公开(公告)号：CN117568343A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311459090.6

申请日：2023-11-03

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 高元鹏 ,  经佳懿 ,  张景程 ,  张涌

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明公开了一种靶向编辑PRLR基因的sgRNA及其应用，属于动物基因工程技术领域。本发明公开的一种靶向编辑PRLR基因的sgRNA，包括PRLR sgRNA139、PRLR sgRNA188、PRLR sgRNA189。本发明提供的一种靶向编辑PRLR基因的sgRNA，为后续确定PRLR基因编辑效率较优的胞嘧啶碱基编辑系统和打靶位点，获得PRLR基因编辑抗热应激奶牛培育的体细胞核移植供体细胞以及牛体外受精显微注射胚胎奠定基础，最终为我国牛耐热品种选育提供技术支撑。

公开(公告)号：CN111944745B

公开(公告)日：2023-12-19

申请号：CN202010858331.4

申请日：2020-08-24

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张景程 ,  黄玥萌 ,  张敏 ,  王德宝 ,  王永 ,  张涌

IPC: C12N5/075

Abstract: 本发明公开了一种无血清的牛卵母细胞体外成熟培养液及卵母细胞培养方法，属于细胞培养技术领域。本发明公开的一种无血清的牛卵母细胞体外成熟培养液，包括无Hepes的M199基础培养液、无脂肪酸BSA、HMG、17β‑雌二醇、EGF、L‑cysteine、bFGF、100xGlutamax、叶酸、胆酸、CXCL12。本发明公开的牛卵母细胞体外成熟培养液在不使用血清的情况下培养牛卵母细胞，提高了牛卵母细胞的成熟率，并有效提高体外受精胚胎和体细胞核移植胚胎的早期胚胎发育率。

公开(公告)号：CN111157710B

公开(公告)日：2021-12-31

申请号：CN202010047929.5

申请日：2020-01-16

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张景程 ,  张涌 ,  黄玥萌 ,  张敏 ,  王永 ,  李赫强 ,  王勇胜

IPC: G01N33/48

Abstract: 本发明公开了一种挑选牛体外可移植胚胎的方法，属于家畜胚胎工程技术领域。本发明公开的一种挑选牛体外可移植胚胎的方法，从胚胎化学激活完毕或受精完毕开始计为第零天，在胚胎培养至第六天和第七天时进行挑选；挑选时第六天选择致密化桑葚胚及早期囊胚，挑选时第七天选择有腔囊胚及腔扩张囊胚。本发明公开的一种挑选牛体外可移植胚胎的方法，在进行体外胚胎移植之前进行挑选，能提高体外胚胎质量，从而保障移植后的怀孕率，以减少未怀孕牛的出现率并降低生产成本。

公开(公告)号：CN110305836A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910551341.0

申请日：2019-06-24

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张涌 ,  张景程 ,  王勇胜

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明公开了一种牛体外受精的受精液及其使用方法，受精液包括不含肌醇的SOF基础培养基，还包括以下添加剂：L-精氨酸、L-天冬氨酸、L-肉碱、肾上腺素、青霉胺、亚牛磺酸、肝素。采用本发明的受精液，可有效保证牛胚胎体外受精率和受精胚胎的发育质量。

公开(公告)号：CN106086080B

公开(公告)日：2018-12-04

申请号：CN201610537461.1

申请日：2016-07-08

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张涌 ,  张景程 ,  屈鹏翔 ,  王勇胜

IPC: C12N15/877 ,  C12N5/073

Abstract: 本发明公开了一种利用微小核糖核酸提高牛克隆效率的方法，在体细胞核移植的电融合液中加入bta‑miR‑125b mimic，可以有效地导入到胚胎中，在避免产生转染的二次损伤的同时，还能有效地减弱体细胞克隆胚在合子激活时期的组蛋白H3K9me3表观遗传修饰水平，显著提高牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量。

公开(公告)号：CN108410894A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810187279.7

申请日：2018-03-07

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张涌 ,  刘鑫 ,  张景程 ,  高元鹏 ,  邢徐鹏 ,  周川

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/89 ,  C12N15/877

Abstract: 本发明公开了一种基于组蛋白甲基化水平的修饰提高牛克隆效率的载体及方法。本发明提供的载体包括含有牛KDM4E基因的体外转录模板载体。载体经体外转录反应可获得大量牛KDM4E基因的mRNA，再将其注入到成功融合并激活的牛体细胞克隆胚胎中，使胚胎过量表达牛KDM4E蛋白。本发明可以有效减弱体细胞克隆胚胎在合子激活时期的组蛋白H3K9me3和H3K9me2表观遗传修饰水平，从而显著提高后期牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量，可用以高效体外生产牛体细胞克隆胚胎，胚胎移植后克隆牛的出生率也显著提高。

公开(公告)号：CN107916249A

公开(公告)日：2018-04-17

申请号：CN201711117369.0

申请日：2017-11-13

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张景程 ,  张涌

IPC: C12N5/073

CPC classification number: C12N5/0604 ,  C12N2500/12 ,  C12N2500/16 ,  C12N2500/30 ,  C12N2500/32 ,  C12N2501/998 ,  C12N2501/999

Abstract: 本发明提供了一种提高牛体细胞克隆胚和体外受精胚的发育质量的培养液和培养方法，培养液包括体积分数2％的BME、体积分数1％的MEM、1mmol/L的谷氨酰胺、8mg/mL的BSA、50μg/mL的庆大霉素及50μg/mL的头孢霉素，在体外培养牛胚胎到第96h后，添加体积分数5％的KSR；利用上述培养液进行牛体细胞克隆胚及体外受精胚体外培养，结果显示囊胚发育率和质量均显著高于对照组，运用本发明可以高效率的获得牛体细胞克隆胚胎或体外受精胚胎。

公开(公告)号：CN215440490U

公开(公告)日：2022-01-07

申请号：CN202121683189.0

申请日：2021-07-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 刘欣 ,  张景程 ,  王德宝 ,  张和煦 ,  孙羽

IPC: C12M3/00 ,  C12M1/22

Abstract: 本实用新型公开了一种胚胎操作及培养皿，包括皿底，所述皿底的内部设置有培养皿；橡皮圈槽，其安装于所述皿底的外部一侧四周；橡皮挤压孔，其设置于所述皿底的下方；皿盖，其固定于所述橡皮挤压孔的下方；皿盖包括：凸起圈，其设置于所述皿盖的外部；凹槽圈，其开设于所述凸起圈的内部。该胚胎操作及培养皿，将半圆结构的培养皿固定连接在皿底的内部，在胚胎操作、改变培养常见培养皿，在使用过程中，采用半圆结构的培养皿，在用捡卵针操作胚胎过程中；可使过少的液体能够覆盖培养皿底，在胚胎数量少的情况下，能够节约培养液或者操作液，满足操作过程液体少，多取卵的实验，如孤雌激活，能很好的满足。