公开(公告)号：CN111926025A

公开(公告)日：2020-11-13

申请号：CN202010346610.2

申请日：2020-04-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  王楠楠 ,  刘定祥 ,  黄梅 ,  杜倩茹 ,  叶俊贤 ,  罗琼

IPC: C12N15/45 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00

Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40-NP、pXJ40-P、pXJ40-L和pXJ40-DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322-DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322-DHN3质粒上，形成新质粒pBR322-mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK-21细胞，得到拯救病毒rDHN3-mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。

公开(公告)号：CN110592031A

公开(公告)日：2019-12-20

申请号：CN201910910558.6

申请日：2019-09-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 冯涛声 ,  刘定祥 ,  朱庆春 ,  梁佳琪 ,  梁潇颖

IPC: C12N7/01 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT-S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。