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公开(公告)号：CN104673742A
公开(公告)日：2015-06-03
申请号：CN201510065430.6
申请日：2015-02-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法，包括步骤：取长白仔猪睾丸组织，获取高比例的长白仔猪睾丸支持细胞以后，完全培养基培养1～2h后更换新鲜培养液，继续培养，最后传代至细胞形态均一的F3代的睾丸成纤维细胞；利用携带Large T和Egfp基因的慢病毒液侵染成纤维细胞，获得特征的并且表达Egfp和支持细胞标记的细胞株；使用优化的培养液培养传代超过50代以后，获得长白仔猪睾丸支持细胞永生系。本发明的长白仔猪睾丸支持细胞永生系体外传代次数已超过90代，对比市场上已建立猪睾丸传代ST细胞，本发明永生化的长白仔猪支持细胞系维持了原代的支持细胞生物学特征，更适合支持细胞的生物学性质研究，可以应用于疫苗开发和药物筛选等方面研究。
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公开(公告)号：CN117178979B
公开(公告)日：2025-02-21
申请号：CN202310921920.6
申请日：2023-07-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种长效常温猪精液保存稀释液及其应用。本发明通过在精液中添加没食子酸甲酯，可以维持精子细胞结构、降低脂质氧化水平、提高精子抗氧化酶活性和提高精子AMPKα磷酸化水平，显著提高常温保存的精子的质量、延长保存时间；pBD129则通过维持精子细胞结构、提高精子AMPKα磷酸化水平显著提高精子质量并延长精液的保存时间。本发明实现了猪精液稀释液在常温下的长期保存，较现有常规方法和常规稀释液的效果有显著提升，且不需要额外操作和环境控制，成本低方法简单，有助于在产业上进行推广应用。
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公开(公告)号：CN118716335A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202411203811.1
申请日：2024-08-30
Applicant: 华南农业大学 , 广东省农业科学院动物科学研究所
Abstract: 本发明公开了一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法。属于精液冷冻技术领域。本发明提供了一种冷冻精液稀释液改良配方，明确了稀释液中单独添加海藻糖和L‑半胱氨酸的最适添加浓度，以及两者组合添加的适宜浓度范围，并且在优化后的稀释液中添加EGCG，极大提升冻后精子质量和保存效果。本发明使用细胞冻存管进行精液冷冻保存，精子冻后活力与用冻精细管冷冻效果无差异，精液剂量提高了6倍。本发明还提供了一种精液中甘油的去除方法，甘油去除率高，且受精率和孵化率能达到与原精液授精相当的效果。
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公开(公告)号：CN117736293A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311517069.7
申请日：2023-11-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种猪CRISP3蛋白及其单克隆抗体的制备方法及应用。针对现有技术中存在的难以表达猪CRISP3蛋白的问题，本发明设计了一种猪CRISP3蛋白的真核表达纯化与单克隆抗体制备的研究方法。CRISP3蛋白在pLVX‑mCMV‑ZsGreen1‑IRES‑Puro载体且在CHO‑K1细胞中分泌表达，该方法表达的蛋白接近天然蛋白，操作简单；通过RT‑PCR和Western blot实验验证，CRISP3重组蛋白能够有效抑制LPS诱导的细胞因子增殖，具有制备抗炎药物的潜力；本方法为日后研究猪CRISP3蛋白在生殖中的作用机制和蛋白功能的领域提供原始材料以及科研数据。
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公开(公告)号：CN117187303A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310949471.6
申请日：2023-07-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/16 , C12N5/10 , C07K14/575
Abstract: 本发明公开一种真核表达猪催乳素重组蛋白的方法，涉及细胞生物工程技术领域。本发明选择CHO‑K1细胞来建立高效表达体系，在构建慢病毒表达载体时选择IgGκ信号肽替换位于猪催乳素1～30AA的信号肽序列，来促进目的基因猪催乳素的外源表达，并且加入Kozak序列提高转录翻译效率，并通过密码子优化和序列改造，然后将目的片段进行了全基因组合成，构建了pCDH‑CMV‑IgGκ‑PRL‑EF1‑GFP+Puro真核表达载体，建立了可高效表达猪催乳素蛋白的CHO细胞系，制备了具有生物活性的重组猪催乳素蛋白，且能够显著促进牛乳腺上皮细胞的增殖和增殖相关基因(PCNA)的上调。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115166257A
