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公开(公告)号：CN111458501A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010148906.3
申请日：2020-03-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA试剂盒及其制备方法和应用。所述的试剂盒中包含马流产沙门氏菌FljB蛋白包被的酶标板，其中，所述的马流产沙门氏菌FljB蛋白由SEQ ID NO.2所示的序列编码。本发明通过序列分析后，以P3/P4扩增马流产沙门氏菌特异性序列，并将其克隆至原核表达载体pET-28a，构建重组表达质粒pET28a-FljB，转化入Rosetta(DE3)，用IPTG进行诱导表达，以纯化后的FljB蛋白作为包被抗原，建立马流产沙门氏菌抗体的间接ELISA方法，结果显示，以该蛋白作为包被抗原建立的间接ELISA方法，具有良好的特异性、敏感性、重复性，可以用于临床马流产沙门氏菌抗体的检测。
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公开(公告)号：CN111100817A
公开(公告)日：2020-05-05
申请号：CN202010037145.4
申请日：2020-01-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N1/20 , A61K39/112 , A61P31/04 , A61P15/06 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了马流产沙门氏菌马源株及其在制备马流产沙门氏菌灭活疫苗中的应用，属于生物疫苗技术领域。本发明所述的马流产沙门氏菌马源株，命名为20180316.H.AES.G，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.18341。本发明的马流产沙门氏菌马源株20180316.H.AES.G具有免疫原性好、培养特性好等优点，将本发明的马流产沙门氏菌马源株接种于沙门氏菌增菌液，培养后，用0.2％v/v甲醛灭活，制成灭活疫苗。实验证明，使用本发明制备得到的马流产沙门氏菌灭活疫苗免疫小鼠，攻毒后，能使小鼠免于死亡，免疫马体后，安全性良好。因此该疫苗具有安全、低剂量免疫等优点。本发明首次提出了一种马流产沙门氏菌灭活疫苗，可以用于预防由马流产沙门氏菌引起的流产。
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公开(公告)号：CN103073629A
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201310001962.4
申请日：2013-01-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种可抑制逆转录病毒粒子释放的蛋白，其编码序列及在抑制病毒从细胞释放中的应用。本发明研究了该蛋白与马传染性贫血病毒（EIAV）、人免疫缺陷病毒（HIV-1）及猴免疫缺陷病毒（SIV）的相互作用关系，并确定他们相互作用的关键位点。本发明通过分子克隆技术，获得了该蛋白基因和EIAV病毒样颗粒的真核表达载体，经测序分析，克隆的该蛋白基因与该基因的预测序列的同源性为99%，相对应的氨基酸序列同源率为94.0%。该蛋白具有限制人免疫缺陷病毒1型、马传染性贫血病毒、以及猴免疫缺陷病毒病毒粒子从细胞释放的能力，进一步的研究发现，EIAV的env蛋白能够拮抗该蛋白对病毒的限制作用。
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公开(公告)号：CN103060273A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201210535066.1
申请日：2012-12-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Inventor： 王晓钧
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一株分泌人SAMHD1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用，属于生物技术领域。本发明将纯化的人SAMHD1作为免疫原，按照常规杂交瘤细胞融合技术将免疫小鼠脾细胞与SP2/0融合，最终获得一株能够稳定分泌SAMHD1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为3C3，其菌种保藏编号为：CGMCC NO.6709。Western blot和间接免疫荧光结果表明此株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能特异性识别真核表达的人重组蛋白SAMHD1，而与His标签蛋白以及真核表达的马、猴重组蛋白SAMHD1均不发生反应。因此说明本发明的单克隆抗体能够用于人SAMHD1蛋白的检测。
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公开(公告)号：CN117843773B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410059115.1
申请日：2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 珠海泰诺麦博制药股份有限公司
Inventor： 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
Abstract: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成，其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此，该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值，可以在大流行早期进行被动免疫保护，以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时，本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位，为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118443931A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410535423.7
