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公开(公告)号:CN118256528A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410574962.1
申请日:2024-05-10
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/54 , C12N9/10 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P33/20 , A61K31/7048 , A61P9/00 , A61P9/10 , A61P1/16 , A61P19/10 , A61P25/28 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种植物体外制备川续断皂苷Ⅵ的方法,该方法用一种川续断葡萄糖基转移酶DaUGT120基因制备川续断皂苷Ⅵ。属于生物技术领域。本发明以HN saponin F和尿苷二磷酸‑葡萄糖为原料,在由川续断葡萄糖基转移酶DaUGT120基因编码得到的川续断葡萄糖基转移酶的催化下,在HN saponin F的C‑28位上的葡萄糖糖基上进行糖基化反应,生成川续断皂苷Ⅵ。从川续断中分离并鉴定的基因DaUGT120可为工厂化生产川续断皂苷VI等三萜皂苷奠定基础。
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公开(公告)号:CN118048369A
公开(公告)日:2024-05-17
申请号:CN202311482292.2
申请日:2023-11-09
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种川续断CYP450类型DaCYP085单加氧酶基因及其应用。本发明的优点是:以川续断为研究对象,基于转录组分析,进一步探讨和预测了川续断中常春藤皂苷元合酶的功能与性质,成功克隆得到1个常春藤皂苷元合酶,命名为DaCYP085。通过构建齐墩果酸的酵母底盘,将候选基因导入酵母底盘生成了常春藤皂苷元,用甲醇提取酵母产物进行TCL和HPLC‑MS进行鉴定了这个常春藤皂苷元。本研究为川续断三萜皂苷生物途径解析提供了科学依据,有助于后期促进实现目标产物的定向生物合成,并为高品质续断资源的培育与开发提供一定参考。
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公开(公告)号:CN117925590A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202410031806.0
申请日:2024-01-09
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P33/20 , A61K38/52 , A61K31/58 , A61P29/00 , A61P17/00 , A61P35/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC1和其编码产物的应用,属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜(Neoalsomitra integrifoliola)出发,克隆并功能鉴定了一个功能杂泛的三萜合酶NiOSC1编码基因(Seq ID No.2),环化2,3;22,23‑双环氧鲨烯产生(17R,20R,24S)‑17,24‑环氧巴查烯二醇,(20R,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24R)‑20,24‑环氧达玛烯二醇。本发明还对NiOSC1进行定点突变后,第731位苯丙氨酸突变为甘氨酸或亮氨酸(NiOSC1‑F731G/NiOSC1‑F731L)后,产(17R,20R,24S)‑17,24‑环氧巴查烯二醇,(20R,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24R)‑20,24‑环氧达玛烯二醇分别提高436.3%和240.1%。本发明构建的基因工程细胞安全稳定,生产周期短,在制药领域具有重大价值。
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公开(公告)号:CN117866934A
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202410031804.1
申请日:2024-01-09
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P33/00 , A61K38/52 , A61K31/56 , A61P9/00 , A61P9/10 , A61P37/04 , A61P3/10 , A61P29/00 , A61P39/06 , A61P39/00 , A61P31/18 , A61P35/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC3和其编码产物β‑香树脂醇,α‑香树脂醇和羽扇豆醇的应用,属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜(Neoalsomitra integrifoliola)出发,克隆并功能鉴定了一个合成β‑香树脂醇,α‑香树脂醇和羽扇豆醇的三萜合酶NiOSC3编码基因,其核苷酸序列如Seq ID No.2所示,对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接,构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒,再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程细胞,实现了酿酒酵母异源高效合成化合物β‑香树脂醇,α‑香树脂醇和羽扇豆醇,本发明构建的该基因工程细胞安全稳定,生产周期短,有重大应用价值。本发明提供的NiOSC3产物能用于制备保护心脑血管、提高免疫能力、降低血糖、抗炎、抗氧化、抗疲劳、抗艾滋、抗癌的药物。
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公开(公告)号:CN117844792A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202410031803.7
申请日:2024-01-09