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN202210716771.5
申请日：2022-06-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/531 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了猪骨桥蛋白IC‑ELISA检测的建立方法、试剂盒及应用，属于免疫学技术领域。通过本发明提供的骨桥蛋白酶联免疫检测试剂盒和方法，可实现对精液中骨桥蛋白的含量进行检测；特异性好，灵敏度高，检测结果准确性好，重复性好；样品处理简单，检测操作简单，试剂盒均已工作液的形式提供，可对猪场中大规模种公猪群体进行筛选。
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公开(公告)号：CN114891819A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210684262.9
申请日：2022-06-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N15/12 , C12N1/21 , C07K16/18 , C07K16/06 , C07K1/16 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种猪β‑防御素129蛋白及其多克隆抗体的制备方法及应用，此大肠杆菌表达方法对重组PBD129蛋白极其方便及易于表达；原核表达系统的特点有所需成本低廉、操作简便、诱导时间相对较短、目的蛋白在原核生物中能够更稳定、表达产量高、纯化更方便等；本技术提供一种PBD129多克隆抗体的制备，该抗体具有特异性，有利用后续的作用研究。
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公开(公告)号：CN108872588B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201810613485.X
申请日：2018-06-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开一种与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记SPACA4及其应用。本发明提供了一种新的与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记SPACA4，其相对含量与种公猪繁殖性能呈显著正相关，通过测定精子蛋白SPACA4的相对含量，用来判断种公猪精液的受精能力和繁殖性能的高低，可实现对现有种公猪的繁殖性能进行较准确的评定，在生产中可以利用该蛋白标记较准确地进行高繁殖性能种公猪的选育，剔除淘汰繁殖性能差的公猪，有利于提高猪场的繁殖生产成绩和经济效益。在生产上使用方便，通过检测精液蛋白标记SPACA4的含量即可，不会造成种公猪采样损伤和应激。
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公开(公告)号：CN108835031B
公开(公告)日：2020-03-17
申请号：CN201810614804.9
申请日：2018-06-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明公开一种选育高繁殖性能种公猪的方法。本发明主要通过采集具有一定配种生产记录(20胎以上)的种公猪的精液，利用percoll密度梯度离心法分离精子和精清，分别制备精子和精清蛋白样品；通过高通量iTRAQ技术对精子和精清样品进行蛋白定量检测，筛选与公猪繁殖性能相关的精液差异蛋白；再次验证所获精液差异蛋白与种公猪繁殖性能的相关性，并通过体外受精、蛋白表达定位等试验进而确定一批反映种公猪繁殖性能高低的精液蛋白标记；利用这些蛋白标记的相对含量来评定公猪的繁殖性能和精液的受精能力，从而筛选出高繁殖性能的种公猪。在生产上使用方便，通过检测精液蛋白标记含量即可，不会造成种公猪采样损伤和应激。
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公开(公告)号：CN108840919A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810614803.4
申请日：2018-06-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记IZUMO2及其应用。本发明提供了一种新的与种公猪繁殖性能密切相关的精子蛋白标记IZUMO2，其相对含量与种公猪繁殖性能呈显著正相关，通过检测精子蛋白IZUMO2的相对含量，就可判断种公猪的精液受精能力和繁殖性能的高低，可以实现对现有种公猪的繁殖性能进行较准确的评定，在生产中可以利用该蛋白标记准确地进行高繁殖性能种公猪的选育，剔除淘汰繁殖性能差的公猪，有利于提高猪场的繁殖生产成绩和经济效益。在生产上使用方便，通过检测精液蛋白标记IZUMO2含量即可，不会造成种公猪采样损伤和应激。
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