利用HPLC检测木聚糖合成中β-1,4-木糖转移酶活性的方法

    公开(公告)号:CN103954701B

    公开(公告)日:2015-12-09

    申请号:CN201410150610.X

    申请日:2014-04-15

    Abstract: 本发明公开一种利用HPLC检测木聚糖合成中β-1,4-木糖转移酶活性的方法。本发明通过提取植物微囊体,利用微囊体中存在的β-1,4-木糖转移酶,进行Xyln-AA与UDP-Xyl的加成反应,然后利用HPLC进行加成产物的检测,探讨XylT在植物中的活性。由于XylT是木聚糖合成的关键酶,木聚糖是生物质半纤维素的主要成分,理解木聚糖的合成机理有利于更好地利用生物质半纤维素。本发明为深入研究木聚糖合成机理和调节半纤维素中木聚糖成分提供了一种可靠的途径,可根据需要,通过筛选木聚糖合成缺陷型植株,研究调节木聚糖形成的基因,或通过调节影响XylT合成的关键基因,来满足对材料中半纤维素不同含量的需求。

    一种提高植物糖化效率的方法及其应用

    公开(公告)号:CN105112439A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510486749.6

    申请日:2015-08-07

    Abstract: 本发明公开一种提高植物糖化效率的方法及其应用,属于生物质能源领域。本发明通过使植物的UXS基因功能突变或下调,来提高植物的糖化效率。通过本发明的方法使得木糖含量降低,相应地增加了纤维素相对含量,木糖含量的降低又导致突变体材料的糖化效率提高,降低了材料处理成本。因此,本发明从根本上改变了材料的生物质特性,使糖化效率有了根本上的提高,可以节约能源,降低劳动强度。通过本发明的方法获得材料可以应用在生物质转化、纸浆和造纸工业中。

    一个尿苷二磷酸葡萄糖醛酸脱羧酶基因的功能检测

    公开(公告)号:CN103952473A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410120185.X

    申请日:2014-03-27

    CPC classification number: C12Q1/527

    Abstract: 本发明公开一个尿苷二磷酸葡萄糖醛酸脱羧酶基因的功能检测。本发明通过构建尿苷二磷酸葡萄糖醛酸脱羧酶(UXS6)基因与表达载体pEGX-4T-2的重组质粒,导入到细菌中进行原核表达,将UXS6蛋白与尿苷二磷酸葡萄糖醛酸反应后用高效液相色谱仪进行功能检测,并测定该酶在不同温度及不同pH值下酶活性反应的最适条件。本发明通过将重组质粒浸染烟草,进行过表达,进一步探讨尿苷二磷酸葡萄糖醛酸脱羧酶在植物中的作用。由于反应后生成尿苷二磷酸木糖,是半纤维素木聚糖的底物,在工业上具有重要的应用价值。本发明为工业需求提供了一种人为的可靠的途径,可根据现实需要沉默或过表达植物中葡萄糖醛酸基因,从而获得最大的经济效益。

    通过下调XAT基因提高植物糖化效率的方法及其应用

    公开(公告)号:CN111705076A

    公开(公告)日:2020-09-25

    申请号:CN202010574206.0

    申请日:2020-06-22

    Abstract: 本发明公开一种通过下调XAT基因提高植物糖化效率的方法及其应用,属于生物质能源领域。本发明通过使植物的XAT基因功能缺失或下调,来提高植物的糖化效率。通过本发明的方法使得阿拉伯糖含量降低,减少了半纤维素分支度,减弱了其与木质素和纤维素交联的紧密,进一步导致突变体材料的糖化效率提高,降低了材料处理成本。因此,本发明从根本上改变了材料的生物质特性,使糖化效率有了根本上的提高,可以节约能源,降低劳动强度。通过本发明的方法获得材料可以应用在生物质转化、纸浆和造纸工业中。

    一种提高植物基础抗逆的方法及其应用

    公开(公告)号:CN106636125B

    公开(公告)日:2019-11-15

    申请号:CN201610842457.6

    申请日:2016-09-21

    Abstract: 本发明公开一种提高植物基础抗逆的方法及其应用,属于植物抗逆领域。本发明利用生物技术上调植物体内ERF‑VII成员的表达量,ERF‑VII在植物体内的表达量上调后,植物的基础抗逆增加。ERF‑VII成员表达上调后,在各种非生物胁迫下,如干旱、强光、高温、重金属离子胁迫下,植物通过ERF‑VII上调活性氧合成关键基因RbohD的表达,并通过活性氧传递逆境信号,使植物更早地感应胁迫,上调相关胁迫响应基因,从而使植物对逆境的耐受性增强。本发明发现了过表达拟南芥ERF‑VII家族基因成员AtERF74能显著提高植物基础抗逆性,使植株通过更快迅速地ROS迸发传递信号,激活下游胁迫响应基因,响应环境胁迫。

