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公开(公告)号：CN106479960A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610970091.0
申请日：2016-10-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种光倒刺鲃鳍细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)光倒刺鲃鳍的获取：采用亚甲基蓝和酒精联合对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有细胞生长因子、胎牛血清、青霉素、链霉素、庆大霉素和两性霉素B的DMEM/F12或L-15培养液进行培养；3)传代培养：传至第8代时，细胞培养液换成基础培养液，所述光倒刺鲃鳍细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的光倒刺鲃鳍细胞系能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，能满足对光倒刺鲃这一经济物种种质资源保存和理论研究的需要，还可以反复冻融，可应用于细胞生物学、病毒学、毒理学、分子生物学、遗传学和免疫学等重要研究。
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公开(公告)号：CN104805052A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510204471.9
申请日：2015-04-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种软鳍新光唇鱼肌肉细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)软鳍新光唇鱼肌肉的获取：高锰酸钾和酒精联合对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有硫酸卡那霉素、硫酸链霉素以及两性霉素B的DMEM培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述软鳍新光唇鱼肌肉细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的软鳍新光唇鱼肌肉细胞系形态为不规则多角形，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，满足了对软鳍新光唇鱼种质资源保存和理论研究及应用的需要。
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公开(公告)号：CN102757933B
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201210277865.3
申请日：2012-08-07
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种鱇浪白鱼肌肉细胞系的构建方法，属于淡水生物细胞培养技术领域。该方法首先配制细胞培养液，以鱇浪白鱼肌肉组织为材料，清洗剪碎后，接种于25cm2培养瓶中，置于28℃培养箱培养。每隔3天半量更换培养液，待细胞长成单层后，采用胰蛋白酶消化法进行传代。5天传代一次，传至第10代时，培养液中血清浓度降至10%，此时细胞系建立成功。本发明的有益效果在于：1.操作简便易行；2.所构建的鱇浪白鱼肌肉细胞系（AGM）细胞生长状态良好，形态为成纤维样细胞，能连续传代50代以上，能直接用于鱇浪白鱼细胞生物学特性及免疫抗病基因功能的研究；3.该构建方法也适用于其他鱼类肌肉细胞系。
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公开(公告)号：CN102763641A
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201210277918.1
申请日：2012-08-07
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 滇池金线鲃精子超低温冷冻保存及复苏方法，属于低温生物学技术领域。方法为：选择性成熟的优质原种或良种，用100 ppm的MS-222麻醉5 min，挤压擦干的腹部，成熟精液流入1.5 mL离心管，检测鲜精活力，活力在85%以上的精液用于冷冻。将精液与抗冻液（D-15+7.5%乙二醇）按体积比1：2的比例稀释，分装，4℃平衡60 min，在液氮面上方6 cm处平衡2 min，液氮面上平衡2 min后投入液氮中保存。精子复苏方法是在37℃水浴快速晃动20 s解冻，将挤出的滇池金线鲃鱼卵与解冻后的精液按1：105的数量比混合使卵受精。本发明具有成本低，操作简便，保存时间长，复苏后精子的活力较高，人工繁殖的滇池金线鲃鱼的受精率和孵化率较高，能投入规模生产的优点；对于开展鱼类资源恢复与重建也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN102757934A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210277940.6
申请日：2012-08-07
