牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法

    公开(公告)号:CN111057132B

    公开(公告)日:2022-01-07

    申请号:CN201910981684.0

    申请日:2019-10-16

    Abstract: 本发明提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。制备方法包括以下步骤:S1、从NCBI GenBank中获取BVDV NADL全基因组序列,从中找出BVDV E0基因序列;S2、对步骤S1得到的E0基因序列进行优化与合成;S3、选择带有MBP标签原核表达载体pMal‑c5X,将E0基因与pMal‑c5X进行连接,将E0片段插入pMal‑c5X;然后将连接好的表达载体pMAL‑c5x‑E0转化进表达宿主菌BL21(DE3),并诱导表达重组蛋白,分离纯化目的蛋白。本发明通过优化目的基因E0,并与MBP标签蛋白融合表达,最终达到E0蛋白的高效可溶性表达,具有表达产量高、可溶性好、表达蛋白提纯方便等优点,当外源蛋白与MBP融合表达时更能提高大肠杆菌表达蛋白的可溶性,这为表达蛋白的纯化提供了便利。

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