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P33/20 , A61K38/52 , A61K31/58 , A61P9/06 , A61P9/10 , A61P31/04 , A61P31/10 , A61P29/00 , A61P35/00 , A61P25/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC3和其编码产物(20R,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24R)‑20,24‑环氧达玛烯二醇的应用,属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜(Neoalsomitra integrifoliola)出发,克隆并功能鉴定了一个功能杂泛的三萜合酶NiOSC3编码基因,其核苷酸序列如Seq ID No.2所示,它能环化2,3;22,23‑双环氧鲨烯产生杂环三萜,对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接,构建成为pYES2‑NiOSC3的重组质粒,再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程酵母菌,实现了酿酒酵母异源高效合成杂环三萜。本发明构建的该基因工程细胞安全稳定,生产周期短,有重大应用价值。杂环三萜能制备抗心律失常、抗心肌缺血损伤、抗菌、抗炎、抗癌和保护神经等药物。
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公开(公告)号:CN117844791A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202410031796.0
申请日:2024-01-09
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P33/20 , A61K38/52 , A61K31/58 , A61P9/06 , A61P9/10 , A61P31/04 , A61P31/10 , A61P35/00 , A61P25/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC5和其编码产物(20S,24S)‑20,24‑环氧达玛烯二醇,(20S,24R)‑20,24‑环氧达玛烯二醇的应用,属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜(Neoalsomitra integrifoliola)出发,克隆并功能鉴定了一个功能杂泛的三萜合酶NiOSC5编码基因,其核苷酸序列如Seq ID No.2所示,对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接,构建成为pYES2‑NiOSC5的重组质粒,再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程酵母菌,实现了酿酒酵母异源高效环化2,3;22,23‑双环氧鲨烯产生杂环三萜,本发明构建的该基因工程细胞安全稳定,生产周期短,显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的NiOSC5产物杂环三萜能用于制备抗心律失常、抗心肌缺血损伤、抗菌、抗炎、抗癌、保护神经的药物。
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公开(公告)号:CN117778422A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202311482293.7
申请日:2023-11-09
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种川续断阿拉伯糖基转移酶DaUGT044基因及其在制备川续断皂苷VI合成前体葳岩先皂苷A的应用。本发明的优点是:以常春藤皂苷元和尿苷二磷酸‑阿拉伯糖为原料,在由川续断阿拉伯糖基转移酶DaUGT044基因编码得到的川续断阿拉伯糖基转移酶的催化下,在常春藤皂苷元(Hederagenin)的C‑3位上的羟基上进行糖基化反应,生成葳岩仙皂苷A(CaulosideA)。从川续断中分离并鉴定的基因DaUGT044可为工厂化生产川续断皂苷VI等三萜皂苷奠定基础,同时也可作为为川续断的分子辅助育种的重要标记基因。
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公开(公告)号:CN112063647B
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202010982096.1
申请日:2020-09-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用,本发明通过同源重组的手段,将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因:tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01,发现其可产生葫芦二烯醇;再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因:ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达,得到最终重组菌Cuol02,其葫芦二烯醇产量明显提高;为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。
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公开(公告)号:CN112063647A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010982096.1
申请日:2020-09-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了酿酒酵母重组菌Cuol01的构建方法、酿酒酵母重组菌Cuol02及应用,本发明通过同源重组的手段,将生产葫芦二烯醇合成途径的下游模块6个基因:tHMG1、HcCPR1、ERG1、ERG20、ERG9和HcOSC6基因均导入酿酒酵母中得到初始重组菌Cuol01,发现其可产生葫芦二烯醇;再导入甲羟戊酸途径的上游模块7个基因:ERG12、ERG13、ERG19、ERG8、IDI、tHMG1和ERG10基因的表达,得到最终重组菌Cuol02,其葫芦二烯醇产量明显提高;为人工合成达玛二烯和原人参二醇奠定了基础。
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公开(公告)号:CN108815221A
公开(公告)日:2018-11-16
申请号:CN201810734677.6
申请日:2018-07-06
Applicant: 云南农业大学
IPC: A61K36/28 , A01C21/00 , G01N30/02 , A61K127/00
Abstract: 本发明公开一种提高灯盏花药效成分的方法及成分检测方法,包括如下步骤:分别配制20mmol/L的水杨酸溶液、赤霉素溶液、萘乙酸溶液、脱落酸溶液、茉莉酸甲酯溶液或过氧化氢溶液;选择2个月龄灯盏花穴盘苗;取水杨酸溶液、赤霉素溶液、萘乙酸溶液、脱落酸溶液、茉莉酸甲酯溶液或过氧化氢溶液装入喷壶喷洒灯盏花穴盘苗;每12小时喷洒一次,连续喷洒7天;采集灯盏花叶片,微波杀青5min,HPLC检测灯盏乙素、绿原酸、3,5-二咖啡酰喹啉酸、飞蓬酯乙含量。本发明通过对灯盏花喷洒有机溶液,可以有效提高灯盏花内的灯盏乙素、绿原酸、3,5-二咖啡酰喹啉酸、飞蓬酯乙含量,提高灯盏花的药用价值。
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