PRRSV广谱中和单克隆抗体5D9及其应用

    公开(公告)号:CN111087468B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202010069336.9

    申请日:2020-01-21

    Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。经细胞融合,病毒感染Marc145细胞筛选克隆,获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系,获得鼠单克隆抗体5D9。用ELISA技术测定该单克隆抗体5D9的亚型为IgM型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞,利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测,证明单克隆抗体5D9对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验,利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性,可阻止病毒入侵,保护机体免受感染。

    一种猪血清样中病原抗体ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN112285347B

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202011062115.5

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获 重组表达,作为人工抗原用于给定病原的特异性猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗 抗体检测。原的猪白细胞抗原II类DR分子(SLA‑DR),将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后,脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列,鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列,并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化,作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测,

    一种免疫增强剂及其在疫苗制备中的应用

    公开(公告)号:CN111138535B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202010069365.5

    申请日:2020-01-21

    Abstract: 本发明采用对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性的单克隆抗体5D9制作免疫增强剂,所形成的免疫复合物与佐剂联合免疫小鼠时,IFN‑γ分泌T细胞显著升高,提示在灭活病毒免疫过程中,PRRSV特异性抗体5D9与正常的水包油佐剂联合免疫可增强CTL反应。动物试验表明,本发明制备的免疫复合物的免疫保护率相比仅采用商业化佐剂ISA 206制备得到的疫苗以及商品化的弱毒疫苗能够达到更高的保护效力。

    抗体捕获蛋白及报告基因融合重组蛋白检测抗体的方法

    公开(公告)号:CN107290523A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710369057.2

    申请日:2017-05-23

    CPC classification number: G01N33/5436 G01N33/54326 G01N33/68

    Abstract: 本发明属于抗体检测技术领域,公开了一种抗体捕获蛋白及报告基因融合重组蛋白检测抗体的方法,通过蛋白质工程的手段将报告基因的编码核酸序列直接与抗原编码核酸的序列融合后重组表达的方式获得报告基因或酶融合抗原;直接使用表达酶融合抗原的细胞或真核或原核裂解物作为抗原;使用抗体捕获蛋白包被聚苯乙烯板捕获待检测样本中的抗体。本发明无需化学偶联,对抗原的影响最少;可直接使用表达酶融合抗原的细胞(真核或原核)裂解物作为抗原,无需纯化步骤,降低生产成本;不同的试剂盒所使用的聚苯乙烯板包被可以完全一样;不使用酶标记二抗,同一个检测试剂盒对来源于不同物种源的样本均可适用。

    ISG15-(H4)2-IFN-λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用

    公开(公告)号:CN119139459B

    公开(公告)日:2025-03-07

    申请号:CN202411603641.6

    申请日:2024-11-12

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用。本发明选择(H4)2连接肽将ISG15与IFN‑λ3连接制备得到ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,可以实现IFN‑λ3蛋白的稳定、大量表达,解决了无法使用原核表达系统大量生产IFN‑λ3的技术问题,同时,本发明对ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在体内的抗PRRSV活性进行了验证,证明重组表达的ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白对抑制PRRSV在体内的复制有抑制效果,减轻肺脏中的炎性因子的分泌并改善了PRRSV感染后引起的病毒血症。

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