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公开(公告)号：CN110295137A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910626036.3
申请日：2019-07-11
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种乌斑鳢肾细胞系，其分类命名为乌斑鳢肾细胞系CAMK，于2019年5月8日保存在中国典型培养物保藏中心，保藏登记编号为CCTCC NO:C201994，上述乌斑鳢肾细胞系的构建方法为：取乌斑鳢消毒后取肾，于含青霉素-链霉素双抗溶液的培养基中浸泡后剪成小块，胰酶消化液消化，完全培养基重悬混匀，得到重悬混匀液于细胞培养瓶中恒温培养至细胞铺满板子，用胰酶-EDTA消化液消化后，加入完全培养基继续培养，传代3次后，冻存即得乌斑鳢肾细胞系。本发明中首次成功在体外培养了乌斑鳢肾细胞系，所使用的是鱼类细胞培养的最常用的培养基、且在简单的条件进行原代细胞筛选培养，保证最终获得的细胞无需特殊试剂和条件就能增殖，为其今后的应用提供更好的空间。
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公开(公告)号：CN105087491B
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201510531300.7
申请日：2015-08-26
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种锦鲤脑细胞系的构建方法及其应用，将锦鲤脑组织先放入含胶原酶和胰蛋白酶消化液A中进行消化，收集细胞，再加入含EDTA‑4Na的消化液B中进行消化，收集消化后的细胞进行原代培养和传代培养即可获得锦鲤脑细胞系；本发明针对锦鲤脑组织细胞的特征，采用胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离脑组织细胞，进行原代培养，继而成功构建了锦鲤脑细胞系，已连续传至100代以上，可提供大量的锦鲤脑来源细胞，且细胞能维持良好的生长状态，可以对其进行冷冻保存。本发明锦鲤脑细胞系对锦鲤疱疹病毒具有敏感性，接毒后均出现细胞病变，电镜观察可以发现增殖的病毒粒子，本发明细胞系可以直接应用于病原特性研究及疫苗研制。
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公开(公告)号：CN109628640A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811630534.7
申请日：2018-12-29
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 , 广东省实验动物监测所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101 , C12Q2531/119 , C12Q2565/625
Abstract: 本发明公开了一种快速检测鲤春病毒血症病毒的RPA‑LFD引物、方法和试剂盒，本发明设计了针对RPA‑LFD反应的引物和探针，在一个反应体系内检测鲤春病毒血症病毒的RPA‑LFD试剂盒；本发明准确性高、特异性好、重复性好、可以准确、快速地进行检测，反应结果易于观察，通过试纸条的红色条带即可判读；灵敏度为102copies/μL；特异性好，适用于出口检疫、养殖场的现场检测等，临床上具有极高的应用价值。
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公开(公告)号：CN108018378A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711304449.7
申请日：2017-12-11
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明涉及一种罗湖病毒荧光定量PCR检测试剂盒，包括RT‑PCR反应液、Taq酶、逆转录酶、罗湖病毒荧光定量反应液以及无RNA酶的去离子水；所述的罗湖病毒荧光定量反应液包括两条检测罗湖病毒的引物和一条检测罗湖病毒的探针，所述的检测罗湖病毒的探针在其5'端标记有荧光报告基团，3'端标记有荧光淬灭基团。本发明检测试剂盒(1)具有高度的特异性，其只能扩增出罗湖病毒的核酸，而不与其它病原核酸发生交叉反应的特点；(2)对于罗湖病毒的诊断具有高度的灵敏性；(3)检测结果准确度高，检测速度快。
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公开(公告)号：CN106636166A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201610835519.0
申请日：2016-09-20
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC classification number: C12N15/74 , C07K14/43595 , C12N15/65
Abstract: 本发明公开了一种重组质粒pMDMcherry、其构建方法和红色荧光蛋白基因标记鮰爱德华菌的方法，重组质粒pMDMcherry具有如SEQ ID NO:7所示的碱基序列。将PMDMcherry重组载体导入到鮰爱德华菌中，在荧光显微镜下观察,菌体呈现红色荧光。稳定性试验表明,重组菌传至25代,质粒稳定率可达100％。红色荧光蛋白基因的导入为研究鮰爱德华菌与宿主的相互关系提供了一种简单而直观的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103952369B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410133998.2
申请日：2014-04-03
