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公开(公告)号：CN105316381B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201510796026.6
申请日：2015-11-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种纳米金修饰的石墨烯用于蛋白质N末端分离的方法。本发明方法步骤为，首先合成纳米金修饰的石墨烯（G@PDA@Au），再对氨基封闭后的蛋白进行酶解，对酶解液进行巯基衍生后，利用G@PDA@Au对衍生上巯基的非N末端肽段进行去除，最后利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行蛋白质N末端的检测。本发明方法可以方便高效地去除非N末端肽段，提高蛋白质N末端肽段鉴定效果。
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公开(公告)号：CN105504301B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201510882965.2
申请日：2015-12-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物大分子分离分析技术领域，具体为一种树枝大分子—共聚物细胞捕获材料及其制备方法和应用。本发明首先合成丙烯酰胺和甲基丙烯酸甲酯的共聚物基底，再为基底修饰上聚酰胺‑胺型树枝状高分子，最后利用树枝状分子偶联苯硼酸，从而得到可用于细胞捕获的功能化材料。实验表明，由于共聚物基底的三维网状结构和树枝状分子可增加苯硼酸修饰量，这种功能化材料可以在45分钟内捕获87±5%的细胞；并且由于共聚物基底和树枝状分子均为超亲水化合物，捕获的细胞保持高度活性。本发明利用无模板，低成本，低毒性材料，将其应用于细胞捕获，新颖便捷，实用高效，稳定性高，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN106770614A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611270469.2
申请日：2016-12-30
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明属于纳米技术领域，具体为一种亲水性纳米复合材料结合质谱分析鉴定糖基化肽段的方法。本发明将纳米复合材料配制成为分散液，溶剂为超纯水，将该分散液与糖基化肽段溶液在80%乙腈/0.1%甲酸缓冲液中混合，在酶解仪中孵育；在外磁场作用下通过磁性分离纳米复合材料，用80%乙腈/0.1%甲酸缓冲液洗涤；再用50%乙腈/0.1%甲酸缓冲液洗脱材料上富集的糖基化肽段，结合质谱分析鉴定。该亲水性纳米复合材料为磁性石墨烯表面包覆聚(二烯丙基二甲基氯化铵)和纳米金颗粒并修饰葡萄糖的纳米复合材料。本方法操作简单，成本低廉，灵敏迅速，具有较高灵敏度和较好选择性，十分适用于复杂生物样品中的糖基化肽段的检测。
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公开(公告)号：CN106442796A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610946040.4
申请日：2016-10-26
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种多层纳米金球的液相开管柱及其制作方法和应用。本发明中，首先在毛细管内壁上修饰氨基；将纳米金溶胶置入气瓶，利用钢瓶内的气体将金溶胶压入毛细管，金溶胶中的纳米金球在毛细管内壁自组装；往修饰上第一层纳米金球的毛细管内通入二巯基试剂，再次通入金溶胶，毛细管内壁的金层上自主装第二层纳米金球；重复上述步骤，毛细管内壁即可自组装上多层纳米金球；最后向毛细管内通入巯基试剂，制作成毛细管液相开管柱。制作成功的固定相为多层纳米金球的液相开管柱可用于10-1000个细胞蛋白质和肽的色谱分离。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106198817A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610491898.6
申请日：2016-06-29
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/06
CPC classification number: G01N30/06 , G01N2030/065
Abstract: 本发明属于生物分析和检测技术领域，具体为一种蛋白质N末端肽段的在线分离装置及使用方法。该装置包括：两台高压泵、六通阀、四通阀、三通阀、C18柱和巯基肽段捕集柱以及相关连接部件。本发明中，蛋白质固定于填充C18疏水性填料的毛细管柱中，进而进行柱上氨基封闭，柱上酶解，酶解肽段固相巯基衍生，巯基肽段捕集柱捕集非N末端肽段，实现N末端肽段的在线分离。固相的蛋白封闭反应可以减少除盐过程中的损失，简化实验步骤，缩短样品反应时间；同时，可以通过采用过量的衍生试剂，实现肽段高效快速的巯基衍生。本发明通过在线装置，使得反应时间缩短，减少样品转移，减少样品损失，缩短除盐等预处理步骤的耗时，提高蛋白质N末端肽段鉴定效果。
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公开(公告)号：CN105504301A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201510882965.2
申请日：2015-12-07
Applicant: 复旦大学
CPC classification number: C08G81/02 , C12N5/0693 , C12N2509/00
Abstract: 本发明属于生物大分子分离分析技术领域，具体为一种树枝大分子—共聚物细胞捕获材料及其制备方法和应用。本发明首先合成丙烯酰胺和甲基丙烯酸甲酯的共聚物基底，再为基底修饰上聚酰胺-胺型树枝状高分子，最后利用树枝状分子偶联苯硼酸，从而得到可用于细胞捕获的功能化材料。实验表明，由于共聚物基底的三维网状结构和树枝状分子可增加苯硼酸修饰量，这种功能化材料可以在45分钟内捕获87±5%的细胞；并且由于共聚物基底和树枝状分子均为超亲水化合物，捕获的细胞保持高度活性。本发明利用无模板，低成本，低毒性材料，将其应用于细胞捕获，新颖便捷，实用高效，稳定性高，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN104076111B
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201410320892.3
申请日：2014-07-08
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/06
Abstract: 本发明属于生物分析与检测技术领域，具体为一种用于膜蛋白线鉴定的膜蛋白富集、纯化、酶解一体化装置。该装置由高压泵、六通阀、膜蛋白共价固定反应柱及有关连接组成。所述膜蛋白固定反应柱中填料表面的活性基团能够与膜蛋白游离氨基、羧基发生反应，从而将膜蛋白牢牢固定在反应柱上。本发明利用共价键合的原理将膜蛋白固定在反应柱内，增溶剂以及磷脂等干扰物可通过流动相在线冲洗的方法除去，不会造成额外的样品损失，从而达到理想的鉴定效果。实验表明，利用本发明装置具有反应效率高、非特异性吸附小等优点，并成功运用到大鼠鼠肝组织膜蛋白组的鉴定中。本发明装置结构新颖，实用高效，具有推广应用潜力。
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公开(公告)号：CN105316381A
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201510796026.6
申请日：2015-11-18
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种纳米金修饰的石墨烯用于蛋白质N末端分离的方法。本发明方法步骤为，首先合成纳米金修饰的石墨烯（G@PDA@Au），再对氨基封闭后的蛋白进行酶解，对酶解液进行巯基衍生后，利用G@PDA@Au对衍生上巯基的非N末端肽段进行去除，最后利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行蛋白质N末端的检测。本发明方法可以方便高效地去除非N末端肽段，提高蛋白质N末端肽段鉴定效果。
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公开(公告)号：CN104764796A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510151328.8
申请日：2015-04-01
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N27/64
Abstract: 本发明属于化生指标检测技术领域，具体为一种基于MALDI-ToF MS的血液中糖化血红蛋白含量检测方法。本发明方法基本步骤为，首先对总血红蛋白进行氨基封闭，再对封闭蛋白进行靶上酶解；然后利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到肽段谱图，记录蛋白N末端信号对，根据血红蛋白糖基化末端和非糖基化末端的质谱峰高，计算糖化血红蛋白含量。利用本发明方法可以在一块MALDI-ToF MS靶板上负载一百多个血液样本，并在单次进样中实现糖化血红蛋白的相对定量，可以用于临床上糖化血红蛋白快速高通量检测，为相关疾病（如糖尿病）诊断和治疗提供参考。
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