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公开(公告)号：CN107014793B
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201710266879.8
申请日：2017-04-21
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开一种基于双振镜双物镜多模式宽场超分辨显微成像系统，包括沿光路依次布置的激光器和分束镜，由分束镜分束为透射光路和反射光路，还包括：沿透射光路依次布置的第一扫描振镜系统和第一显微物镜，由第一显微物镜将光束入射至样品的下表面并激发荧光；沿反射光路依次布置的第二扫描振镜系统和第二显微物镜，由第二显微物镜将光束入射至样品的上表面并激发荧光；用于收集两路荧光信号的成像光路模块；和计算机，用于控制第一扫描振镜系统和第二扫描振镜系统对样品进行扫描，并根据收集的两路荧光信号进行数据处理和图像重构。本发明在一套系统中集成驻波干涉、结构光照明和多角度环状全内反射等多种宽场超分辨显微成像模式。
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公开(公告)号：CN108061965A
公开(公告)日：2018-05-22
申请号：CN201711237058.8
申请日：2017-11-30
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于变角度全内反射结构光照明的三维超分辨显微成像方法和装置，将照明光束分束为偏振方向一致且发生全反射的两路入射光，产生的倏逝波进行干涉形成全内反射结构光照明样品，收集样品发出的荧光信号得到全内反射结构光照明原始图像，重构出横向超分辨图像；利用单路入射光，在成像样品表面发生全内反射，并逐一改变入射光的入射角和方位角对样品进行扫描，收集样品发出的荧光信号得到变入射角变方位角全内反射结构光照明原始图像；对变入射角变方位角全内反射结构光照明原始图像进行预处理，重构出样品的轴向超分辨图像，并结合横向超分辨图像重构出三维超分辨图像。
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公开(公告)号：CN107941763A
公开(公告)日：2018-04-20
申请号：CN201711025463.3
申请日：2017-10-27
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6458
Abstract: 本发明公开一种共轴三维受激辐射损耗超分辨显微成像方法，包括步骤：1)激发光和损耗光合束后，调制为线偏振光并调整线偏振方向；2)利用空间光调制器加载的0-2π涡旋位相板和0-π位相板同时对激发光和损耗光进行两次调制；损耗光一部分光调制成为横向的空心光斑，另一部分调制成为轴向的空心光斑；3)将激发光偏振调成圆偏光且旋向和涡旋位相板的旋向相反，损耗光偏振态转化为圆偏光且旋向与涡旋位相板的旋向相同；4)利用激发光和损耗光聚焦至样品上，激发光为实心光斑，损耗光为空心光斑，并分别激发和损耗样品发出的信号光；5)收集信号光，得到对应到样品扫描点的显微图像。本发明还公开一种共轴三维受激辐射损耗超分辨显微成像装置。
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公开(公告)号：CN107356566A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710202764.2
申请日：2017-03-30
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: G01N21/6458 , G01N21/01 , G01N21/6486 , G01N2021/6495 , G01N2201/06113 , G01N2201/068 , G01N2201/0683 , G01N2201/1281
Abstract: 本发明公开一种对完整细胞的宽场三维超高分辨定位和成像方法，包括：调制入射光的偏振状态，变成P偏振光或S偏振光；调制后的光束在变为切向偏振光或者径向偏振光后对样品进行照明；利用入射角大于全内反射临界角的光产生的倏逝波照明细胞的下表面；利用入射角度小于全内反射临界角透射光和其被细胞上表面反射一次后的反射光干涉产生的图案照明细胞的上表面；根据采集的样品发出的荧光信息，重构完整细胞的三维超分辨图像。本发明还公开一种对完整细胞的宽场三维超高分辨定位和成像装置。本发明具有成像速度快、装置简单、操作方便等特点，可以很好地应用于荧光样品的检测之中。
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公开(公告)号：CN106980174A
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201710114306.3
申请日：2017-02-28
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: G02B21/0068 , G01N21/6458 , G02B21/0032 , G02B21/0056 , G02B21/0076
Abstract: 本发明公开一种综合性荧光超分辨显微成像装置，首先通过三个偏振分束镜将光束分成对称的四束光路，然后通过4f‑振镜系统进行光束传播角度以及位置的调制后，通过两块分束镜合束，再通过4f系统以汇聚形式传输至显微物镜的后焦面，最后由显微物镜将其以四束平行光方式入射在样品上，并发生干涉；通过四束光路中的shutter、涡旋相位板以及扫描振镜的位置调节，可形成网格状、水平条纹状以及纵向条纹状干涉结构光照明模式，且结构光周期、相位及方向均可任意快速调整。本发明可实现包括结构光照明显微成像、三维结构光照明显微成像、环形全内角反射荧光显微成像和傅里叶移频迭代显微成像等功能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109870441B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910238571.1
