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公开(公告)号:CN105400808A
公开(公告)日:2016-03-16
申请号:CN201510603431.1
申请日:2015-09-22
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/873 , C12N15/89 , A01K67/027 , C12Q1/68
Abstract: 一种利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体,属于生物技术领域。本发明的目的是利用VASA基因的生殖特异性表达,来建立转基因猪模型的利用生殖特异性启动子表达cre的重组酶载体。本发明载体的构建方法是:①VASA转录起始位点上游序列扩增与纯化;②VASA转录起始位点上游序列测序;③VASA-Cre表达载体构建。本发明利用基因工程技术构建了一个生殖系统特异表达cre重组酶的质粒,并且重组质粒可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在。该质粒可以保证在生殖系统中特异表达cre重组酶,可以与loxp相结合,进行相关生殖系统表达基因的敲除,为cre重组酶系统的发展和相关基因的研究起到积极的推动作用。
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公开(公告)号:CN104017904B
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201410273857.0
申请日:2014-06-19
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种用于检测猪瘟病毒感染的报告细胞系,制备的猪瘟病毒感染报告细胞系含有CSFV特异识别的氨基酸序列、GFP荧光淬灭序列以及GFP蛋白。该细胞系只有在感染CSFV后才发出绿色荧光,不需要后续处理,可以在病毒感染后快速、直观地报告病毒感染情况;检测灵敏度高,而且可以一次分析多个样本。该报告细胞系既可以用于CSFV的诊断,也可以用于病毒分离培养、抗病毒药物筛选及疫苗生产,在临床检测、实验室研究上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN103497932A
公开(公告)日:2014-01-08
申请号:CN201310481480.3
申请日:2013-10-16
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12Q1/68 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种对猪圆环病毒2型(PCV2)高敏感的细胞系,同时还公开了该细胞系的制备方法,采用PCV2感染PK-15细胞后3-羟-3-甲戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAreductase,HMGCR)的表达有显著变化,且沉默HMGCR基因后,PCV2的TCID50达108.5/mL。用RNA干扰技术获得HMGCR基因沉默细胞系,并经过筛选,最终可获得对PCV2高度敏感的细胞系。用本发明制备的HMGCR基因沉默细胞培养猪圆环病毒2型,可获得较高滴度的病毒,有利于猪圆环病毒2型致病机理研究、病毒培养、全病毒灭活苗开发及工业化生产。
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公开(公告)号:CN102994581A
公开(公告)日:2013-03-27
申请号:CN201210549187.1
申请日:2012-12-06
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开了一种从野生叶点霉菌发酵液中高效提取蒽醌类物质的方法,属于生物大分子纯化技术。首先利用相似相容原理,用正丁醇萃取叶点霉发酵液,进行粗提取。然后检测特征吸收波长为291nm。粗提液减压浓缩后,以Sephadex LH-20为固定相,水为流动相进行柱层析分离,得到的层析液进一步使用250μm薄层硅胶板进行TLC纯化,展开剂为苯、乙酸乙酯、醋酸的混合液,混合比例为苯:乙酸乙酯:醋酸为75∶24∶1(V/V/V)。方法包括紫外-可见光分光光度计检测技术、层析分离纯化技术。优点是原料成本低,可用于高效提取功能因子蒽醌类物质,操作简便、提取效率高。
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公开(公告)号:CN101575644B
公开(公告)日:2012-02-01
申请号:CN200910066923.6
申请日:2009-05-08
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开一种玉米丝黑穗病菌PCR检测试剂盒及其制备方法,根据玉米丝黑穗病菌基因组设计特异扩增引物,并构建玉米丝黑穗病菌PCR检测试剂盒,并拟应用于田间检测,用本试剂盒可准确、快速地鉴定矮化型、矮化丛生型和多分蘖型等症状的玉米病苗是否由玉米丝黑穗病菌侵染所致,本试剂盒也可用于玉米丝黑穗病菌的分子鉴定。本试剂盒为玉米丝黑穗病菌的田间监测及预测预报提供依据,具有重大的社会意义和广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN101550427B
公开(公告)日:2011-09-14
申请号:CN200910066596.4
申请日:2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法,采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子,后接报告基因的打靶载体,当Cre重组酶存在的情况下,将Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因得以表达,从而用于监测Cre重组酶的活性;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞;利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性,为建立人类疾病模型提供了监测工具,解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟,克隆效率较低问题。
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公开(公告)号:CN114409741B
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN202111457334.8
申请日:2021-12-02
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种PCV2、PCV3和PCV4三联亚单位疫苗及其制备方法,包括三种重组蛋白,分别是PCV2 Cap蛋白、PCV3 Cap蛋白和PCV4 Cap蛋白,所述的PCV2 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.1、所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的,所述的PCV3 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.2所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的,所述的PCV4Cap蛋白是将如SEQ ID NO.3所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的。可用于同时防治PCV2、PCV3和PCV4感染,显著的提高了针对PCV2、PCV3和PCV4的免疫原性,免疫后动物可诱导产生高效价的抗体。
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公开(公告)号:CN113817690B
公开(公告)日:2023-01-31
申请号:CN202110918250.3
申请日:2021-08-11
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供猪圆环病毒4型制备方法及其应用,猪圆环病毒4型基因序列是在如SEQ ID NO.4所示的PCV4全基因组序列上游和下游插入调控序列得到,如SEQ ID NO.2所示的调控序列位于PCV4全基因组序列上游,如SEQ ID NO.3所示的调控序列位于PCV4全基因组序列下游。本发明首次制备得到的PCV4病毒样品,可用于PCV4感染及致病机制的研究、疫苗研发等,为PCV4感染引起的疫病提供理论依据及预防控制该疫病的有效工具,在临床、实验室研究上均具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN114409741A
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202111457334.8
申请日:2021-12-02
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及一种PCV2、PCV3和PCV4三联亚单位疫苗及其制备方法,包括三种重组蛋白,分别是PCV2 Cap蛋白、PCV3 Cap蛋白和PCV4 Cap蛋白,所述的PCV2 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.1、所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的,所述的PCV3 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.2所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的,所述的PCV4Cap蛋白是将如SEQ ID NO.3所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的。可用于同时防治PCV2、PCV3和PCV4感染,显著的提高了针对PCV2、PCV3和PCV4的免疫原性,免疫后动物可诱导产生高效价的抗体。
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公开(公告)号:CN105505881B
公开(公告)日:2019-02-19
申请号:CN201610001039.4
申请日:2016-01-05
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种猪伪狂犬病毒的抑制细胞系,可用于制备无伪狂犬病毒感染的细胞或动物模型,同时提供了相应的制备方法,制备的猪伪狂犬病毒的抑制细胞系含有Cas9核酸内切酶系统和靶向PRV的UL30基因的sgRNA。该细胞对PRV的感染具有显著的抑制作用。可用于制备无伪狂犬病毒感染的细胞或动物模型,在临床、实验室研究上具有广阔的应用前景。
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