鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102552893B

    公开(公告)日:2013-09-18

    申请号:CN201110439688.X

    申请日:2011-12-26

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种鸡球虫ADF重组卡介苗,同时还提供了该疫苗的的制备方法,获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,提取RNA,反转录成cDNA,根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR,与PMD-18T载体连接进行克隆,测序鉴定正确后,酶切回收目的片段,再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连,连接正确的重组质粒转化到BCG中,经抗性筛选和PCR鉴定,获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。该活载体疫苗稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验.免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

    一种微小隐孢子虫免疫胶体金检测试纸条及其制备方法

    公开(公告)号:CN102183653A

    公开(公告)日:2011-09-14

    申请号:CN201110067042.3

    申请日:2011-03-21

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供一种微小隐孢子虫免疫胶体金检测试纸条及其制备方法,它包含硝酸纤维素膜及其两端的金标垫和吸收垫,金标垫上端为样品垫,金标垫包被有纯化的CSpV-S蛋白单克隆抗体胶体金偶联标记物,检测线包被有纯化的单克隆抗体,质控线包被有羊抗鼠IgG抗体,质控线侧贴有吸收垫。本研究将酶联免疫原理和胶体金层析技术结合,制备检测C.parvum的胶体金试纸条,并拟应用于临床,提高C.parvum的防治能力,具有操作简单快速、检测结果清楚易于判断、特异性强、敏感性高、无须仪器设备或只需简单的仪器等优点,因此非常适于发病现场、门诊以及实验条件不具备的场所等临床样品检测使用。

    隐孢子虫属及微小隐孢子虫种特异PCR检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN101353690B

    公开(公告)日:2011-06-01

    申请号:CN200810050956.7

    申请日:2008-07-11

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明提供一种隐孢子虫属及微小隐孢子虫种特异PCR检测试剂盒,包括DNA裂解液、PCR反应液、隐孢子虫属和微小隐孢子虫种特异性引物及阳性对照微小隐孢子虫基因组DNA,利用PCR的特异性检测方法,根据分析属特异及种特异的诊断序列设计属和种特异引物,通过优化扩增条件来提高其敏感性,电泳分析直接观察扩增结果。本发明试剂盒设计严谨,简单易操作,灵敏性高,特异性强,能同时鉴定属特异和种特异隐孢子虫感染,结果判定准确客观。

    一种外源基因在球虫类原虫——隐孢子虫体内表达的转染系统

    公开(公告)号:CN101235371A

    公开(公告)日:2008-08-06

    申请号:CN200710056372.6

    申请日:2007-11-30

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种以球虫类原虫——隐孢子虫病毒为转染载体和以DNA为转染载体的转染系统。利用隐孢子虫病毒RNA或含隐孢子虫的基因启动子的DNA作转染载体,在隐孢子虫体内进行外源基因的表达。包括用以隐孢子虫病毒RNA为载体和以DNA为载体的转染系统。球虫类原虫--隐孢子虫病毒基因组小、稳定、感染率高,每个细胞可达5×103,而且隐孢子虫为真核生物,外源基因在隐孢子虫体内表达出的蛋白具有活性。该转染系统含有多克隆位点,为通用型转染载体,多种外源基因可在隐孢子虫体内表达,为研究球虫类原虫的分子生物学和细胞生物学提供了转染系统。

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