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公开(公告)号:CN102174068A
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN201110032128.2
申请日:2011-01-29
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种大规模纯化含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法与应用。该方法包括如下步骤:对表达含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的工程菌发酵液进行预处理,得到含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白粗提物,通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐,得到融合蛋白粗提物的初次纯化蛋白,接着甲酸水解,再通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐,得到初级纯化的目的多肽,HPLC精制后可得纯度高于95%的目的多肽。本发明所述的方法有效地对含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白进行大规模的制备,最终目的多肽的得率高、纯度高、耗时短、成本低,可达到g级别以上生产规模,可以满足动物实验以及临床前的实验研究。