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公开(公告)号：CN103923193A
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201410182633.9
申请日：2014-04-30
申请人： 四川农业大学
CPC分类号： C07K14/195 , C12N15/70 , G01N33/56911
摘要： 本发明公开了氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的鸭疫里默氏杆菌(RA)表面抗原D15截短重组蛋白，其编码基因、重组表达载体、工程菌、利用工程菌制备该截短重组蛋白的方法；该截短重组蛋白具有与天然D15蛋白相似的免疫反应活性，能够与RA抗体特异性结合，与其它6种常见毒株或菌株阳性血清不产生交叉反应，可作为检测RA全菌抗体的检测抗原应用，且由于该截短重组蛋白非全细菌，用其进行检测时无散毒危险；此外，该截短重组蛋白的制备方法简单，适于工业化大规模生产，能够实现产品的标准化，利于不同实验室之间的结果比较。
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公开(公告)号：CN102417930B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201110369359.2
申请日：2011-11-21
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种基于环介导等温扩增技术的鸭疫里默氏杆菌的核酸检测方法。所述方法为：根据鸭疫里默氏杆菌gyrB基因设计特异性的引物序列，提取待测样品的DNA为模板，进行LAMP反应；对LAMP结果进行分析，若LAMP扩增结果为阳性，则待测样品含有鸭疫里默氏杆菌。本发明提供的针对鸭疫里默氏杆菌的检测方法，具有简便、快速、特异、灵敏和经济的优点，结果判断方法简便，适合于临床或者基层实验室使用，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102618634B
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201210042353.9
申请日：2012-02-21
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种鼠伤寒沙门氏菌特异性PCR检测方法，包括如下步骤：根据鼠伤寒沙门氏菌全基因组序列中保守且特异的STM4493基因序列SEQ？ID：1设计扩增引物对序列SEQ？ID？NO：2和SEQ？ID？NO：3；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含鼠伤寒沙门氏菌；所述判断具体为：若电泳结果在456bp出现单一扩增条带，则说明样品中含有鼠伤寒沙门氏菌；若未出现相应的扩增条带，则样品中不含鼠伤寒沙门氏菌。采用本发明检测鼠伤寒沙门氏菌，检测时间短，成本低，检测结果特异，结果判定简单。
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公开(公告)号：CN102183658B
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201110047062.4
申请日：2011-02-28
申请人： 四川农业大学实验动物工程技术中心
IPC分类号： G01N33/68 , G01N33/531
摘要： 本发明涉及动物医学领域，特别涉及用于检测鸭瘟病毒抗体的方法，具体包括固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色及检测并判定等步骤，本方法是基于纯化的重组UL55蛋白建立的间接ELISA法，其特异性好，对鸭病毒性肝炎病毒(DHV)、鸭疫里默氏菌(RA)、鸭大肠杆菌(E.coli)、鸭源沙门氏菌(Salmonella)、鸭肿头性出血症病毒和鸭源流感病毒的阳性血清进行检测，结果均为阴性；该方法的对酶标板内或板间重复试验显示变异系数均小于10％，能检出经1∶6400倍稀释的DPV弱毒疫苗免疫鸭的阳性血清。
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公开(公告)号：CN102174091B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110026970.5
申请日：2011-01-25
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C07K14/115 , C12N15/45 , C12N15/70 , A61K39/155 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/19
CPC分类号： Y02A50/407
摘要： 本发明涉及动物医学及生物技术领域，尤其涉及截短的鸭瘟病毒重组囊膜gI蛋白，所述的截短表达鸭瘟病毒重组囊膜gI蛋白DNA序列如SEQIDNo.1所示，具有如SEQIDNo.2所示的多肽序列；其制备方法为截短表达鸭瘟病毒重组囊膜gI蛋白的基因的获取，截短表达鸭瘟病毒重组囊膜gI蛋白的重组原核表达载体的制备，其蛋白的制备；所述的截短表达鸭瘟病毒重组囊膜gI蛋白在制备鸭瘟病毒抗原或疫苗中的应用，特别在制备DPV的ELISA抗体检测试剂盒中的应用；本重组囊膜gI蛋白纯度高，本制备方法操作简单，用所述的截短表达鸭瘟病毒重组囊膜gI蛋白对血清中DPV抗体进行ELISA检测具有简便、高效、准确的特点。
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公开(公告)号：CN102994534A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210139063.6
申请日：2012-05-08
