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公开(公告)号：CN112285347B
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202011062115.5
申请日：2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569 , G01N27/62 , C07K14/08
Abstract: 为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获 重组表达，作为人工抗原用于给定病原的特异性猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗 抗体检测。原的猪白细胞抗原II类DR分子（SLA‑DR），将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后，脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列，鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列，并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化，作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测，
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公开(公告)号：CN116554316A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310616437.7
申请日：2023-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明适用于基因工程技术领域，提供了一种特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体及应用，纳米抗体的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，纳米抗体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。本发明的特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体可以特异性结合人、猪和兔HEV 239蛋白，利用原核表达系统表达并纯化纳米抗体，与猪HEV 239蛋白或猪HEV分别孵育后接种HpG2细胞，从而发挥抗病毒功能。
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公开(公告)号：CN111138535B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010069365.5
申请日：2020-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明采用对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性的单克隆抗体5D9制作免疫增强剂，所形成的免疫复合物与佐剂联合免疫小鼠时，IFN‑γ分泌T细胞显著升高，提示在灭活病毒免疫过程中，PRRSV特异性抗体5D9与正常的水包油佐剂联合免疫可增强CTL反应。动物试验表明，本发明制备的免疫复合物的免疫保护率相比仅采用商业化佐剂ISA 206制备得到的疫苗以及商品化的弱毒疫苗能够达到更高的保护效力。
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公开(公告)号：CN112457397A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011346127.0
申请日：2020-11-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K19/00 , C12N15/85 , G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开一种PRRSV N蛋白的纳米抗体及其制备方法和应用，属于生物技术领域，所述纳米抗体的氨基酸序列为序列表中的SEQ ID No.1。本发明还公开了所述纳米抗体与辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)融合蛋白的表达制备方法，同时评价了所述纳米抗体与HRP融合蛋白在检测猪血清中PRRSV抗体中的应用，本发明将所述抗PRRSV N蛋白纳米抗体与HRP融合蛋白应用于建立检测猪血清中PRRSV抗体的竞争ELISA中，建立的方法操作简单，检测样品耗时短，不需要使用酶标二抗。为后续将所述纳米抗体应用于PRRSV抗体检测的产品的开发提供了关键的材料。
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公开(公告)号：CN104710528B
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201510111199.X
申请日：2015-03-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/85 , A61K39/395 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一株特异性抗PRRS病毒非结构蛋白Nsp9的纳米抗体，同时公布了该纳米抗体的VHH序列以及编码该纳米抗体的DNA序列。本发明还提供了一种表达载体，其可以在Marc‑145细胞中表达纳米抗体‑eGFP融合蛋白。本发明的抗Nsp9的纳米抗体可以特异性结合PRRS病毒非结构蛋白Nsp9，并且具有抑制PRRS病毒经典毒株和高致病毒株在Marc‑145细胞中增殖的功能。本发明的纳米抗体可开发成治疗PRRS的药物，其对应的基因可用于抗PRRS转基因猪的研制。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107290523A
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201710369057.2
申请日：2017-05-23
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/68
CPC classification number: G01N33/5436 , G01N33/54326 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于抗体检测技术领域，公开了一种抗体捕获蛋白及报告基因融合重组蛋白检测抗体的方法，通过蛋白质工程的手段将报告基因的编码核酸序列直接与抗原编码核酸的序列融合后重组表达的方式获得报告基因或酶融合抗原；直接使用表达酶融合抗原的细胞或真核或原核裂解物作为抗原；使用抗体捕获蛋白包被聚苯乙烯板捕获待检测样本中的抗体。本发明无需化学偶联，对抗原的影响最少；可直接使用表达酶融合抗原的细胞(真核或原核)裂解物作为抗原，无需纯化步骤，降低生产成本；不同的试剂盒所使用的聚苯乙烯板包被可以完全一样；不使用酶标记二抗，同一个检测试剂盒对来源于不同物种源的样本均可适用。
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公开(公告)号：CN104744572A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201410503871.5
申请日：2014-09-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/08 , C07K5/103 , C07K16/10 , A61K39/29 , A61P31/14 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明利用传统的杂交瘤细胞技术制备了两株分泌抗禽和猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)共有抗原表位的单克隆抗体杂交瘤细胞系，命名为3E8和1B5，其细胞保藏号分别为CCTCC No：C201395和CCTCC No：C201396。本发明利用噬菌体随机7肽库试剂盒鉴定了上述两株单抗识别的共有抗原表位的氨基酸序列，分别为V/IPHD(SEQ ID No:1)和VKLYM(SEQ ID No:2)，同时分析了两个表位的模拟肽在禽和猪HEV血清学诊断中的应用。本发明公布的禽和猪HEV衣壳蛋白两个共有抗原表位的模拟肽，可以用于禽和猪HEV的快速诊断以及疾病流行的监控。另外，本发明公布的两株识别上述共有表位的单克隆抗体，也可以快速诊断禽和猪HEV。
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公开(公告)号：CN103525766B
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201310117509.X
申请日：2013-03-24
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了猪肾细胞系及其应用，猪肾细胞系，其保藏号为：CCTCC C201324。本发明构建的稳定表达CD163的PK-15细胞系可以用于PRRSV病毒的分离和培养，也可以用于PRRSV细胞受体的研究。PRRSV易感的猪源细胞系的建立，为PRRSV的培养提供了一个备选细胞系，扩大了PRRSV研究的宿主细胞范围，对于PRRSV疫苗的生产有着重要的意义。
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公开(公告)号：CN104610437A
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201410690742.1
申请日：2014-11-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/08 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2770/28122 , G01N33/56983 , G01N33/68 , G01N2333/08
Abstract: 本发明公开了两种包含禽戊型肝炎病毒ORF3蛋白抗原区的重组蛋白及其制备和应用，所述的重组蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID No:2和SEQ ID No:3所示，所述的含禽戊型肝炎病毒ORF3蛋白抗原区，其位于ORF3蛋白C端区域74-87个氨基酸之间，氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。本发明的两种蛋白可以用于禽HEV抗体的检测，佐证以禽HEVORF2蛋白为包被抗原血清检测结果，在禽戊型肝炎病毒的血清学诊断方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114456263A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210071936.8
申请日：2022-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明适用于基因工程技术领域，提供了一种特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体及应用，纳米抗体的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，纳米抗体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。本发明的特异性结合戊型肝炎病毒衣壳蛋白的纳米抗体可以特异性结合人、猪和兔HEV 239蛋白，利用原核表达系统表达并纯化纳米抗体，与猪HEV 239蛋白或猪HEV分别孵育后接种HpG2细胞，从而发挥抗病毒功能。
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