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公开(公告)号：CN111088192B
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202010019410.6
申请日：2020-01-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/20 , B09C1/10 , C02F3/34 , C12R1/01 , C02F101/38
Abstract: 本发明属于抗生素的生物降解技术领域，涉及一种降解微生物，具体涉及一种金黄杆菌DDW4‑2菌株及其在降解四环素类抗生素中的应用，为挖掘更多四环素类抗生素降解菌，本发明提供一种金黄杆菌(Chryseobacterium jejuense)DDW4‑2菌株，该菌株于2019年11月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:60821，该菌株的16S rDNA具有如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，其对四环素类抗生素具有良好的降解作用，能够在16小时后降解48.4％的四环素，为四环素类药物的残留问题提供了安全、环保的解决途径。
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公开(公告)号：CN112640923A
公开(公告)日：2021-04-13
申请号：CN202011429743.2
申请日：2020-12-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01N65/48 , A01P1/00 , A61L2/10 , A61L2/18 , A61L101/56
Abstract: 本发明属于紫外杀菌技术领域，公开了姜黄精油作为紫外杀菌增效剂的应用。本研究基于A波段紫外线(UVA)和姜黄精油杀菌效果微弱(单独作用时杀菌量在0.5log‑1.5log)，将其进行联合作用后具有明显的协同杀菌效果。本发明相较于传统的紫外杀菌技术，能够更高效地杀灭细菌并且减少紫外灯质量对于消毒效果的影响。
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公开(公告)号：CN112568243A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011433111.3
申请日：2020-12-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于紫外杀菌技术领域，公开了一种紫外杀菌增效剂及其联合紫外进行杀菌的方法。本研究基于A波段紫外线(UVA)和佛手柑精油杀菌效果微弱(单独作用时杀菌量在0.5log‑1.5log)，将其进行联合作用后具有明显的协同杀菌效果。本发明相较于传统的紫外杀菌技术，能够更高效地杀灭细菌并且减少紫外灯质量对于消毒效果的影响。
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公开(公告)号：CN110129349B
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN201910282838.7
申请日：2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了基于ISApl1插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC19‑tpm质粒和pUC19‑RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建pTFX‑RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切pTFX‑RP4质粒和pBBR1MCS4‑LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。再进一步将自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，并将获得的荧光标记的大肠杆菌与目标菌株混合培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高、成本低，适用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物。
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公开(公告)号：CN110079540B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201910282837.2
申请日：2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明共公开了一种基于mariner转座子构建自杀型质粒及耐药突变菌株的方法。该自杀型质粒的构建包括如下步骤：以pCat‑marinerr质粒为模板进行PCR扩增，将获得的扩增产物作为质粒骨架；然后以pUC57‑tpm质粒为模板扩增tpm抗性基因，再将质粒骨架和tpm抗性基因进行同源重组，得到所述自杀型质粒。本发明中的耐药突变菌株是将自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，然后将获得菌株和目标菌株混合培养，再用含有亚碲酸盐的单药板、以及含有亚碲酸盐和原抗性筛选标记药物的双药板进行筛选，得到耐药突变菌株。本发明方法操作简单，可高通量的获得转座突变株，适用于构建耐药菌株或筛选药物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111088192A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN202010019410.6
申请日：2020-01-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/20 , B09C1/10 , C02F3/34 , C12R1/01 , C02F101/38
Abstract: 本发明属于抗生素的生物降解技术领域，涉及一种降解微生物，具体涉及一种金黄杆菌DDW4-2菌株及其在降解四环素类抗生素中的应用，为挖掘更多四环素类抗生素降解菌，本发明提供一种金黄杆菌(Chryseobacterium jejuense)DDW4-2菌株，该菌株于2019年11月22日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:60821，该菌株的16S rDNA具有如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，其对四环素类抗生素具有良好的降解作用，能够在16小时后降解48.4％的四环素，为四环素类药物的残留问题提供了安全、环保的解决途径。
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公开(公告)号：CN110129246A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910355278.3
申请日：2019-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一株供体菌、其构建方法与应用以及质粒抑制剂筛选方法。所述的供体菌包含自杀型荧光质粒和pCRISPR-LUX质粒，该供体菌本身不表达荧光；而所述的自杀型荧光质粒可通过接合转移进入受体菌，由于接合子脱离了失去核酸内切酶活性的Cas9蛋白的抑制而可以表达荧光。本发明还提供了所述的供体菌的构建方法及应用，所述的应用为通过分析接合子的荧光表达情况对接合转移效率进行定量分析或质粒抑制剂的筛选。同时，本发明还提供了一种基于CRISPR/dCas9筛选质粒抑制剂的方法，可实现高通量筛选抑制耐药质粒接合转移的物质，筛选过程高效、方便、快捷，适用范围较为广泛，为克服细菌耐药性提供新的思路和方法。
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公开(公告)号：CN110117605A
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201910282847.6
申请日：2019-04-10
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC26-tpm质粒和pUC26-RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建p26-RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切p26-RP4质粒和pBBR1MCS4-LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。将本发明中获得的自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，得到荧光标记的大肠杆菌；最后将其与目标菌株共培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高，可用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物中。
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公开(公告)号：CN110055192A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201910290884.1
申请日：2019-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于环境污染物生物处理技术领域，具体涉及大肠杆菌（Escherichia coli）LHM10-1菌株及其在降解四环素族抗生素中的应用，大肠杆菌（Escherichia coli）LHM10-1菌株，于2019年3月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心（GDMCC），保藏编号为GDMCC No：60622。本发明大肠杆菌LHM10-1菌株对四环素族抗生素具有良好的降解作用。进一步地，本发明提供的大肠杆菌LHM10-1能够在16小时后降解83.91%的四环素和92.24%的伊拉瓦环素,为四环素族抗生素药物的残留问题提供了安全、高效、环保的解决途径。
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公开(公告)号：CN110031576A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910291334.1
申请日：2019-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，特别涉及一种能够检测产四环素类抗生素降解酶细菌的质谱方法，包括以下步骤:S1.细菌与药物共培养：将待测细菌进行培养，得到培养液，并加入四环素类抗生素标准品溶液（四环素类抗生素的终浓度为140~160μg/mL），混匀后30~40℃条件下孵育6~10h；S2.样品前处理：将孵育好的共培养物离心，吸取上清液，在靶板上进行点靶，自然晾干，随后用α-氰基-4-羟基肉桂酸覆盖并再次自然晾干；S3.样品的测定和数据分析：将步骤S2中经过点靶后的靶板采用质谱法进行检测，分析质谱范围依四环素类抗生素的种类而定。本方法具有灵敏度高、准确度高及分辨率高的特点，适用于产四环素类抗生素降解酶细菌的检测。
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