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公开(公告)号:CN1687767A
公开(公告)日:2005-10-26
申请号:CN200510040059.4
申请日:2005-05-11
IPC: G01N27/447 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种家蚕成品卵中微粒子病病卵的检测方法,其特征在于:首先提取待检家蚕成品卵内的总DNA;根据家蚕微孢子虫基因的特异性序列,设计并合成一对特异性引物,二引物之间的间隔为0.5-2.0kb,以提取的待检家蚕成品卵内的总DNA为模板,进行PCR扩增,对扩增产物进行电泳检测,当检出家蚕微孢子虫的特异性基因片段时,判定该被检家蚕成品卵为微粒子病病卵。对家蚕成品卵进行集团检测,可以确定微粒子病的病卵率。本发明可以对家蚕成品卵直接进行检测,蚕卵无需催青至孵化,检测周期短,检测灵敏度高,能够满足用种单位的需求。
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公开(公告)号:CN114317572A
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202111657441.5
申请日:2021-12-31
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明涉及一种抗传染性脾肾坏死病毒的circRNA疫苗及其构建方法与应用。合成5’端依次为体外T7(或S6)转录启动子、脑心肌炎病毒的内部核糖体进入位点IRES、N6‑甲基腺嘌呤m6A位点、传染性脾肾坏死病毒ISKNV主要衣壳蛋白MCP开放读码框的融合序列P‑IRES‑m6A‑MCP,以P‑IRES‑m6A‑MCP为模板,用T7(或S6)转录酶体外转录RNA,用DNaseI去除DNA模板后,用T4 RNA连接酶连接环化,用RNase R酶去除线性RNA后获环状RNA,即circRNA‑MCP。该circRNA‑MCP免疫注射后可减少传染性脾肾坏死病的发生。
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公开(公告)号:CN108743933A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810534460.0
申请日:2018-05-29
Applicant: 苏州大学
CPC classification number: A61K39/12 , A61K47/42 , A61K2039/70 , A61P7/04 , A61P31/14 , A61P31/22 , C12N15/815 , C12N2710/16034 , C12N2720/12034
Abstract: 本发明涉及一种基于酵母表达载体的蛋白微晶包埋鲤疱疹病毒II型‑草鱼出血病毒亚单位疫苗的构建方法,用AOX1启动子控制家蚕质型多角体病毒蛋白基因;用TEF1启动子控制来自于草鱼出血病毒的VP6、VP7和鲤疱疹病毒II型ORF72、ORF66、ORF81、ORF82以及质型多角体病毒VP3的经密码子优化后抗原表位融合序列VP6‑VP7‑ORF72‑ORF66‑ORF81‑ORF82‑VP3,构建酵母表达载体pPICZA‑BmCPVpolh‑GCRV6/7‑CyHV72/66/81/82‑BmCPVVP3。该载体转化酵母菌,用甲醇诱导表达,表达的多抗原表位融合蛋白在家蚕质型多角体病毒VP3引导下包埋进重组家蚕质型多角体蛋白内,形成包埋鲤疱疹病毒II型‑草鱼出血病毒亚单位疫苗的蛋白微晶,该蛋白微晶经碳酸钠-碳酸氢钠溶液裂解,然后用盐酸溶液调pH至7.12,离心后的上清即为鲤疱疹病毒II型‑草鱼出血病毒联合亚单位疫苗抗原。
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公开(公告)号:CN103310684A
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201310272562.7
申请日:2013-07-01
Applicant: 苏州大学
IPC: G09B23/00
Abstract: 本发明公开了一种拆装式固定化酶或固定化细胞模型教具,其包括圆盘形的盆体、活动设置在所述盆体上方的盖体、第一连接体、第二连接体、第三连接体、第四连接体,所述盖体顶面为镂空网,所述第一连接体为球体,所述第二连接体为底部设置有连接杆的球体,所述第三连接体为底部设置有倒T形的连接体的球体,所述第四连接体为结点圆球底部设置有连接杆的环形珠串。本发明结构简单,能生动形象的演示酶或细胞的多种固定化方式。
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公开(公告)号:CN102250935A
公开(公告)日:2011-11-23
申请号:CN201110142537.8
