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公开(公告)号:CN112500458A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202011473614.3
申请日:2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行,本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计,引入了利于其正确构象形成的元件,构建了重组原核表达质粒,制备了重组大肠杆菌基因工程菌,经过表达条件和纯化条件的摸索,高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒,将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗,试验结果显示,该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100%的免疫保护,而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN110261599A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910406683.3
申请日:2019-05-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
Abstract: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-A gp85蛋白以及截短表达的ALV-B gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV-A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的截短表达的ALV-B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时,其敏感性与同类进口试剂盒相当,但特异性优于同类进口试剂盒,与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN110244039A
公开(公告)日:2019-09-17
申请号:CN201910367890.2
申请日:2019-05-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/536
Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-J gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV-J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85蛋白建立了ALV-J抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该方法特异性好,与AB亚群ALV抗体无交叉,且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒,本发明的提出为ALV-J的检测和流行病学调查以及ALV-J的早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN115595327B
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202110721143.1
申请日:2021-06-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种抗ALV‑J的鸡chNHE1基因编辑细胞系及其构建方法。本发明利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选,将ALV‑J细胞受体chNHE1基因的关键氨基酸位点V33进行突变以及W38进行缺失,同时为了便于后期基因编辑结果的鉴定,对其编码的第34‑37位氨基酸密码子进行同义替换。结果表明,含有W38位点缺失及V33位点突变的替换序列可高效定点替换chNHE1基因的相应序列,chNHE1基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑J的感染。本发明通过对chNHE1作为ALV‑J受体的关键氨基酸位点的突变,建立了高效的鸡chNHE1基因编辑细胞系的构建方法,为进一步研究chNHE1基因的功能奠定了基础。
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公开(公告)号:CN118325853A
公开(公告)日:2024-07-12
申请号:CN202410750233.7
申请日:2024-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/85 , A61K39/255 , A61K39/145 , A61P31/22 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达H9N2亚型AIV HA基因的重组I型马立克病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术,将包含SV40启动子、H9N2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入MDV基因缺失疫苗株(rMSΔMeq株)UL41基因内部,并替换rMSΔMeq基因组序列的96927‑97106位核苷酸序列后,获得在UL41基因内部插入SV40‑HA表达框的重组黏粒,由其拯救获得表达H9N2亚型AIV HA基因的重组Ⅰ型MDV株——rMDV‑HA。研究表明,rMDV‑HA具有与亲本病毒株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性,免疫鸡后可对H9N2亚型AIV以及MDV提供良好的保护效果。本发明的提出为制备同时预防H9N2亚型AIV以及MDV感染的药物提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN114592088B
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN110699485B
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN201910760311.0
申请日:2019-08-16
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种快速检测马立克氏病病毒的RPA引物对、探针、试剂盒及检测方法,属于分子生物学检测技术领域。本发明RPA引物对序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;RPA探针序列如SEQ ID No.3所示。本发明检测方法能在39℃条件下20分钟内完成检测,具有快速、灵敏、操作简便、适用于实验室及现场快速检测的特点,为MDV快速诊断及防控提供了技术参考。
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公开(公告)号:CN112500458B
公开(公告)日:2022-12-16
申请号:CN202011473614.3
申请日:2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行,本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计,引入了利于其正确构象形成的元件,构建了重组原核表达质粒,制备了重组大肠杆菌基因工程菌,经过表达条件和纯化条件的摸索,高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒,将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗,试验结果显示,该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100%的免疫保护,而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114592088A
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN114231503A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111349642.9
申请日:2021-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61K39/235 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61P9/00 , A61P7/10 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒、血清4型禽腺病毒二联灭活疫苗及其制备方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上,在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因,获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)疫苗株,命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。将该疫苗株制备成二联灭活疫苗,免疫保护实验证明,接种rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒的攻毒感染,证明rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗具有非常好的免疫原性。本发明的提出为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病提供了有效的技术手段。
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