植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法

    公开(公告)号:CN113109562A

    公开(公告)日:2021-07-13

    申请号:CN202110384341.3

    申请日:2021-04-09

    Abstract: 本发明公开一种植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法,涉及植物分子检测技术领域,本发明包括以下步骤:(1)多克隆抗体的制备;(2)植物组织提取液的制备;(3)将步骤(2)中的植物组织提取液加入微孔板中包被12‑48h,然后倒出包被液并用PBST溶液清洗微孔板,加入PBS‑milk溶液进行封闭;(4)封闭后将微孔板洗净,加入一抗工作液孵育后洗净,加入二抗工作液进行孵育,加入底物溶液,终止反应,测定吸光度值,将吸光度值代入标准曲线获得EPSPS蛋白含量。本发明的优点为:对新型抗除草剂蛋白EPSPS进行定量检测,所用耗材简单易得,所用试剂无需复杂配制过程,成本低廉易于实施,具有普适性。

    一种用于检测水稻野败型三系的引物组合及其应用

    公开(公告)号:CN119876460A

    公开(公告)日:2025-04-25

    申请号:CN202510107462.1

    申请日:2025-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测水稻野败型三系(不育系、恢复系、保持系)和杂交种纯度的引物组合及其应用,所述引物组包括用于鉴定野败不育基因WA352、主效恢复基因Rf4基因和内参基因Actin的特异性引物混合物,调整六条引物组合比例之后,单孔扩增即可区分野败型三系的不育系、恢复系、保持系和杂交种四种水稻材料。本发明的特异性引物组合扩增效率高,检测结果稳定,可通过琼脂糖直接判读基因型,检测方法操作简便,成本极低,绿色环保,填补了三系杂交种纯度检测中缺乏功能基因标记的空白。

    植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法

    公开(公告)号:CN113109562B

    公开(公告)日:2022-03-11

    申请号:CN202110384341.3

    申请日:2021-04-09

    Abstract: 本发明公开一种植物中外源EPSPS蛋白的ELISA定量检测方法,涉及植物分子检测技术领域,本发明包括以下步骤:(1)多克隆抗体的制备;(2)植物组织提取液的制备;(3)将步骤(2)中的植物组织提取液加入微孔板中包被12‑48h,然后倒出包被液并用PBST溶液清洗微孔板,加入PBS‑milk溶液进行封闭;(4)封闭后将微孔板洗净,加入一抗工作液孵育后洗净,加入二抗工作液进行孵育,加入底物溶液,终止反应,测定吸光度值,将吸光度值代入标准曲线获得EPSPS蛋白含量。本发明的优点为:对新型抗除草剂蛋白EPSPS进行定量检测,所用耗材简单易得,所用试剂无需复杂配制过程,成本低廉易于实施,具有普适性。

    一种多期多样本法检测光温敏核不育水稻不育性的方法

    公开(公告)号:CN105009901B

    公开(公告)日:2017-08-25

    申请号:CN201510436515.0

    申请日:2015-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种多期多样本法检测光温敏核不育水稻不育性的方法。将待检测不育水稻种子每隔7‑15天,分多期播种;等待处理不育水稻首期播种的部分植株生育进程进入花粉母细胞减数分裂期即俗称叶枕平时期时,将连续3‑4个播期不育水稻植株在一定处理环境下培育规定的天数取出;记载不育水稻植株从处理环境中取出时间,记载样本单穗抽穗日期,取样,套袋,镜检,成熟时考察其自交结实率;根据样本单穗处理结束后距离抽穗的天数、花粉镜检结果、套装自交结实结果,结合穗发育每一阶段距离抽穗的天数指标,确定光温敏核不育水稻不育性的两个重要指标即不育起点温度和育性转换敏感期。本方法易于操作,检测结果更加准确和完善。

    一种采用桥梁亲本选育水稻温敏永久核不育系的方法

    公开(公告)号:CN103814814A

    公开(公告)日:2014-05-28

    申请号:CN201410065569.6

    申请日:2014-02-22

    Abstract: 本发明公开了一种采用桥梁亲本选育水稻温敏永久核不育系的方法,利用杂交技术,将分别在高低温条件下表达不育的隐性核不育基因分别导入合适桥梁亲本,通过杂交回交和性状筛选,育成一对具有桥梁亲本遗传背景分别携带高低温核不育基性状的近等基因系,通过该对近等基因系异交繁殖生产水稻永久核不育系,规避了两系杂交水稻种子生产过程中因两类核温敏不育系的受环境影响而带来的生产风险,创建了一个可以随机选择制种基地和制种季节的两系杂交水稻制种体系,开辟了水稻利用杂种优势的新途径。