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种鱇浪白鱼鳍细胞系的构建方法，属于淡水水生生物细胞培养技术领域。鱇浪白鱼鳍细胞系的构建方法，是以鱇浪白鱼尾鳍组织细胞为材料，采用组织块法启动原代培养，在含有胎牛血清和人碱性成纤维细胞生长因子的pH值为7.0-7.4的DMEM/F12培养基中培养；采用胰蛋白酶消化法进行传代培养。本发明的有益效果在于：1、在保证鱼体存活的前提下，操作简便易行；2、构建的鱇浪白鱼鳍细胞系（AGF）形态为成纤维样细胞，细胞生长状态良好，能够连续传代，直接用于鱇浪白鱼细胞生物学特性及功能基因的研究，满足了对鱇浪白鱼分子细胞水平理论研究的需要；3、该构建方法也适用于其他鱼类构建鳍条的细胞系。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101779605B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201010114389.4
申请日：2010-02-26
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明涉及一种抚仙金线鲃的人工受精方法，属鱼产品养殖技术领域。本发明方法如下：采用湿法受精。将粘附着受精卵的棕片放入50ppm的水霉灵水溶液中消毒20分钟，取出挂在20m2孵化池中进行孵化。水温18-20℃，pH7.5-8.0，用氧气泵进行增氧，水中溶氧6.5-8.0/L；每隔24小时以同样的方法消毒一次，连续消毒3天，144小时完成孵化。驯养水位保持在1.0-1.2m，水温16-21℃，水中溶氧6.5-8.0/L；用遮光网遮盖池面2/3遮光，并在出水口用40目纱窗网拦截防逃；前7天投喂水生昆虫和水蚯蚓；转食期投喂15天蛋白含量较高的粉状饲料拌上10％鱼粉。定型期投喂粗蛋白含量34％的颗粒饵料。本发明具有成本低、操作简便，抚仙金线鲃生长良好，成活率达95％以上的优点，能用于大规模生产。
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公开(公告)号：CN101554145B
公开(公告)日：2011-08-24
申请号：CN200910094487.3
申请日：2009-05-22
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明涉及一种滇池金线鲃的人工驯养方法，属鱼产品养殖技术领域。滇池金线鲃的人工驯养方法，包括饲料选择和饲料方式，其中：饲料选择：饲料选用浆状食物虾浆、蛋黄浆、挂喂粉状饲料、投喂丰年虫、微粒饲料、大颗粒料人工混合鱼用商品饲料；饲料方式：0-6天刚出膜的滇池金线鲃幼苗长5.5-7.5mm，全靠卵黄囊供给营养，7天后的滇池金线鲃开始摄食浆状食物虾浆和蛋黄浆，20日后摄食丰年虫体并逐渐摄食粉状饲料，70日后摄食微粒饲料，半年后摄食小颗粒料人工混合鱼用商品饲料并逐步摄食大颗粒料人工混合鱼用商品饲料，投食量为体重的2-3％。本发明具有成本低、操作简便，能投入产业化、集约化生产，成活率高的优点。
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公开(公告)号：CN101779605A
公开(公告)日：2010-07-21
申请号：CN201010114389.4
申请日：2010-02-26
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明涉及一种抚仙金线鲃的人工受精、孵化及驯养方法，属鱼产品养殖技术领域。本发明方法如下：采用湿法受精。将粘附着受精卵的棕片放入50ppm的水霉灵水溶液中消毒20分钟，取出挂在20m2孵化池中进行孵化。水温18-20℃，pH 7.5-8.0，用氧气泵进行增氧，水中溶氧6.5-8.0/L；每隔24小时以同样的方法消毒一次，连续消毒3天，144小时完成孵化。驯养水位保持在1.0-1.2m，水温16-21℃，水中溶氧6.5-8.0/L；用遮光网遮盖池面2/3遮光，并在出水口用40目纱窗网拦截防逃；前7天投喂水生昆虫和水蚯蚓；转食期投喂15天蛋白含量较高的粉状饲料拌上10％鱼粉。定型期投喂粗蛋白含量34％的颗粒饵料。本发明具有成本低、操作简便，抚仙金线鲃生长良好，成活率达95％以上的优点，能用于大规模生产。
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公开(公告)号：CN116875705A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202311045953.5
申请日：2023-08-18
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物技术领域，公开了一种用于鉴别金线鲃的探针引物组及应用，用于鉴别金线鲃的探针引物组包括：引物和探针；引物为Sin‑F、Sin‑R；引物为Sin_prob；Sin‑F的序列为SEQ：ID：NO:1；Sin‑R的序列为SEQ：ID：NO:2；Sin_prob的序列为SEQ：ID：NO:3。本发明可在野外环境下，通过收集水体对金线鲃进行快速识别，并且能够根据水体eDNA拷贝数提供金线鲃的存在情况，为金线鲃的野外分布调查以及相关政策的制订提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN115812645A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211532612.6
申请日：2022-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明提供了一种大眼圆吻鲴和鲢的远缘杂交方法，属于水产养殖技术领域。本发明提供的大眼圆吻鲴和鲢的远缘杂交方法，包括亲鱼培育、人工授精、鱼卵孵化和鱼苗饲养，严格控制亲鱼培育环境参数和饲料种类，为大眼圆吻鲴和鲢模拟良好的生存条件，有利于野生大眼圆吻鲴和鲢较快适应人工养殖环境，同时避免催产剂使用实现人工环境下自然产精产卵，为人工杂交提供质量、数量俱佳的卵子精子,同时还限定孵化时的关键参数(包括孵化水温、水流速度、pH值、溶解氧以及受精卵消毒等)，为受精卵的顺利孵化提供适宜的环境条件。该方法为高档淡水水产养殖业培育出了一种便于人工规模养殖的杂交新品种。
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