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了鸭瘟病毒gE基因转移载体pUC-ΔgE-EGFP，包含转移载体pUC-ΔgE-EGFP的大肠杆菌种(Escherichia coli)JM109于2012年2月24日保藏于位于中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC M2012033；分类命名为大肠杆菌JM109/pUC-ΔgE-EGFP(Escherichia coli JM109/pUC-ΔgE-EGFP)。该转移载体可通过与鸭瘟病毒同源重组，获得EGFP标记基因的重组鸭瘟病毒，鸭瘟病毒gE缺失重组株DPV-ΔgE-EGFP，于2012年2月23日保藏于位于中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：V201210。该重组病毒将可以发展成为具有筛选标记的有效预防鸭瘟的新型疫苗。
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公开(公告)号：CN102732545A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201210139064.0
申请日：2012-05-08
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种鸭瘟病毒转移载体pUC-ΔgC-EGFP及鸭瘟病毒gC缺失重组株DPV-ΔgC-EGFP，含所述转移载体pUC-ΔgC-EGFP的大肠杆菌种(Escherichia coli)DH5α于2011年11月30日保藏于位于中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2011432。该转移载体可通过与鸭瘟病毒同源重组，挑斑纯化后获得EGFP标记的重组病毒DPV-ΔgC-EGFP。实验结果表明，三种剂量重组病毒DPV-ΔgC-EGFP和弱毒疫苗一样能够给强毒攻击后的雏鸭提供100％保护，揭示其有望发展成为一种有效预防鸭瘟病的新型疫苗。
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公开(公告)号：CN101948781B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201010268808.X
申请日：2010-09-01
申请人： 四川农业大学实验动物工程技术中心
摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌疫苗生产用培养基，包括基础培养基和添加物，所述基础培养基的组分及比例为：胰蛋白胨，1.5-1.9％；酵母提取物，0.2-0.7％；牛肉浸膏，0.2-0.7％；水解乳蛋白，0.2-0.7％；葡萄糖，0.1-0.4％；NaCl，0.5％；磷酸二氢钾，0.1-0.7％；磷酸氢二钾，0.1-0.7％；Na2HPO4·12H2O，0.5-0.9％；(NH4)2SO4，0.1-0.2％；NH4Cl，0.01-0.03％；其中所述各组分的百分比为重量/体积百分比；所述添加物为采用颈静脉采血或颈动脉放血的方法无菌采取非疫区健壮牛血并无菌脱纤，于-20℃和室温冻融，反复冻融3次后，保存于-20℃备用或采血并无菌脱纤后直接保存于-20℃，使用前取出反复冻融3次。该培养基可降低成本；增加了营养；克服用活体动物或胚胎培养操作复杂和人工成本高的不足；可以用于大规模发酵生产鸭疫里默氏杆菌疫苗。
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公开(公告)号：CN102360013A
公开(公告)日：2012-02-22
申请号：CN201110105302.1
申请日：2011-04-26
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明涉及动物医学领域，特别涉及用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒由固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液组成，所述抗体捕获剂为重组鸭瘟病毒UL16蛋白，其核苷酸序列如SEQIDNO：3所示；所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法具体步骤为：固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色及检测和判定；本试剂盒特异性和敏感性高，该方法对批内或批间重复试验显示变异系数均小于10%，能检出经1:5120倍稀释的DPV弱毒疫苗免疫鸭的阳性血清。
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公开(公告)号：CN102250224A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110177128.1
申请日：2011-06-28
申请人： 四川农业大学实验动物工程技术中心
摘要： 本发明涉及生物工程领域，特别涉及鸭瘟病毒gG截段重组蛋白及其制备方法,其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，核苷酸序列如SEQIDNO：2所示;然后利用基因工程技术，将其核苷酸序列进行克隆的基础上，将其与原核表达载体pET-32a(+)连接，成功转化大肠杆菌BL21(DE3)表达系统进行诱导、表达的基因工程产品;该蛋白的表达形式是gGM/His融合蛋白，表达的融合蛋白分子量为50kDa，将产品设计为融合表达一是考虑便于纯化，二是能增加表达蛋白的免疫原性;经原核表达系统表达后的产品经Westernblot进行鉴定后表面具有与天然蛋白相似的免疫反应活性。
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