    一种分期播种确定温敏核不育系冷水处理时期的方法

    公开(公告)号:CN103120121A

    公开(公告)日:2013-05-29

    申请号:CN201310057200.6

    申请日:2013-02-22

    Abstract: 本发明公开了一种分期播种确定温敏核不育系冷水处理时期的方法,将待冷水处理的不育系的种子分为A与B两份,A份在4月20日至5月10日的某1天播种作为前期不育系,B份在A份播种后9-11天播种作为后期不育系;A份与B份的播种移栽均在田间正常管理进行,在6月底至7月初密切观察A份植株形态变化,待A份处于叶枕平时期,立即将对应B份装桶放置于冷水池内处理6-8天后取出;选取倒1和倒2叶枕距为±1cm的穗子,剩下的穗子用剪刀剔除,即得温敏核不育系。本发明简易、高效、成本低廉,环境可控性强,操作方便。

    一种水稻显性矮秆籼型温敏核不育系选育方法

    公开(公告)号:CN102144532A

    公开(公告)日:2011-08-10

    申请号:CN201010588526.8

    申请日:2010-12-15

    Abstract: 本发明公开了一种水稻显性矮秆籼型温敏核不育系选育方法。包括以下步骤:材料选用——正反交——采取各种手段筛选——测定,得到水稻显性矮秆籼型温敏核不育系。本发明利用水稻基因变异,即显性矮秆突变株,杂交导入到优良的温(光)敏核不育系中,育成显性矮秆籼型温敏核不育系,为培育矮秆或半矮秆两系杂交水稻品种奠定了基础,可显著增强水稻抗倒性,为选育亚种间杂交品种增加了可能,为进一步提高水稻产量、转换耕作模式提供了物质条件。率先将显性矮秆基因与温敏核不育基因集于一体,从而创建了一个可以随机配组选育矮秆杂交水稻品种的系统,解决生产上常常发生的倒伏问题。同时,适应制种、大田生产中的轻简栽培模式,降低劳动强度,减少生产成本。

    常异花授粉作物品种分子鉴定和指纹图谱构建的杂株剔除方法

    公开(公告)号:CN113234847A

    公开(公告)日:2021-08-10

    申请号:CN202110511756.2

    申请日:2021-05-11

    Abstract: 本发明公开了常异花授粉作物品种分子鉴定和指纹图谱构建的杂株剔除方法。所述方法包括,(1)随机选取常异花授粉作物品种样品,单株提取DNA;(2)设计多对SSR引物;(3)利用SSR引物逐一对样品各单株进行扩增分析;(4)逐一记录每对SSR引物对样品各单株的扩增结果并进行聚类分析绘成树状图,通过对树状图进行分析剔除与多数个体遗传差异较大的混杂株,用剩余的单株代表该品种用于品种的分子鉴定或指纹图谱构建。本发明通过SSR分子标记对样品各单株进行扩增并结合软件分析剔除混杂株,有效的避免常异花授粉作物品种分子鉴定中由于杂株干扰而造成的错判、误判现象,为准确的构建品种指纹图谱工作提供了依据。

    一种选育半显性矮秆水稻光温敏核不育系的方法

    公开(公告)号:CN106818456A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710014930.6

    申请日:2017-01-09

    Inventor: 吴爽

    CPC classification number: A01H1/02 A01H1/04

    Abstract: 一种选育半显性矮秆水稻光温敏核不育系的方法,涉及水稻遗传育种领域;为了选育半显性矮秆水稻光温敏核不育系单株,本发明利用第8染色体上新发现的控制株高的QTL,通过杂交导入水稻光温敏核不育系中,通过连锁的分子标记早期选择含有半显性QTL单株;运用光温智慧控制系统结合花粉镜检和不育性观察,筛选不育起点温度在23.5℃左右的半矮秆单株;最后将半矮秆单株多代自交,使性状趋于稳定,选育出育性起点温度在23.5℃左右的半显性矮秆两系不育系,且选育更加精确、效率更高。

    一种采用桥梁亲本选育水稻温敏永久核不育系的方法

    公开(公告)号:CN103814814B

    公开(公告)日:2016-05-18

    申请号:CN201410065569.6

    申请日:2014-02-22

    Abstract: 本发明公开了一种采用桥梁亲本选育水稻温敏永久核不育系的方法,利用杂交技术,将分别在高低温条件下表达不育的隐性核不育基因分别导入合适桥梁亲本,通过杂交回交和性状筛选,育成一对具有桥梁亲本遗传背景分别携带高低温核不育基性状的近等基因系,通过该对近等基因系异交繁殖生产水稻永久核不育系,规避了两系杂交水稻种子生产过程中因两类核温敏不育系的受环境影响而带来的生产风险,创建了一个可以随机选择制种基地和制种季节的两系杂交水稻制种体系,开辟了水稻利用杂种优势的新途径。

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