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公开(公告)号：CN105543156A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610119758.6
申请日：2016-03-02
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/1217 , C12N9/0006 , C12N9/1205 , C12P13/08 , C12Y101/01 , C12Y101/01003 , C12Y207/01039 , C12Y207/02004
Abstract: 本发明涉及微生物领域，特别涉及重组菌株及其制备方法、用途。本发明以野生型W3110为出发菌株，在其基因组上进行相关改造，无工程质粒负担，对苏氨酸代谢路径中关键基因进行相应的过表达或失活，如强化thrA*BC、敲除tdh，其中thrA*BC的过表达增强了L-苏氨酸生物合成途径，tdh的敲除阻断了L-苏氨酸降解产物甘氨酸的形成。实验结果表明，W3110菌株发酵不产苏氨酸，MHZ-0213-3菌株产苏氨酸为4.2g/L、转化率约8.9％。本发明所述新型大肠杆菌，无质粒负担，构建方法简便且L-苏氨酸产量高于对照菌株，表明其可以应用于L-苏氨酸发酵及后续研究。
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公开(公告)号：CN109423504B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN201710735581.7
申请日：2017-08-24
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及生产L‑色氨酸的菌株及其在发酵中的用途。具体而言，本发明利用基因工程方法减弱或阻断工程菌(例如大肠杆菌或谷氨酸棒状杆菌)的磷酸戊糖途径的氧化阶段，大幅提高菌株产L‑色氨酸的能力。
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公开(公告)号：CN106754807B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201611248621.7
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及生产L‑亮氨酸菌株和生产L‑亮氨酸的方法。本发明以紫外线和亚硝基胍对谷氨酸棒杆菌进行诱变，获得了两个有利于L‑亮氨酸产生的关键突变leuAG561D和ilvBG235S，研究表明，leuAG561D和/或ilvBG235S突变条件下，L‑亮氨酸的合成途径中的反馈抑制被解除，L‑亮氨酸的产量得到大幅提高，获得了能够大量产生L‑亮氨酸的菌株，保藏编号为CGMCC NO.13408，该菌株能够实现发酵过程中L‑亮氨酸的高效积累，L‑亮氨酸可达4.7g/L。
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公开(公告)号：CN109423504A
公开(公告)日：2019-03-05
申请号：CN201710735581.7
申请日：2017-08-24
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及生产L-色氨酸的菌株及其在发酵中的用途。具体而言，本发明利用基因工程方法减弱或阻断工程菌(例如大肠杆菌或谷氨酸棒状杆菌)的磷酸戊糖途径的氧化阶段，大幅提高菌株产L-色氨酸的能力。
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公开(公告)号：CN106635945A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611250306.8
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，特别涉及重组菌株及其制备方法和生产L‑苏氨酸的方法。该重组菌株以大肠杆菌为出发菌株进行改造，其改造包括：强化pntAB基因和异源引入pyc基因。本发明得到重组菌株经发酵培养，产苏氨酸的量可达12.4g/L，糖酸转化率可达16.2％，且在发酵培养过程中无副产物乙酸形成。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106591209A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611248603.9
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
CPC classification number: C12N9/0036 , C07K14/245 , C12N15/70 , C12N2810/10 , C12P13/08 , C12Y106/01001
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，特别涉及重组菌株及其制备方法和生产L‑苏氨酸的方法。该重组菌株以大肠杆菌为出发菌株进行改造，其改造包括：强化pntAB基因和敲除iclR基因。本发明重组菌株经发酵培养，产苏氨酸的量可达15.3g/L，糖酸转化率可达18.5％，无质粒负担，构建方法简便。
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公开(公告)号：CN107227283B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201710385500.5
申请日：2017-05-26
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及一种谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。本发明所述谷氨酸棒杆菌其细胞内编码6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的gnd基因的第361位丝氨酸突变为苯丙氨酸。本发明所述谷氨酸棒杆菌对戊糖磷酸途径中的gnd基因进行点突变，使得6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的第361位的丝氨酸被苯丙氨酸替代，而减弱6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的变构调节，从而增强NADPH再生能力，为脯氨酸合成提供充足的NADPH，进而提高脯氨酸的产量。实验表明本发明所述谷氨酸棒杆菌为L‑脯氨酸高产菌株，能有效积累L‑脯氨酸，提高L‑脯氨酸的产量，为L‑脯氨酸的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105695383B
公开(公告)日：2020-06-19
申请号：CN201610119402.2
申请日：2016-03-02
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及微生物领域，特别涉及重组菌株及其应用。实验结果表明，野生型谷氨酸棒杆菌ATCC 13869在未经改造前基本不产谷氨酸，本发明提供的菌株MHZ‑0112‑1谷氨酸的产量为4.7g/L；MHZ‑0112‑2谷氨酸的产量为18.5g/L；菌株MHZ‑0112‑4和MHZ‑0112‑5谷氨酸的产量分别为23.4g/L和26.4g/L。在单独利用强启动子Psod表达gdh基因，谷氨酸产量提高约1.8倍，单独利用Ptuf启动子表达gltA基因将CS酶活增加了4倍，谷氨酸产量提高至30.8g/L；将两个基因同时进行过表达后，谷氨酸产量继续提高至35.5g/L，转化率达到约59％。
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公开(公告)号：CN106635945B
公开(公告)日：2020-05-26
申请号：CN201611250306.8
申请日：2016-12-29
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，特别涉及重组菌株及其制备方法和生产L‑苏氨酸的方法。该重组菌株以大肠杆菌为出发菌株进行改造，其改造包括：强化pntAB基因和异源引入pyc基因。本发明得到重组菌株经发酵培养，产苏氨酸的量可达12.4g/L，糖酸转化率可达16.2％，且在发酵培养过程中无副产物乙酸形成。
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公开(公告)号：CN107227283A
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201710385500.5
申请日：2017-05-26
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及一种谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。本发明所述谷氨酸棒杆菌其细胞内编码6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的gnd基因的第361位丝氨酸突变为苯丙氨酸。本发明所述谷氨酸棒杆菌对戊糖磷酸途径中的gnd基因进行点突变，使得6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的第361位的丝氨酸被苯丙氨酸替代，而减弱6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的变构调节，从而增强NADPH再生能力，为脯氨酸合成提供充足的NADPH，进而提高脯氨酸的产量。实验表明本发明所述谷氨酸棒杆菌为L‑脯氨酸高产菌株，能有效积累L‑脯氨酸，提高L‑脯氨酸的产量，为L‑脯氨酸的工业化生产奠定了基础。
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