的多糖没有异味、品质优良,解决了菊花品种产量低或药用成分不高等现象,多糖得率可高达22.5%,并将菊花中的多糖提取物与枸杞原浆混合打破了菊花固态和液态枸杞原浆混合的技术问题。
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公开(公告)号:CN109792953B
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN201910085888.6
申请日:2019-01-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种菊花组培方法。本发明发包括配制多种抑菌剂组合的抑菌培养基,并向其中接种自然界广泛存在且易提取的灰绿青霉,使灰绿青霉在抑菌剂的作用下处于潜伏状态,并不引起真菌污染,在这种培养基中培养的菊花组培苗生长发育状况和炼苗后的表现均正常,对菊花种苗的产量和质量均无影响;将抑菌培养基中的菊花组培苗接种到普通培养基中,没有抑菌剂的抑制作用,组培苗大范围爆发真菌污染且污染率达100%。通过此方法在保证菊花组培苗生产效率与质量的同时,能够有效保护菊花的知识产权品种,只有拥有品种授予权的单位可以获得健康的组培苗,防止优良品种非法外流。
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公开(公告)号:CN104372019B
公开(公告)日:2017-06-06
申请号:CN201410569007.5
申请日:2014-10-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程和转基因育种领域,提供包括有CmWRKY48基因的重组载体、转化细胞、转CmWRKY48基因切花菊的培育、鉴定方法及应用。转CmWRKY48基因切花菊的培育方法包括如下步骤:(1)菊花CmWRKY48基因的克隆(2)植物表达载体pMDC43‑CmWRKY48的构建(3)农杆菌EHA105介导叶盘法转化菊花。对转化植株进行PCR、定量RT‑PCR检测证实CmWRKY48基因已整合到转基因植株基因组DNA中并发生转录。对转基因植株进行抗蚜性检测,转基因植株抗蚜能力有很大提高,为利用基因工程技术选育菊花抗逆品种提供新颖而实用的方法,将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号:CN106381302A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610818826.8
申请日:2016-09-12
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12N9/001 , C12N15/8203 , C12N15/8218 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,公开了基于TRV-VIGS技术快速鉴定菊花脑基因功能的方法,通过构建含有内源目的基因片段的TRV2病毒沉默表达载体质粒,借助叶片注射法瞬时转化菊花脑,诱导菊花脑内源目的基因发生沉默,从而鉴定该内源目的基因的功能。本发明方法建立了TRV-VIGS沉默菊花脑内源基因从而鉴定基因功能的体系,其具有快速,高通量,易于操作等优势,为开展菊花脑基因功能研究提供了新途径。
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公开(公告)号:CN106269589A
公开(公告)日:2017-01-04
申请号:CN201610663299.8
申请日:2016-08-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于栽培育种领域,涉及一种大花型茶用、观赏兼用菊花品种的高效筛选方法。本发明从传统秋菊、大花单头型切花菊品种中选择生长旺盛、着花多、花期较早,且花型端正、花径中大型、花色纯正的黄白色及少量其他颜色品种,进一步通过感官品质鉴定和化学成分测定,再采用模糊综合评价法进行分析评价,以筛选大花型茶用、观赏兼用菊花品种,本发明能够丰富茶用菊品种,满足市场多样化、个性化需求,这将对精品茶用菊的市场开发具有重要意义。
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公开(公告)号:CN104313150B
公开(公告)日:2016-09-07
申请号:CN201410568698.7
申请日:2014-10-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供菊花抗蚜性关联分子标记、分子标记引物、分子标记筛选方法及上述三者在菊花新品种培育上的应用。菊花抗蚜性关联分子标记包括主效QTL位点NoaE2G1、NoaE2G7、NoaE1H3、NoaE2H7、NoaE2H8的分子标记。其筛选方法包括:(1)试验材料及其表型数据的获得;(2)菊花连锁图谱构建;(3)菊花抗蚜性状的QTL定位;(4)菊花抗蚜性状关联分子标记的确定。解决了目前菊花抗蚜性状基因的精确定位和克隆的研究在国内外几乎空白这一现状,筛选出与菊花蚜虫抗性基因紧密关联的分子标记,建立菊花抗蚜性分子标记辅助选择体系,提高菊花抗蚜性选择效率,为菊花新品种的选育奠定基础。
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