一种促进外源蛋白在植物中表达的方法

    公开(公告)号:CN102041269B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN200910235402.9

    申请日:2009-10-13

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 李毅 高锋 魏春红

    Abstract: 本发明公开了一种促进外源蛋白在植物中表达的方法。本发明提供了水稻矮缩病毒的Pns11基因的一种新用途,即水稻矮缩病毒的Pns11基因或其DNA片段在抑制RNA沉默中的应用。基于该新用途,本发明提供了一种促进外源蛋白在植物中表达的方法,是将水稻矮缩病毒的Pns11基因或其DNA片段和外源蛋白的编码基因均导入目的植物中,从而促进外源蛋白在目的植物中的表达。本发明为利用植物材料快速、大量表达异源蛋白提供了有效的技术路线。本发明具有较高的实际应用价值。

    一种提高水稻对矮缩病毒抗性的方法

    公开(公告)号:CN100575486C

    公开(公告)日:2009-12-30

    申请号:CN200510114386.X

    申请日:2005-10-24

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高水稻对矮缩病毒抗性的方法。该方法是将水稻矮缩病毒的S2基因(RDV-S2)的干扰RNA的编码基因导入水稻细胞或组织,得到对矮缩病毒抗性提高的水稻。本发明利用RNA干扰技术抑制RDV感染水稻植株中RDV-S2基因的表达,使得内根-贝壳杉烯氧化酶赤霉素能够发挥正常功能,赤霉素水平恢复正常,从而使得RDV感染植株的矮化等症状消失,恢复正常生长。本发明在RDV的防治领域具有广阔的应用前景,同时对研究植物呼肠孤病毒属其它成员的致病机制也具有借鉴作用。

    一种用微弹轰击对兰花进行基因转化的方法

    公开(公告)号:CN1220778C

    公开(公告)日:2005-09-28

    申请号:CN02128820.8

    申请日:2002-08-14

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种用微弹轰击对兰花进行基因转化的方法,以达到高效、稳定、简便地转化兰花基因的目的。本发明的技术方案是:将携带外源基因片段的质粒载体与直径为1μm的金粉混合制成子弹,对兰花愈伤组织进行轰击,将供体的外源基因片段转移到受体基因组中;所述轰击采用基因枪在1100psi的压力下进行,子弹飞行距离为5.5-6.5厘米,真空度为24-28毫米汞柱。所述高渗培养基优选的为含0.4M甘露醇的高渗培养基,预处理时间为1小时。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料,通过微弹轰击实现兰花基因的转化,即避免了嵌合体的产生,又易于操作,转化效率达到14%以上。利用本发明的方法可以获得稀有花色、多花大花、花期提前或延长的花卉,实现兰花育种及生产的产业化。

    一种用农杆菌介导对兰花进行基因转化的方法

    公开(公告)号:CN1220771C

    公开(公告)日:2005-09-28

    申请号:CN02128819.4

    申请日:2002-08-14

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种用农杆菌介导对兰花进行基因转化的方法,以达到高效、稳定、简便地对兰花进行遗传转化的目的。本发明的技术方案是:1)将兰花Dendrobiumnobile的愈伤组织与携带外源基因片段的农杆菌共培养;2)共培养后的愈伤组织转入含有30mg/L潮霉素的筛选培养基上培养;3)将得到的抗性愈伤组织转接入分化培养基,诱导出苗和生根,得到转基因兰花植株。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导实现兰花的基因转化,即避免了嵌合体的产生,又易于操作,转化效率达到20%以上。为利用转基因技术来改善兰花品质,获得抗病、抗逆、提前开花、花色、花型改变的兰花新品种奠定了良好的基础。

    一种用农杆菌介导对兰花进行基因转化的方法

    公开(公告)号:CN1475563A

    公开(公告)日:2004-02-18

    申请号:CN02128819.4

    申请日:2002-08-14

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种用农杆菌介导对兰花进行基因转化的方法,以达到高效、稳定、简便地对兰花进行遗传转化的目的。本发明的技术方案是:将兰花愈伤组织与携带外源基因片段的农杆菌共培养,将供体的外源基因片段转移到受体基因组中。所述农杆菌应先在液体LB培养基中,28℃振荡培养至对数生长期,然后涂布于固体AB培养基上培养2-3天后刮下收集到无菌水中,兰花愈伤组织在其中浸泡半个小时后,接入共培养培养基共培养。本发明巧妙地以兰花愈伤组织为受体材料,通过农杆菌介导实现兰花的基因转化,即避免了嵌合体的产生,又易于操作,转化效率达到20%以上。为利用转基因技术来改善兰花品质,获得抗病、抗逆、提前开花、花色、花型改变的兰花新品种奠定了良好的基础。

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