申请日：2019-03-27
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开一种基于移频的三维超分辨光切片荧光显微成像方法和装置，将准直的激光改变为横截面为椭圆形的平行光，椭圆形光斑入射到空间光调制器上后取空间光调制器的正负一级衍射光，两路光分别通过透镜后会聚到光阑，每束光在通过光阑之后被分割为若干的长条形光斑，两路光分别从物镜出射后在探测物镜的焦平面处进行干涉激发样品得到荧光，收集荧光信号得到结构光照明下的一幅二维图像；利用振镜改变结构光的方向，利用空间光调制器改变两路结构光之间的相位差，在二维平面上得到多张结构光照明下的图像；之后用另外一个方向的振镜进行扫描，结合探测物镜压电的移动对三维物镜进行成像，得到超分辨率的三维光片照明图像。
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公开(公告)号：CN110261320B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201910578129.3
申请日：2019-06-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开一种荧光交错差分显微成像的方法，包括步骤：1)将激光光束准直并转换为线偏光，所述线偏振光在相位调制后投射在待测样品进行扫描成像；相位调制图案为全零相位图；2)收集所述待测样品在二维扫描过程中激发的荧光信号Is(x，y)，其中x,y为待测样品上扫描点的二维坐标；3)将步骤1)中的相位调制图案切换为涡旋相位图，4)收集所述待测样品在二维扫描过程中激发的荧光信号Ih(x，y)；5)重复步骤1)至步骤4)，获得2n个待测样品激发的荧光信号，相邻两次扫描获得的荧光信号光强交错差分计算得到一个时间序列的荧光交错差分信号光强I(x，y)，计算公式为I(x，y)＝Is(x，y)–βIh(x，y)，β为经验参数。本发明还公开一种荧光交错差分显微成像的装置。
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公开(公告)号：CN108120702B
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN201711241950.3
申请日：2017-11-30
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开一种基于并行探测的超分辨荧光寿命成像装置，包括光源，光源发出的激发光由显微物镜聚焦到样品上并收集样品发出的信号光，其中，接收信号光的探测系统包括：光纤束，内的多根光纤束同时接收到所述的信号光；探测器阵列，具有分别连接每根光纤的多个探测器，得到对应的光强信号；时间相关单光子计数器阵列，具有分别连接每个探测器并与光源脉冲同步的时间相关单光子计数器，用于计算荧光寿命并实现超分辨荧光寿命成像。本发明还公开一种基于并行探测的超分辨荧光寿命成像方法。本发明利用并行APD和并行TCSPC，不仅实现了成像分辨率的提升，还显著提高了寿命成像速度。
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公开(公告)号：CN110261320A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910578129.3
申请日：2019-06-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开一种荧光交错差分显微成像的方法，包括步骤：1)将激光光束准直并转换为线偏光，所述线偏振光在相位调制后投射在待测样品进行扫描成像；相位调制图案为全零相位图；2)收集所述待测样品在二维扫描过程中激发的荧光信号Is(x，y)，其中x,y为待测样品上扫描点的二维坐标；3)将步骤1)中的相位调制图案切换为涡旋相位图，4)收集所述待测样品在二维扫描过程中激发的荧光信号Ih(x，y)；5)重复步骤1)至步骤4)，获得2n个待测样品激发的荧光信号，相邻两次扫描获得的荧光信号光强交错差分计算得到一个时间序列的荧光交错差分信号光强I(x，y)，计算公式为I(x，y)＝Is(x，y)–βIh(x，y)，β为经验参数。本发明还公开一种荧光交错差分显微成像的装置。
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公开(公告)号：CN110146473A
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201910305072.X
申请日：2019-04-16
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种轴向超分辨的双光子荧光显微装置及方法，属于激光点扫描显微领域，实现了对样品的双光子轴向超分辨成像。通过飞秒激光器发出超短脉冲激光，以实现荧光样品的双光子激发；通过空间光调制器对激发光进行相位调制，依次用轴向实心光斑和轴向空心光斑扫描样品，对得到的两幅扫描双光子图像进行权重差分最终得到轴向超分辨图像。相对于其他双光子轴向超分辨成像显微镜，该装置其结构简单，成像深度大，为生命科学和纳米技术提供了良好的研究手段。
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