公开(公告)号：CN104388412A

公开(公告)日：2015-03-04

申请号：CN201410757519.4

申请日：2014-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 邬敏辰 ,  何瑶 ,  殷欣 ,  李剑芳 ,  姚瑶 ,  吴芹

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12R1/69

CPC classification number: C12N9/2482 ,  C12Y302/01008

Abstract: 本发明公开了一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法。基于高性能计算机及其相关生物学软件对Aspergillus oryzae常温木聚糖酶AoXyn11A耐热性改造的理性设计，将AoXyn11A N端41个氨基酸替换成同一家族耐热木聚糖酶TfGH11 N端42个氨基酸，获得了一种耐热杂合木聚糖酶ATX11A，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。该杂合酶基因ATx11A是采用大引物PCR技术由AoXyn11A和TfGH11基因的相应片段拼接而成的，其核苷酸序列为SEQ ID NO:2。将重组毕赤酵母GS115/ATx11A在30℃诱导72 h，期间每隔24 h添加1.0％(v/v)甲醇。表达的耐热杂合酶ATX11A的最适温度由AoXyn11A的50℃提高至65℃；在60℃处理1 h，ATX11A的半衰期由AoXyn11A的1.3 min延长至55 min。

公开(公告)号：CN102559526A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201110410598.8

申请日：2011-12-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 李剑芳 ,  魏喜换 ,  赵顺阁 ,  邬敏辰 ,  殷欣

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N9/42 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供了一种新型的共表达源自黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1的β-甘露聚糖酶基因和源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的β-1，4-木聚糖酶基因的工程菌GS115/man5A-xyn II的构建方法。所构建成的毕赤酵母共表达系统可用于的β-甘露聚糖酶和β-1，4-木聚糖酶的工业化生产。所制备的两种酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。