申请日:2011-05-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种载有人胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的重组转基因载体,所述重组转基因载体包括:外源基因人胰岛素样生长因子-Ⅰ、启动子、增强子元件;构建所述重组转基因载体的转座子为piggyBAC转座子;所述启动子为丝素重链蛋白启动子;所述重组转基因载体还包括:丝素重链蛋白启动子下游信号肽相应的DNA序列、家蚕丝素轻链fib-LpolyA信号位点的序列。应用该重组转基因载体制备得到生产IGF-Ⅰ的转基因家蚕,可以提高IGF-Ⅰ的表达水平,并且避免外源基因和杆状病毒的不安全性。
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公开(公告)号:CN101418302B
公开(公告)日:2011-11-09
申请号:CN200810243141.0
申请日:2008-12-09
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/34 , C12N15/866 , A01K67/04
Abstract: 本发明公开了一种构建发育可控的家蚕的方法以及发育控制方法,以转座子piggy BAC因子为基础载体,通过基因工程操作构建带有家蚕热激蛋白基因启动子控制egt基因表达盒的重组转基因载体,与辅助质粒作混合,导入初产卵,孵化后的蚁蚕通过常规筛选获得带有荧光蛋白报告基因的家蚕,检测到egt基因,育种制成转基因家蚕;育种制成的转基因家蚕经热诱导(41~43℃,0.5~2小时)可控制蚕的发育;本发明方法实现了利用家蚕杆状病毒egt基因控制蚕的发育,增加了家蚕饲育、蚕茧收购和缫丝工艺的灵活性,具有重要的实施价值。
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公开(公告)号:CN101418352A
公开(公告)日:2009-04-29
申请号:CN200810243140.6
申请日:2008-12-09
Applicant: 苏州大学
Abstract: 一种虾白斑综合症病毒病检测试剂盒及检测方法,该试剂盒由一套引物、DNA提取缓冲液、DNA聚合酶、环介导等温扩增反应液、阳性对照、阴性对照、甜菜碱和dNTP组成;采用本发明可以检测出待检测虾是否感染虾白斑综合症病毒;本发明利用Bst DNA酶的链置换特性,设计4条引物,识别靶序列的6个区域,在等温条件下生成大量的茎环样结构,在定性检测时不需任何特殊设备。因此具有特异性、灵敏度高和检测时间比普通PCR短的特点。
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公开(公告)号:CN101418302A
公开(公告)日:2009-04-29
申请号:CN200810243141.0
申请日:2008-12-09
Applicant: 苏州大学
IPC: C12N15/34 , C12N15/866 , A01K67/04
Abstract: 本发明公开了一种构建发育可控的家蚕的方法以及发育控制方法,以转座子piggyBAC因子为基础载体,通过基因工程操作构建带有家蚕热激蛋白基因启动子控制egt基因表达盒的重组转基因载体,与辅助质粒作混合,导入初产卵,孵化后的蚁蚕通过常规筛选获得带有荧光蛋白报告基因的家蚕,检测到egt基因,育种制成转基因家蚕;育种制成的转基因家蚕经热诱导(41~43℃,0.5~2小时)可控制蚕的发育;本发明方法实现了利用家蚕杆状病毒egt基因控制蚕的发育,增加了家蚕饲育、蚕茧收购和缫丝工艺的灵活性,具有重要的实施价值。
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公开(公告)号:CN101270367A
公开(公告)日:2008-09-24
申请号:CN200810025300.X
申请日:2008-04-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了一种构建家蚕丝腺生物工厂的方法,以转座子piggyBAC因子为基础载体,通过基因工程操作构建带有家蚕丝蛋白特异性启动子控制外源基因表达盒、增强子活性的元件、抗生素抗性基因和荧光蛋白报告基因的重组转基因载体,与辅助质粒作混合,导入初产卵,孵化后的蚁蚕连续添食特定抗生素至4龄眠,获得抗特定抗生素、带有荧光蛋白报告基因的家蚕,检测到目的基因,育种制成转基因家蚕。利用该转基因家蚕的丝腺组织可获得药用蛋白药物。本发明方法实现转基因家蚕丝腺工厂制备药用蛋白药物,生产成本低,不涉及具有潜在危害的杆状病毒,安全性高,具有重要的实施价值。
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公开(公告)号:CN101270365A
公开(公告)日:2008-09-24
申请号:CN200810024110.6
申请日:2008-04-30
Applicant: 苏州大学
Abstract: 本发明公开了提高对血液型脓病抗性的转基因家蚕制作方法,通过基因工程操作构建同时携带家蚕核型多角体病毒的ie-1基因的dsRNA表达盒和lef-1基因的dsRNA表达盒的、具有新霉素抗性基因Neo和荧光蛋白报告基因的、以piggyBAC转座子为基础的转基因载体,在辅助质粒作用下导入初产卵,获得的转基因家蚕对血液型脓病的抗性有显著提高。本发明通过转基因与RNAi技术的结合,实现了定向提高家蚕对血液型脓病的抗性,同时优化了转基因家蚕的筛选过程。
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