申请日：2024-04-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/559 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种用于检测非洲马瘟的胶体金免疫层析抗体检测试纸条及其应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸，还包括位于下方的PVC底板，其中PVC底板的作用是提供组装平台，硝酸纤维素膜上具有马IgG抗体喷涂的质控线，以及非洲马瘟病毒重组VP7蛋白喷涂的检测线，胶体金垫上涂覆有非洲马瘟病毒重组VP7蛋白标记的胶体金颗粒，样品垫提供了待测样品加入的位置。实验结果显示，该试纸条的诊断敏感性和诊断特异性均为100％，最低检测限度为1：1024。与商品化试剂盒检测结果符合率为100％。本发明的胶体金免疫层析抗体检测试纸条在37℃加速实验中可稳定保存15天。本发明的提出为非洲马瘟的检测提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN117143826A
公开(公告)日：2023-12-01
申请号：CN202311002569.7
申请日：2023-08-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种检测马IL‑1β双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明分别使用由保藏号CGMCC No.45601和CGMCC No.45602的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为捕获抗体和检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与IL‑1α、IL‑1Ra、IFN‑α和SAA均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对IL‑1β的最低检出量为143pg/mL，灵敏度为9.3pg/mL；检测范围为200‑10000pg/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于5％，确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现，本发明建立的双抗体夹心ELISA方法与RD公司的DY3340双抗体夹心ELISA方法的检测结果基本一致，符合率为94％。本发明的提出为检测马IL‑1β提供了一种快速检测方法和监测手段。
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公开(公告)号：CN116338193A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210879227.2
申请日：2022-07-25
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种基于抗体捕获的非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体包被的酶标板，其中所述的特异性抗非洲马瘟病毒VP7蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9分泌产生，所述的杂交瘤细胞株ANSV‑VP7‑3G9的保藏编号为CGMCC No.45157。本发明基于抗体捕获提出了一种非洲马瘟间接ELISA抗体检测试剂盒，本发明的酶标板上首先包被一种可以识别抗原的单克隆抗体，利用单克隆抗体特异性地捕获抗原，再加入血清及酶标二抗。通过单克隆抗体捕获抗原，减少非目标抗原(如大肠杆菌)与ELISA酶标板的吸附作用，从而提高方法的特异性。该方法相比普通间接ELISA的2次级联放大作用变为三次级联放大，即保留了间接ELISA方法的敏感性，又提高了特异性。
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公开(公告)号：CN115128268A
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN202210404918.7
申请日：2022-04-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白OmpA包被的酶标板，所述的截短表达的沙门氏菌外膜重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明利用Pull down技术成功筛选到了马流产沙门氏菌病4种病原的共同优势抗原，并将其克隆到表达载体通过截短分段表达实现了对该OmpA蛋白的可溶性表达，同时建立了马流产沙门氏菌病4种致病病原菌通用型间接ELISA抗体检测试剂盒以及相应的iELISA抗体诊断方法，实验证明，使用该试剂盒建立的方法具有特异性强、敏感性高的优点，将成为马流产沙门菌病抗体检测的一种有效工具，也为未来疫苗研发的抗体监测奠定了方法学基础。
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公开(公告)号：CN112501273B
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202011488629.7
申请日：2020-12-16
Applicant: 暨南大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6848 , C12N15/11 , C12N15/85 , C07K16/10
Abstract: 本发明涉及基因工程及抗体制备领域，具体而言，涉及一种用于扩增马抗体的巢式PCR引物、试剂盒及其应用。该巢式PCR引物可匹配的抗体重链及轻链基因的阳性率为56％左右，进而能够从单个B淋巴细胞分离抗体基因的方法，并制备高通量马源抗体。该方法保留了轻链重链可变区的天然配对，具有基因多样性好、效价高、抗体亲和力好、特异性强、实验周期短等优势，为研制传染性疾病及自身免疫性疾病的单克隆抗体的预防与治疗性药物或诊断性抗体提供了一条广阔的途径，同时也为生命科学基础研究获得外源性蛋白的抗体提供了一个更加高效、简单、快速的方法。
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