以转酮醇酶基因为靶标检测绵羊肺炎支原体的组合物、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN110564877A

    公开(公告)日:2019-12-13

    申请号:CN201910871216.8

    申请日:2019-09-16

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开以转酮醇酶基因为靶标检测绵羊肺炎支原体的组合物、试剂盒和方法。本发明的组合物的检测靶标为绵羊肺炎支原体的转酮醇酶基因,可以针对该基因中的多种不同片段,并且通过实验验证了本发明的组合物可设计出多种不同具体组合情形以应用于传统PCR、basic RPA、nfo RPA和exo RPA等多种扩增方法,另外可借助琼脂糖凝胶电泳、侧流层析试纸条以及恒温荧光扩增仪来观察实验结果。本发明对检测过程中最佳反应时间与最佳反应温度、检测的特异性、敏感性、重复性和稳定性均进行了探索,找到了最佳反应条件,建立了特异性好、敏感性高且可以稳定重复的绵羊肺炎支原体快速检测方法,具有操作简单,便捷省时,无需大型的实验仪器设备。

    以LppA基因为检测靶标进行牛支原体检测的组合物、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN110499376A

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201910847999.6

    申请日:2019-09-09

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开以LppA基因为检测靶标进行牛支原体检测的组合物、试剂盒和方法。本发明的组合物的检测靶标为牛支原体的LppA基因,可以针对该基因中的多种不同片段,并且通过实验验证了本发明的组合物可设计出多种不同具体组合情形以应用于传统PCR、basic RPA、nfo RPA和exo-RPA等多种扩增方法,另外可借助琼脂糖凝胶电泳、测流层析试纸条以及恒温荧光扩增仪来观察实验结果。本发明的组合组能够做到牛支原体标准株及野生株种内的保守性以及牛支原体与其他致病菌种间的特异性。基于本发明的组合物可建立特异性好、敏感性高且可以稳定重复的牛支原体快速检测方法,具有操作简单,便捷省时,无需大型的实验仪器设备。

    C型产气荚膜梭菌β1、β2毒素融合基因

    公开(公告)号:CN1554772A

    公开(公告)日:2004-12-15

    申请号:CN200310123697.3

    申请日:2003-12-19

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明是一种C型产气荚膜梭菌β1β2毒素融合基因,其制备是利用PCR技术,从含β2毒素基因的质粒CPB2-9中扩增出β2毒素基因,用NcoI和BamHI双酶切该β2毒素基因,回收0.73kb的β2基因片段,再用NcoI和BamHI双酶切含产气荚膜梭菌β1毒素基因的质粒pXETB1,将β1毒素基因片段回收后与上述回收的β2毒素基因片段连接,转化到保藏名称为BL21(DE3)受体菌中(保藏号:CGMCC No.1066)。

    一种消除细菌生物被膜的复合生物材料

    公开(公告)号:CN105770999B

    公开(公告)日:2019-01-29

    申请号:CN201610118294.7

    申请日:2016-03-03

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开一种消除细菌生物被膜的复合生物材料,其是将乙二胺四乙酸、乳酸、十二烷基硫酸钠、壬酸、月桂酸单甘油酯复配成为能够有效清除生物被膜的生物被膜清除基质,再与苦豆子碱组成复合生物材料,应用于消除细菌生物被膜。本发明所述的能够有效清除生物被膜的新型生物被膜清除基质与苦豆子碱组成消除细菌生物被膜的复合生物材料,不仅应用于消除细菌生物被膜,具有安全、无抗、绿色环保的特点,并且联合使用可以增强苦豆子碱对革兰氏阳性菌生物被膜的抑制能力,可弥补抗生素治疗的缺点,是一种有效、无抗的新型生物被膜清除生物材料。

    一种结核分枝杆菌ERP12基序突变为PGLTS的重组质粒PEGFP-12

    公开(公告)号:CN104862334A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510309809.7

    申请日:2015-06-03

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明公开了一种结核分枝杆菌ERP 12基序突变为PGLTS的重组质粒PEGFP-12,根据结核分枝杆菌野生型ERP的序列,合成出12基序完全突变为PGLTS的ERP完整序列,并进行人源化优化,构建到PEGFP-N1真核生物表达载体上,并命名为PEGFP-12。突变后的序列如SEQ:ID:NO:1所示。本发明构建了结核分枝杆菌ERP的12基序突变为PGLTS的基因重组质粒,将质粒用脂质体转染法转到A549细胞中,然后做蛋白芯片检测,并与野生型ERP序列相比较,发现基序完全突变为12个PGLTS之后引起细胞炎性相关因子表达明显上调,说明突变后能够引起更明显的炎性反应,为研究PGLTS基序突变与功能关系提供有力数据。

    牛分枝杆菌LIP突变体蛋白及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102533691A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN200910117486.6

    申请日:2009-09-30

    Applicant: 宁夏大学

    Abstract: 本发明是一种牛分枝杆菌LIP突变体蛋白及其制备方法和应用,牛分枝杆菌LIP突变体蛋白中心区的2个半胱氨酸(Cys)分别突变成甘氨酸(Gly)和丝氨酸(Ser)。制备牛分枝杆菌LIP突变体蛋白的方法,工艺过程包括:1)构建含pET 30a/LIP的基因工程菌;2)利用改进的培养基扩大培养后,用IPTG诱导表达;3)裂解菌体,溶解包涵体,纯化LIP突变体蛋白。本发明应用基因工程技术,首次在体外表达并获得了具有活性的牛分枝杆菌LIP突变体蛋白,并且建立了纯化、复性的方法;利用本发明的方法,LIP蛋白的表达量可达20mg/L培养基。

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