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公开(公告)号:CN111087468B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202010069336.9
申请日:2020-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体5D9。用ELISA技术测定该单克隆抗体5D9的亚型为IgM型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体5D9对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。
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公开(公告)号:CN119119306B
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202411603643.5
申请日:2024-11-12
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N1/21 , C12N15/70 , A61K38/21 , A61K38/17 , A61K47/65 , A61P11/00 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白及应用。本发明提供ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,所述ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白通过连接肽(H4)2将ISG15与IFN‑λ3连接起来,所述ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明解决了现有技术中IFN‑λ3蛋白表达量低、生产周期及生产成本高,难以大规模生产应用的技术问题。
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公开(公告)号:CN112226408B
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202011057070.2
申请日:2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/0784 , C12N5/071 , C12N5/0786 , G01N27/62 , G01N33/569 , C07K14/08 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明通过对免疫原(病原或蛋白抗原)上的有效抗原肽序列进行筛选,去除免疫原中对机体不具有免疫活性(即不能激活机体适应性免疫应答)的无用肽段,筛选出免疫活性较强,可高效刺激机体产生免疫应答的抗原肽。抗原肽相对于原始免疫原,因其序列较短,亲水性较强,因此易于在体外进行表达,并且可随意将不同抗原肽或不同免疫原来源的抗原肽串联制备复合抗原肽,或将同一抗原肽进行多次重复以增强T细胞识别,同时可与其他具有免疫增强蛋白等融合表达,进一步增强机体免疫系统对抗原肽所产生的免疫应答反应。
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公开(公告)号:CN112285347B
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202011062115.5
申请日:2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569 , G01N27/62 , C07K14/08
Abstract: 为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获 重组表达,作为人工抗原用于给定病原的特异性猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗 抗体检测。原的猪白细胞抗原II类DR分子(SLA‑DR),将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后,脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列,鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列,并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化,作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测,
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公开(公告)号:CN111138535B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202010069365.5
申请日:2020-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明采用对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性的单克隆抗体5D9制作免疫增强剂,所形成的免疫复合物与佐剂联合免疫小鼠时,IFN‑γ分泌T细胞显著升高,提示在灭活病毒免疫过程中,PRRSV特异性抗体5D9与正常的水包油佐剂联合免疫可增强CTL反应。动物试验表明,本发明制备的免疫复合物的免疫保护率相比仅采用商业化佐剂ISA 206制备得到的疫苗以及商品化的弱毒疫苗能够达到更高的保护效力。
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公开(公告)号:CN107290523A
公开(公告)日:2017-10-24
申请号:CN201710369057.2
申请日:2017-05-23
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/68
CPC classification number: G01N33/5436 , G01N33/54326 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于抗体检测技术领域,公开了一种抗体捕获蛋白及报告基因融合重组蛋白检测抗体的方法,通过蛋白质工程的手段将报告基因的编码核酸序列直接与抗原编码核酸的序列融合后重组表达的方式获得报告基因或酶融合抗原;直接使用表达酶融合抗原的细胞或真核或原核裂解物作为抗原;使用抗体捕获蛋白包被聚苯乙烯板捕获待检测样本中的抗体。本发明无需化学偶联,对抗原的影响最少;可直接使用表达酶融合抗原的细胞(真核或原核)裂解物作为抗原,无需纯化步骤,降低生产成本;不同的试剂盒所使用的聚苯乙烯板包被可以完全一样;不使用酶标记二抗,同一个检测试剂盒对来源于不同物种源的样本均可适用。
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公开(公告)号:CN119119306A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202411603643.5
申请日:2024-11-12
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N1/21 , C12N15/70 , A61K38/21 , A61K38/17 , A61K47/65 , A61P11/00 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白及应用。本发明提供ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,所述ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白通过连接肽(H4)2将ISG15与IFN‑λ3连接起来,所述ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明解决了现有技术中IFN‑λ3蛋白表达量低、生产周期及生产成本高,难以大规模生产应用的技术问题。
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公开(公告)号:CN111450248B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN202010354506.8
申请日:2020-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明采用筛选得到的对于PRRSV具有广谱中和活性的单克隆抗体MAB‑GP3为活性成分,制备得到对PRRSV感染具有预防和治疗效果的药物制剂,将其用于PRRSV感染的治疗,其可以有效的减轻肺部宏观病变,同时还能有效的提升感染动物的存活率。
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公开(公告)号:CN112226408A
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN202011057070.2
申请日:2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/0784 , C12N5/071 , C12N5/0786 , G01N27/62 , G01N33/569 , C07K14/08 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明通过对免疫原(病原或蛋白抗原)上的有效抗原肽序列进行筛选,去除免疫原中对机体不具有免疫活性(即不能激活机体适应性免疫应答)的无用肽段,筛选出免疫活性较强,可高效刺激机体产生免疫应答的抗原肽。抗原肽相对于原始免疫原,因其序列较短,亲水性较强,因此易于在体外进行表达,并且可随意将不同抗原肽或不同免疫原来源的抗原肽串联制备复合抗原肽,或将同一抗原肽进行多次重复以增强T细胞识别,同时可与其他具有免疫增强蛋白等融合表达,进一步增强机体免疫系统对抗原肽所产生的免疫应答反应。
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公开(公告)号:CN119139459B
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411603641.6
申请日:2024-11-12
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用。本发明选择(H4)2连接肽将ISG15与IFN‑λ3连接制备得到ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,可以实现IFN‑λ3蛋白的稳定、大量表达,解决了无法使用原核表达系统大量生产IFN‑λ3的技术问题,同时,本发明对ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在体内的抗PRRSV活性进行了验证,证明重组表达的ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白对抑制PRRSV在体内的复制有抑制效果,减轻肺脏中的炎性因子的分泌并改善了PRRSV感染后引起的病毒血症。
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