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一株草鱼鱼鳔上皮样细胞系及其应用。保藏编号为CCTCC No.C201443的草鱼鱼鳔上皮样细胞系，草鱼呼肠孤病毒GCRV在该细胞系中的增殖量显著高于目前常用于分离GCRV的CIK、CO、PSF、FHM、EPC等细胞系，且细胞病变时间快，因此，该细胞系可很好地应用于草鱼呼肠孤病毒的分离、繁殖及草鱼出血病疫苗研究。
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公开(公告)号：CN105646715A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201610033741.9
申请日：2016-01-19
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C07K16/42 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
CPC classification number: C07K16/4208 , G01N33/56994 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了抗锦鲤IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗锦鲤IgM的单克隆抗体是由保藏编号为 CCTCC NO：C2015218 的杂交瘤细胞株A5-E10分泌产生的。利用所述的单克隆抗体可以用于锦鲤或普通鲤鱼某病原或水产疫苗特异性抗体的检测，从而进行疾病的早期诊断和疫苗使用效果的评价，对锦鲤或普通鲤鱼疾病流行病学调查、病原诊断具有较高的临床使用及推广价值，为其他养殖鱼类疾病的防治提供参考。
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公开(公告)号：CN103756973B
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201310738293.9
申请日：2013-12-26
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/18 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗草鱼IgM的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用。所述抗草鱼IgM的单克隆抗体是由保藏编号为CCTCC NO: C2013193 的杂交瘤细胞株S467分泌产生的。利用所述的单克隆抗体构建了一种草鱼呼肠孤病毒间接ELISA检测试剂盒，所述试剂盒中包括抗草鱼IgM的单克隆抗体的酶标记物，包被有抗原的酶标板。本发明所构建的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型ELISA检测试剂盒可以对草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型特异性抗体的进行定性或定量检测，同时可以检测草鱼多份血清样品并达到早期诊断的目的，对草鱼出血病的诊断、流行病学调查和病原监测具有较高的临床使用及推广价值，为降低水产养殖过程中因草鱼出血病所带来的巨大经济损失提供了技术保障。
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公开(公告)号：CN103539842A
公开(公告)日：2014-01-29
申请号：CN201310513653.5
申请日：2013-10-25
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/15 , A61K2039/505 , C07K16/10 , C12N2720/12222 , C12N2720/12234 , G01N33/5091 , G01N33/56983 , G01N2333/14
Abstract: 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型S10基因编码的重组蛋白、由其制备的多克隆抗体及应用。草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型S10基因编码蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO:2所示，编码该蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。本发明获得的重组蛋白具有较好的免疫原性，与GCRV其它结构蛋白相比，其诱导免疫动物产生的特异性抗体效价更高。进一步试验表明，用S10重组蛋白免疫草鱼，可使草鱼诱导产生较高的特异性抗体，并能对草鱼呼肠孤病毒强毒株的攻击起到一定的免疫保护作用。因此，对GCRVⅡ型S10基因编码蛋白的研究和应用，对开发草鱼出血病新型疫苗及免疫学检测试剂盒具有极其重要的意义，为草鱼出血病提供新的有效解决途径。
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公开(公告)号：CN102816868B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210316708.9
申请日：2012-08-30
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测大口黑鲈虹彩病毒的双重PCR方法，通过设计的两对特异性引物和优选的反应体系、反应条件，可同时检测、鉴别蛙病毒属和肿大细胞病毒属两种虹彩病毒，该发明方法敏感性强、特异性高，可以快速、准确地对大口黑鲈虹彩病毒进行诊断和种属鉴定。
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