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公开(公告)号:CN116855633B
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202311066938.9
申请日:2023-08-23
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于疫病检测领域,具体涉及一种同时检测疣状毛癣菌、犬小孢子茵和须毛癣菌的多重PCR检测方法与试剂盒。本发明的设计三对特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立了一种可同时快速检测这3种真菌的多重PCR,具有检测时间短,成本低,检测结果特异性高,结果易判读,实用性强,可同时对牛源浅表真菌病原作出快速诊断与鉴别。
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公开(公告)号:CN111057132B
公开(公告)日:2022-01-07
申请号:CN201910981684.0
申请日:2019-10-16
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。制备方法包括以下步骤:S1、从NCBI GenBank中获取BVDV NADL全基因组序列,从中找出BVDV E0基因序列;S2、对步骤S1得到的E0基因序列进行优化与合成;S3、选择带有MBP标签原核表达载体pMal‑c5X,将E0基因与pMal‑c5X进行连接,将E0片段插入pMal‑c5X;然后将连接好的表达载体pMAL‑c5x‑E0转化进表达宿主菌BL21(DE3),并诱导表达重组蛋白,分离纯化目的蛋白。本发明通过优化目的基因E0,并与MBP标签蛋白融合表达,最终达到E0蛋白的高效可溶性表达,具有表达产量高、可溶性好、表达蛋白提纯方便等优点,当外源蛋白与MBP融合表达时更能提高大肠杆菌表达蛋白的可溶性,这为表达蛋白的纯化提供了便利。
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公开(公告)号:CN110184371B
公开(公告)日:2021-10-01
申请号:CN201910637631.7
申请日:2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测皮特不动杆菌的特异性引物及其方法和应用,所述的特异性引物如SEQ ID NO.1~2所示,通过提取待测样品基因组DNA,使用上述引物进行PCR扩增,凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在485bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有皮特不动杆菌。采用本发明的检测方法检测皮特不动杆菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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公开(公告)号:CN110184372A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910637634.0
申请日:2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测牛源肺炎克雷伯菌特异性引物及其方法和应用,所述的特异性引物如SEQ ID NO.1~2所示,通过提取待测样品基因组DNA,使用上述引物进行PCR扩增,凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在204bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有肺炎克雷伯菌。采用本发明的检测方法检测肺炎克雷伯菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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公开(公告)号:CN110184371A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910637631.7
申请日:2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测皮特不动杆菌的特异性引物及其方法和应用,所述的特异性引物如SEQ ID NO.1~2所示,通过提取待测样品基因组DNA,使用上述引物进行PCR扩增,凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在485bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有皮特不动杆菌。采用本发明的检测方法检测皮特不动杆菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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公开(公告)号:CN110184368A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910637080.4
申请日:2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测towneri不动杆菌的特异性引物及方法和应用,所述的特异性引物如SEQ ID NO.1~2所示,通过提取待测样品基因组DNA,使用上述引物进行PCR扩增,凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在401bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有towneri不动杆菌。采用本发明的检测方法检测towneri不动杆菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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