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公开(公告)号:CN110257406B
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN201910543766.7
申请日:2019-06-21
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域,公开了密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因及其应用。所述密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明提供的密码子植物化改造的Plant Nme2Cas9基因是以模式作物水稻密码子为基础改造获得的,即在维持编码氨基酸序列不变的前提下,利用发明人从与水稻基因相关密码子中所筛选出的密码子替换原有密码子,得到植物化改造的Plant Nme2Cas9基因,再经过化学合成而来。采用本发明的基因可以明显提高剪切效率。
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公开(公告)号:CN110878305B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN201911249683.3
申请日:2019-12-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种单碱基编辑系统OsSpCas9‑eCDA及其应用和育种方法。本发明通过大量的实验,尝试采用不同的方式对SpCas9‑ABE进行改造,终于成功获得了一个高单碱基编辑效率、宽窗口的CP1249‑OsSpCas9‑eABE编辑器。并且本发明还提供了包含该CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因的表达盒和一种表达载体,以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因构建植物表达载体,进而构建水稻打靶载体,导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换,特别是实现由A/T碱基突变成C/G。利用该编辑器进行水稻基因编辑,可以编辑更多的突变体,获得更多的随机突变或者得到突变更多的突变体库。
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公开(公告)号:CN111763672B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202010618772.7
申请日:2020-06-30
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种植物低温诱导表达启动子Poscold10及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子。具体而言,本发明将上述启动子应用在植物基因工程中。本发明提供的启动子能够特异地驱动外源基因在低温条件下在植物中高强度表达。通过将本发明的启动子连接到待表达的基因并利用载体转入到植物植株中,能够在低温条件下驱动外源基因在植物的各个部位中表达。
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公开(公告)号:CN110283838B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN201910569244.4
申请日:2019-06-27
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种高剪切效率ScCas9基因及其应用。所述高剪切效率ScCas9基因具有SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。本发明提供的高剪切效率ScCas9基因可以明显提高剪切效率。本发明还提供了基于高剪切效率ScCas9基因的表达盒。并且,本发明将高剪切效率ScCas9基因连接到表达载体中形成重组表达载体。本发明的载体为PUC57‑AMP或pHUN400。此外,本发明利用所述高剪切效率ScCas9基因获得了转基因突变体。
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公开(公告)号:CN108795942B
公开(公告)日:2021-12-31
申请号:CN201810716882.X
申请日:2018-07-03
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种水稻外因胁迫诱导表达启动子Psubs3及其应用。该诱导表达启动子序列如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列,本发明还提供了另一种外因诱导表达启动子,其序列如SEQ ID No:2所示。具体而言,本发明将上述启动子应用在植物转基因工程中。本发明提供的启动子可以在水淹或多盐环境下,启动外源基因在植物中表达,适用于任何植物,尤其能够驱动外源基因在水稻植株中诱导表达,因此可以用于提高和改善水稻在水淹环境下的生长特性,从而培育出理想的水稻品种。
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公开(公告)号:CN113151314A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110506569.5
申请日:2021-05-10
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物抗除草剂ACCase突变型基因,所述植物ACCase基因为野生型ACCase基因发生以下两种突变:第5779、第5780位点核苷酸发生突变,分别由C变成T、C变成A,或者第5779、第5780、第5781位点核苷酸发生突变,分别由C变成T、C变成A、T变成C。本申请的发明人发现了几种突变型基因,其对应的植株该突变体植株具有对乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂的抗(耐)性,并且,本申请的发明人将其应用到水稻中,证实了其具有非常良好的除草剂的抗(耐)性。
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公开(公告)号:CN112553246A
公开(公告)日:2021-03-26
申请号:CN202011444975.5
申请日:2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR‑SaCas9系统的高效基因组编辑载体及其应用,属于植物基因工程领域。本发明还提供了将其导入水稻细胞的方法。本发明的高效基因组编辑载体包括第一表达盒和任选的第二表达盒,所述的第一表达盒为sgRNA表达盒,第二表达盒为SaCas9‑NLS融合蛋白表达盒。利用本发明的基因编辑载体,可以在预定的水稻基因组位点,简便而高效地进行基因突变。
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公开(公告)号:CN112538492A
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN202011474234.1
申请日:2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种识别PAM序列为NRTH的SpCas9n变体及相应碱基编辑系统。本发明的SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统入生物体或生物细胞内,使所述SpCas9n变体、sgRNA和ABE的编码基因均得到表达,实现基因组靶点序列的编辑;所述sgRNA靶向所述靶点序列;所述靶点序列的PAM序列为NRTH,N为A、T、C或G;R为A或T;H为A,T或C。本发明利用SpCas9n变体融合ABE的碱基编辑系统在水稻中实现了更多的靶点序列中由A:T到G:C的替换,如PAM序列为NRTH的靶点序列,扩展了ABE介导的碱基替换系统的编辑范围,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN112430613A
公开(公告)日:2021-03-02
申请号:CN202011443163.9
申请日:2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种SpG基因及其应用。本发明在OsSpCas9的基础上突变6个氨基酸获得SpG基因。并且本发明提供一种表达盒和一种表达载体,以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用突变的SpG基因构建植物表达载体,进而构建水稻打靶载体,导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切。本发明实现了水稻基因打靶,这是因为经突变后的SpG适用于水稻的基因组剪切。
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公开(公告)号:CN112430612A
公开(公告)日:2021-03-02
申请号:CN202011443150.1
申请日:2020-12-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种SpRY基因及其应用。本发明在OsSpCas9的基础上突变11个氨基酸获得SpRY基因。并且本发明提供一种表达盒和一种表达载体,以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用突变的SpRY基因构建植物表达载体,进而构建水稻打靶载体,导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切。本发明实现了水稻基因打靶,这是因为经突变后的SpRY适用于水稻的基因组剪切。
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