    一种提高植物基础抗逆的方法及其应用

    公开(公告)号:CN106636125A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610842457.6

    申请日:2016-09-21

    Abstract: 本发明公开一种提高植物基础抗逆的方法及其应用,属于植物抗逆领域。本发明利用生物技术上调植物体内ERF‑VII成员的表达量,ERF‑VII在植物体内的表达量上调后,植物的基础抗逆增加。ERF‑VII成员表达上调后,在各种非生物胁迫下,如干旱、强光、高温、重金属离子胁迫下,植物通过ERF‑VII上调活性氧合成关键基因RbohD的表达,并通过活性氧传递逆境信号,使植物更早地感应胁迫,上调相关胁迫响应基因,从而使植物对逆境的耐受性增强。本发明发现了过表达拟南芥ERF‑VII家族基因成员AtERF74能显著提高植物基础抗逆性,使植株通过更快迅速地ROS迸发传递信号,激活下游胁迫响应基因,响应环境胁迫。

    莲纤维素合酶基因NnuCESA4的应用

    公开(公告)号:CN106399358A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610395401.0

    申请日:2016-06-03

    CPC classification number: C12N9/1059 C12N15/8205 C12N15/8246

    Abstract: 本发明公开一种莲纤维素合酶基因NnuCESA4的应用,属于植物基因工程技术领域。本发明得到了莲基因NnuCESA4转拟南芥cesa4纯合突变体的阳性转基因植株。然后通过转基因技术将莲中的NnuCESA4基因转入到相应的拟南芥突变体中检测其功能互补情况,推断该基因的功能表达情况,以便后续可有目的性的将该基因转入到一些林木树种用于增加其纤维素含量,提高可利用性。本发明通过转基因植株、纯合突变体植株与野生型植株对比,发现该基因能部分互补拟南芥cesa4纯合突变体的表型,具有纤维素合酶的功能,促进纤维素的合成,并确定该基因参与植物次生细胞壁中纤维素的合成。

    一种高效提取拟南芥内层黏液层的方法

    公开(公告)号:CN105820266A

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201610253398.9

    申请日:2016-04-20

    CPC classification number: C08B37/0057 C08B37/0003

    Abstract: 本发明公开一种高效提取拟南芥内层黏液层的方法,属于多糖提取领域。本发明的方法是利用超声波提取内层黏液层。该方法经济、简化劳动:提取溶液为水,无需进行脱盐处理便可得到大量的种皮黏液层,而酸碱盐法提取时,残留的盐分需要去除。节省时间:震荡法和酸碱盐法提取时间一般为1~2h,后期还需要进行脱盐,本方法可在20S完成提取。提取效率高:震荡法和酸碱盐法提取过后的种子经钌红染色后显示有大量黏液层残留,而本方法提取后,基本无黏液层残留。该方法具有高效、稳定、重现性好等优点,能最大程度地将黏液层提取出来,可使黏液层的分析更加精确,推动黏液层形成机理的研究,在化工行业中,本方法可缩短提取时间,减少成本。

    利用HPLC检测木聚糖合成中β-1,4-木糖转移酶活性的方法

    公开(公告)号:CN103954701A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410150610.X

    申请日:2014-04-15

    Abstract: 本发明公开一种利用HPLC检测木聚糖合成中β-1,4-木糖转移酶活性的方法。本发明通过提取植物微囊体,利用微囊体中存在的β-1,4-木糖转移酶,进行Xyln-AA与UDP-Xyl的加成反应,然后利用HPLC进行加成产物的检测,探讨XylT在植物中的活性。由于XylT是木聚糖合成的关键酶,木聚糖是生物质半纤维素的主要成分,理解木聚糖的合成机理有利于更好地利用生物质半纤维素。本发明为深入研究木聚糖合成机理和调节半纤维素中木聚糖成分提供了一种可靠的途径,可根据需要,通过筛选木聚糖合成缺陷型植株,研究调节木聚糖形成的基因,或通过调节影响XylT合成的关键基因,来满足对材料中半纤维素不同含量的需求。

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