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公开(公告)号：CN107142329A
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201710554029.8
申请日：2017-07-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及一种旱稻孢囊线虫LAMP快速检测方法。通过比对旱稻孢囊线虫核糖体rDNA‑ITS序列，筛选获得特异性位点，设计筛选出5条LAMP引物HE‑F3、HE‑B3、HE‑FIP、HE‑BIP和HE‑LB。本发明提取旱稻孢囊线虫基因组DNA，通过环介导等温扩增，再对扩增产物显色和观察，从而快速检测和鉴定出旱稻孢囊线虫,能够从14种植物线虫22个群体中特异的检测出旱稻孢囊线虫，检测阈值为1/20000头孢囊，灵敏度较普通PCR方法的高10倍。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷，结果肉眼即可观察，在旱稻孢囊线虫快速检测和早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN104928372B
公开(公告)日：2017-08-08
申请号：CN201510295749.8
申请日：2015-06-02
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明为“菲利普孢囊线虫Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测方法及其应用”，属植物线虫分子检测技术领域。“菲利普孢囊线虫Taqman MGB探针实时荧光定量PCR检测方法及其应用”公开了一种基于菲利普孢囊线虫RAPD特异性序列设计了一条特异的荧光探针HF‑probe和一组特异性引物qHF‑R和qHF‑F，上述探针和引物能从菲利普孢囊线虫中扩增获得特异性的荧光曲线，从而实现对菲利普孢囊线虫的快速分子检测。本发明具有灵敏度高，特异性强且快速准确，在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间监测预警等方面，具有很高的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN104920363A
公开(公告)日：2015-09-23
申请号：CN201510257546.X
申请日：2015-05-18
Applicant: 华南农业大学 , 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及黄酮类化合物theaflavanoside Ⅲ在防治植物线虫病害上的应用，黄酮类化合物theaflavanoside Ⅲ的结构如式(1)所示。黄酮类化合物theaflavanoside Ⅲ对孢囊线虫、根结线虫、短体线虫、水稻干尖线虫均有强毒杀活性,特别是对孢囊线虫的毒力非常强。含有黄酮类化合物theaflavanoside Ⅲ的油茶籽饼粉大田试验表明，对大豆孢囊线虫病害的防治效果与目前常用化学杀线虫剂噻唑磷的药效相当。
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公开(公告)号：CN103387977B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310345091.8
申请日：2013-08-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种快速高效的植物寄生线虫总RNA提取方法及其应用。植物线虫组织破碎方法，采用如下步骤：（1）制备玻璃粉末：将普通玻璃破碎后收集过60目筛子的粉末，用浓盐酸洗后再用去离子水洗至pH7.0，再高温去除RNA酶；（2）搅拌破碎：于无RNA酶离心管中加入玻璃粉末和TRIzol试剂以及线虫体，用微量电动组织匀浆器搅拌玻璃粉末，直至线虫组织破碎。本发明以自制的玻璃粉末结合TRIzol试剂实现对线虫的快速充分研磨，具有操作简便、无需特殊仪器设备和可靠性高等优点，应用该方法能够提取高质量的总RNA。该方法可在不同实验条件的实验室进行推广应用，在植物线虫分子生物学研究中具有极高的应用价值。
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公开(公告)号：CN119464512A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411904304.0
申请日：2024-12-23
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所 , 新疆维吾尔自治区植物保护站
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于可视化检测干尖线虫的RPA‑CRISPR/Cas12a引物组和探针及应用，属于分子检测技术领域。本发明基于干尖线虫基因组DNA上特异性序列设计出特异性引物组和探针，结合CRISPR/Cas12a反应体系一管式检测，建立了大豆症青病原干尖线虫的RPA‑CRISPR/Cas12a检测方法，成功用于大豆叶片中是否存在潜伏侵染干尖线虫的可视化检测；本发明的检测方法操作便捷，检测速度快，适用于在田间快速检测大豆根、茎、叶和豆荚中是否存在潜伏侵染的干尖线虫，实现对田间侵染的大豆症青植株进行可视化检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116803257B
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202310998375.0
申请日：2023-08-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: A01K67/033 , A61K49/00
Abstract: 本发明公开了一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法，属于生物技术领域，该方法用纤维素酶和果胶酶裂解植物组织，裂解后的植物组织研磨，并进行梯度冲洗过滤，获得不同龄期的植物寄生线虫。本发明经反复筛选和实验验证发现，采用特定的纤维素酶和果胶酶能够高效、充分裂解植物的细胞壁，利用橡皮塞轻轻磨破植物组织，从而使得寄生在植物根系内的线虫释放出来；将裂解的植物组织通过不同孔径大小的筛网，获得不同龄期的植物线虫，再通过蔗糖溶液离心，即可分离富集出不同龄期植物线虫；本发明操作简单，安全且成本低，可以迅速地从植物组织内获得大量的植物线虫，为获取不同龄期植物线虫及其研究提供了一种有效方法。
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公开(公告)号：CN113832038B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202111136001.5
申请日：2021-09-27
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及生物防治领域，具体涉及木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)K2017‑696及其应用。本发明提供的木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)，其保藏号为CGMCC No.22444。该菌株对大豆具有明显的促生作用，同时能够抑制引起大豆根腐病的病原真菌，具有很好的促生及生物防治效果，因此具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114805526B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202210469675.5
申请日：2022-04-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/02
Abstract: 本发明公开了甜菜孢囊线虫的Hs24B03蛋白、编码基因及其应用。甜菜孢囊线虫的Hs24B03蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。本发明利用寄主介导的RNAi沉默Hs24B03基因后，白雌虫的数量与对照野生型植株相比显著减少，而在拟南芥中过表达Hs24B03基因，甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比，显著增加。本发明研究表明Hs24B03基因在甜菜孢囊线虫寄生致病过程中具有重要作用，可作为植物抗线虫工程的靶标基因。本发明对于孢囊线虫致病机理研究以及抗线虫植物制备具有重大价值。
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公开(公告)号：CN114410802B
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202210108808.6
申请日：2022-01-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测禾谷孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用，属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物和探针，其包括一对特异性引物HaRPA‑F3和HaRPA‑R3，以及一个探针Ha‑probe，其中，所述HaRPA‑F3和HaRPA‑R3的核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑2所示，所述Ha‑probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。利用上述RPA引物和探针建立了禾谷孢囊线虫的快速可视化检测方法，且灵敏度高，特异性强，整个检测过程可以在1小时内完成。因此，本发明RPA检测法是一种简单、快速、特异、灵敏度高和直观的方法，可以适用于在田间快速检测禾谷孢囊线虫。
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公开(公告)号：CN114410802A
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202210108808.6
申请日：2022-01-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测禾谷孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用，属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物和探针，其包括一对特异性引物HaRPA‑F3和HaRPA‑R3，以及一个探针Ha‑probe，其中，所述HaRPA‑F3和HaRPA‑R3的核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑2所示，所述Ha‑probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。利用上述RPA引物和探针建立了禾谷孢囊线虫的快速可视化检测方法，且灵敏度高，特异性强，整个检测过程可以在1小时内完成。因此，本发明RPA检测法是一种简单、快速、特异、灵敏度高和直观的方法，可以适用于在田间快速检测禾谷孢囊线虫。
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