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公开(公告)号：CN105018510A
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201510389502.2
申请日：2015-07-06
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为，在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时，通过基因工程手段，在口蹄疫蛋白的C端增加His6-MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性；所述His6表示6个组氨酸标签，MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比，表达量有较为明显提高，同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白（MBP），所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显，因而具有较好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104774935A
公开(公告)日：2015-07-15
申请号：CN201510154093.8
申请日：2015-04-02
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测TLR2/4介导的NF-κB信号通路中关键分子含量的特异性引物，序列如下：用于对TLR2进行定量PCR的特异性引物，序列如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2所示，该序列与猪TLR2mRNA的一段互补。本发明的有益效果是：TLR2/4介导的MyD88依赖型NF-κB信号通路中关键分子的差异表达在抗病毒的研究中有着至关重要的作用，对病毒性疾病的防治具有重要意义。通过本发明设计，各种引物的反应温度都进行了标准化，片段长度也进行了标准化，所有的mRNA定量均可以在相同条件下完成，使不同的实验间具有可比性。
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公开(公告)号：CN104293832A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410525855.6
申请日：2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种细胞永生化过程中所使用的真核重组微环表达载体Minicircle-MRPS18及其制备方法。该载体由微环质粒与猪的MRPS18基因重组构建，其碱基序列如序列表所示。该载体通过Tubofect试剂转染法转染Hela细胞可制备永生化细胞。本发明特异性的结合了Minicircle质粒载体与MRPS18基因的优点，所制备的真核重组微环表达载体，具有转基因持续表达时间长；不会引起真核细胞的应激非病毒式诱导系统，低免疫源性，安全稳定的优点；且该质粒表达载体表达GFP，便于跟踪反应；同时具备转染效率高、简单易用等优点，可以获得较好的永生化细胞制备效果。
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公开(公告)号：CN104099332A
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201410204418.4
申请日：2014-05-12
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用，其核苷酸序列如SEQ：ID：1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明提供寡核苷酸引物序列、克隆载体、表达载体、转化的宿主、外源蛋白表达的方法。这些为进一步开展猪akirin2基因在猪的肌卫星细胞及其他相关细胞中调控的研究提供了基础，同时可用于哺乳动物细胞中进行外源蛋白的表达及转基因研究。
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公开(公告)号：CN102702039A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210146445.1
申请日：2012-05-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07C309/15 , C07C303/22
CPC classification number: Y02P20/55
Abstract: 本发明提供了一种合成β-丙氨酰-牛磺酸的工艺，包括以下步骤：1)邻苯二甲酰基-β-丙氨酸(Pht-β-Ala)的合成2)邻苯二甲酰基-β-丙氨酰-牛磺酸(Pht-β-Ala-Tau)的合成；3)β-丙氨酰-牛磺酸(β-Ala-Tau)的合成；将步骤2)得到的产物用水合肼室温放置2天脱除N-Pht-β-Ala-Tau的保护基，得到β-Ala-Tau。本发明工艺中用到的混合酸酐法反应迅速、操作简单、耗费时间相对缩短，所用试剂都能容易买到而且价格也较低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101210922B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN200610128489.6
申请日：2006-12-29
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N21/27
Abstract: 胶体金标记蛋白A检测与SPA的FC片断相结合的哺乳动物血清中IgG总量的方法，包含下列步骤：1)对每一批制备金探针和微量反应板建立标准曲线算出回归方程：(1)设8个标准孔，每孔各加入50uL0.01M pH＝7.4 TBS溶液(含0.1％小牛血清)。(2)加样：从第七孔中吸出50uL弃去，使之体积均为50uL，第八孔为空白对照；(3)在反应孔中加入稀释2-6倍50uL金探针，(4)将反应板充分混匀后置室温下作用20-40分钟。(5)用酶标仪在620nm处测每孔吸光度值；(6)将标准IgG引起的吸光度值的变化量取常用对数；2)样品测定，包含下列步骤：(1)在样品孔中，加入50uL样品溶液。(2)在样品孔中加入50uL稀释的金探针，(3)将反应板充分混匀后置室温下作用20-40分钟。(4)用酶标仪在620nm处测每孔吸光度值，根据标准曲线回归方程算出相应的IgG量。
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公开(公告)号：CN101874739B
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN200910309775.6
申请日：2009-11-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61B5/15
Abstract: 本发明涉及一种血管瘘，包括外管，外管内设置有隔离塞，隔离塞将外管分隔为前后两个腔，前腔为入血控制腔，入血控制腔上设置有入血孔，入血控制腔的外壁设置有防脱弹性球囊，外管段上还止退穿装有止退套托，外管的后腔内穿设有防脱控制管、阀控管和采血管，防脱控制管一端与防脱弹性球囊连通、另一端悬伸于外管外且连通有防脱控制阀囊；阀控管一端位于入血控制腔另一端悬伸于外管外，阀控管位于入血控制腔内的端部连通有弹性管，阀控管的另一端连通有采血通断控制阀囊，弹性管正对入血孔；采血管的一端与入血控制腔连通另一端悬伸于外管的后腔外，采血管悬伸于外管外的端部设置有通断控制阀；采血通断控制阀囊及防脱控制阀囊内均有收涨控制液。
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公开(公告)号：CN116790643A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310397789.8
申请日：2023-04-14
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，尤其涉及编码突变体的核酸分子、重组蛋白及其应用。本发明提供了编码突变体的核酸分子，所述突变体包括单突变体、三突变体和/或多突变体中的一种或多种；编码所述单突变体的核酸分子经编码野生型TEV蛋白酶突变获得；编码所述三突变体的核酸分子经编码所述单突变体的核酸分子突变获得；编码所述多突变体的核酸分子经编码所述三突变体的核酸分子突变获得。本发明筛选到一条高表达TEVP的基因序列：31C‑3MP‑S219V，可极大地提高TEVP在原核细胞中的表达量，为TEV蛋白酶的高效表达和生产提供了一种经济、操作简单的方法。
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公开(公告)号：CN106834324B
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201710038807.8
申请日：2017-01-19
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP（Pyr）为原核表达载体，在pET21b的基础上双酶切后，重组连接有HE‑MBP（Pyr）‑TEV序列；具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP（Pyr）‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用，可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体，可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度，在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。
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