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公开(公告)号:CN117187303A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202310949471.6
申请日:2023-07-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/16 , C12N5/10 , C07K14/575
Abstract: 本发明公开一种真核表达猪催乳素重组蛋白的方法,涉及细胞生物工程技术领域。本发明选择CHO‑K1细胞来建立高效表达体系,在构建慢病毒表达载体时选择IgGκ信号肽替换位于猪催乳素1~30AA的信号肽序列,来促进目的基因猪催乳素的外源表达,并且加入Kozak序列提高转录翻译效率,并通过密码子优化和序列改造,然后将目的片段进行了全基因组合成,构建了pCDH‑CMV‑IgGκ‑PRL‑EF1‑GFP+Puro真核表达载体,建立了可高效表达猪催乳素蛋白的CHO细胞系,制备了具有生物活性的重组猪催乳素蛋白,且能够显著促进牛乳腺上皮细胞的增殖和增殖相关基因(PCNA)的上调。