一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体

    公开(公告)号:CN106834324A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710038807.8

    申请日:2017-01-19

    Abstract: 本申请属于基因工程技术领域,具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP(Pyr)为原核表达载体,在pET21b的基础上双酶切后,重组连接有HE‑MBP(Pyr)‑TEV 序列;具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP(Pyr)‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用,可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体,可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度,在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。

    一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段

    公开(公告)号:CN104531699B

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201410525824.0

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段。所述UCOE调控元件片段的碱基序列如序列表所示。该调控元件片段在外源蛋白表达的方面,通过构建重组质粒表达载体pCpG-Mini-GFP-UCOE,转染HEK293T细胞,可以增强GFP表达。本发明以人的1.5kbUCOE片段作为对照,利用酶切方法和RT-PCR方法将猪UCOE片段分割成不同长度的片段,构建不同表达载体,转染HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测报告基因GFP的相对表达量筛选出最佳的能够增强外源基因表达的UCOE片段序列,即本发明所请求保护的基因序列。

    一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体

    公开(公告)号:CN106834324B

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN201710038807.8

    申请日:2017-01-19

    Abstract: 本申请属于基因工程技术领域,具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP(Pyr)为原核表达载体,在pET21b的基础上双酶切后,重组连接有HE‑MBP(Pyr)‑TEV序列;具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP(Pyr)‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用,可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体,可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度,在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。

    一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法

    公开(公告)号:CN105018510B

    公开(公告)日:2019-03-15

    申请号:CN201510389502.2

    申请日:2015-07-06

    Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域,具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为,在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时,通过基因工程手段,在口蹄疫蛋白的C端增加His6‑MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性;所述His6表示6个组氨酸标签,MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比,表达量有较为明显提高,同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白(MBP),所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显,因而具有较好的推广应用价值。

    一种用于DisA表达的pEX-MBP重组质粒

    公开(公告)号:CN104293822A

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201410525823.6

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,涉及一种DisA表达过程中所使用的重组质粒pEX-MBP及其制备。所述pEX-MBP重组质粒的碱基序列如序列表所示。该重组质粒是在pBbB3a-GFP的基础上改造而成的。将该重组质粒用于制备可溶性的DisA蛋白时,以丙酸钠作为诱导剂。本发明所提供的pEX-MBP重组质粒,特异性的用于DisA蛋白的表达纯化,与传统的pET28α(+)载体所构建的重组质粒表达体相比,所表达的DisA蛋白可溶度较高;其次所构建的表达系统以丙酸钠作为诱导剂,成本低廉,而且对细菌没有毒性,因而适于表达DisA蛋白,且表达后的蛋白可特异性的切除相关标签蛋白,获得的DisA蛋白纯度较高。

    粪尿自分离代谢笼
    17.
    实用新型

    公开(公告)号:CN201563470U

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN200920314804.3

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本实用新型涉及一种粪尿自分离代谢笼,包括笼体,笼体的底部为漏粪板,所述漏粪板的下方对应设置有向下倾斜的集尿盘,该集尿盘向下倾斜的末端设置有出尿口,所述集尿盘的上方对应设置有滤网槽。本实用新型的粪尿自分离代谢笼在使用时,将实验用动物圈养于该代谢笼内,动物的代谢物抓粪便及尿液从笼体底部的漏粪板直接落到滤网槽上,粪便经倾斜的滤网槽向下滚落,并最终落入收粪槽内,而尿液通过滤网槽落入集尿盘内,并向下流淌进入集尿沟后经出尿口流入收尿容器内。这样就很容易地对动物的排泄物进行分类收集取样,而不会对动物造成任何的影响,适用于所有个体大小及性别的羊,大大降低了劳动强度。

    一种组织采样器
    18.
    实用新型

    公开(公告)号:CN204789014U

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201520447041.5

    申请日:2015-06-26

    Abstract: 本实用新型提供一种组织采样器,包括沿前后方向延伸的针芯采样组件,针芯采样组件具有设置于前端的采样部,组织采样器还包括用于随采样部一同进入采样体中的观察定位装置,观察定位装置包括用于照射采样体的待采集区域的照明装置和用于采集所述待采集区域图像的摄像头,所述组织采样器还包括用于显示摄像头采集图像以供使用者观察的显示屏。在进行活体采样时,观察定位装置随针芯采样组件一同进入采样体中,照明装置打开,摄像头采集图像传输至显示屏上,以供使用者确认采样位置。由于在采样时可利用摄像头确保采样目标位置和深度,这样可以避免出现错采和漏采的问题,进而可以提高采样正确性。

    一种老鼠实验固定装置
    19.
    实用新型

    公开(公告)号:CN202458771U

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201220065300.4

    申请日:2012-02-27

    Abstract: 本实用新型涉及一种老鼠实验固定装置,该装置包括底板,底板上对称设有用以固定老鼠四肢的卡扣;所述底板的端部垂直设有平行的第一立板和第二立板,第一立板与第二立板之间留有间隙,两个立板的端部之间设有轴和活动板,活动板与轴转动连接;第一立板和第二立板中部均设有用以固定老鼠颈部的下卡口,活动板中部设有与下卡口相对应的上卡口。该装置结构设计合理,使老鼠的头和躯干暴露于外部且不能随意扭动,便于实验操作,适用性强。

    组织采样器
    20.
    实用新型

    公开(公告)号:CN202027618U

    公开(公告)日:2011-11-09

    申请号:CN201120091707.X

    申请日:2011-03-31

    Abstract: 本实用新型涉及一种组织采样器,包括针芯及其外套设的针管,所述的针芯包括针头、组织取样段和拉杆,所述的针头、组织取样段和拉杆依次同轴连接,所述的组织取样段的外周面上开设有用于组织取样的凹槽,所述的针管临近针头一端的环形端面上沿针管长度延伸方向设置有刀刃,所述的刀刃上设有用于组织切割的工作段,所述的工作段的刀刃的延长线或刀刃延长线的切线与所述凹槽的槽沿间有夹角,且夹角不为0°,本实用新型通过斜刃剪切原理解决了现有组织采样器采样效果不理想的问题。

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