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公开(公告)号:CN105063010A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510465185.8
申请日:2015-07-31
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种聚乙烯亚胺金属配位固定化的多酶体系及其制备方法,属于固定化酶技术领域,利用聚乙烯亚胺与金属离子配位固定甘油脱氢酶、辅酶氧化酶,以及甘油脱氢酶-辅酶氧化酶融合酶,在固定化过程中聚乙烯亚胺分子通过亚胺与金属离子的配位作用,形成网状的聚乙烯亚胺骨架,配位在聚乙烯亚胺上的金属离子与甘油脱氢酶、辅酶氧化酶的C端组氨酸标签,以及甘油脱氢酶-辅酶氧化酶融合酶的C端组氨酸标签形成配位键,获得固定化多酶体系。金属离子在固定化过程中起配位交联作用,并可提高多酶体系的催化效率。本发明的优点在于多酶耦联效率高、制备条件温和、工艺简单易行。所得固定化酶具有固定化率高,活性回收率高,能够明显提高温度稳定性、重复使用稳定性好等优点。
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公开(公告)号:CN104561161A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410803002.4
申请日:2014-12-22
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种海洋酶催化不对称还原制备手性叔亮氨酸的方法及酶,属于生物法不对称合成手性化合物技术领域。本发明筛选得到亮氨酸脱氢酶来源于柴油食烷菌(Alcanivorax dieselolei),经过菌株培养,基因克隆,构建工程菌,细胞制备,在加入氨基供体和辅助底物情况下,细胞催化三甲基丙酮酸不对称还原胺化得到产物手性叔亮氨酸。本发明确定了基于该酶所构建工程菌的全细胞催化三甲基丙酮酸不对称还原胺化的反应体系和反应条件。本发明操作方便,设备简单,在生物催化制备手性叔亮氨酸领域具有较好的工业应用前景,对于今后生物催化专用酶源的开发和手性化合物合成方法的研究具有较为重要的意义。
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公开(公告)号:CN104560779A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410696268.3
申请日:2014-11-26
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种丁酸梭菌及其应用,该丁酸梭菌于2014年9月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCCNO.9626。本发明的丁酸梭菌易于培养,具有较高的1,3-丙二醇转化率和1,3-丙二醇生产强度,而且对底物和产物具有较高的耐受性。
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公开(公告)号:CN104152384A
公开(公告)日:2014-11-19
申请号:CN201410389897.1
申请日:2014-08-08
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法,涉及手性苯丙氨酸。所述南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF-15A2,保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969。将菌种接入2216L培养基中培养,得发酵液,离心获得细胞,用缓冲液重悬、洗涤,配制成细胞液;在细胞液中,加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物,再加入辅助底物用于辅酶循环再生,反应后得到含有产物L-苯丙氨酸的反应液,离心去除沉淀,上清液加入等量的甲醇,震荡混合均匀,离心去除沉淀(蛋白质),上清液稀释后进行测定,苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测,产物L-苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定。
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公开(公告)号:CN102965323B
公开(公告)日:2014-03-12
申请号:CN201210568673.8
申请日:2012-12-24
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种生产1,3-丙二醇的菌株筛选方法与应用,涉及1,3-丙二醇。提供丁酸梭菌(Clostridium butyricum)Gen160以及利用废甘油生产1,3-丙二醇的菌株筛选方法与应用。步骤为取采集样品加入到白菜汁中,富集培养后置水浴,杀死非芽孢菌,转入梭菌增殖液体培养基,厌氧培养再置水浴,转入发酵培养基,厌氧选择性富集培养后进行高效液相色谱分析发酵产物,选取能生产1,3-丙二醇的阳性菌;采用高层琼脂柱法分离出单菌落;进行好氧和厌氧培养,除去兼性厌氧菌,得到严格厌氧菌,分析发酵产物,选取能够生产1,3-丙二醇和培养特征、菌落形态均符合丁酸梭菌培养特征的菌株进行16S rDNA序列分析鉴定。
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公开(公告)号:CN102795962A
公开(公告)日:2012-11-28
申请号:CN201210327740.7
申请日:2012-09-06
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种用阳离子树脂吸附提取发酵液中1,3-丙二醇的方法,涉及微生物发酵产品的分离方法。将1,3-丙二醇发酵液pH调至1~7,加入絮凝剂和活性炭,搅拌,静置并自然沉降;通过离心或过滤的方法除去所得的发酵液中的菌体、蛋白质以及其他不溶性固型颗粒,得到上清液;用阳离子树脂吸附所得的上清液中的1,3-丙二醇,上柱流速为0.5~2.0mL/min;树脂柱吸附饱和后,洗涤,洗脱,收集洗脱液;将所得的含有1,3-丙二醇的洗脱液减压蒸馏,获得98%~99.6%的1,3-丙二醇产品。无污染,投资少,不仅可降低1,3-丙二醇的分离成本,而且节省时间,提高生产效率。
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公开(公告)号:CN112266905B
公开(公告)日:2022-11-01
申请号:CN202011034260.2
申请日:2020-09-27
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种多肽修饰氨基酸脱氢酶及其制备和固定化方法。本发明将不同的多肽连接到野生氨基酸脱氢酶的C端或N端末尾,或者取代尾端Loop区,提高氨基酸脱氢酶的界面性能,扩展了氧化还原酶的催化效率,适合于工业化生产,具有重要应用价值。本发明的优点在于思路新颖、工艺简单、制备条件温和、实验与模拟计算相结合。
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公开(公告)号:CN114107274A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111363662.1
申请日:2021-11-17
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了羊毛固定化酶的制备方法及羊毛固定化酶柱反应器,属于固定化酶技术领域。羊毛是一种天然的柔性材料,其中角蛋白含量占据羊毛的80%以上,经过处理和表面修饰后的羊毛会暴露出许多有效的功能化基团,比如端氨基、端羧基和巯基等,且具有较好的生物相容性和机械强度,有利于酶的固定化。柱反应器在分析和生产中应用广泛,有着优异的传质性能,制备方法简单且可以重复利用,适合多种组分的分离纯化以及工业生产应用。本发明所得的羊毛固定化酶及羊毛固定化酶柱反应器有较好的催化能力和稳定性。本发明的优点在于工艺简单、制备条件温和、便于连续化生产。
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公开(公告)号:CN110607289B
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN201910820939.5
申请日:2019-08-30
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种氨基酸脱氢酶及其应用,对如SEQ ID NO.01所示的氨基酸脱氢酶进行突变而获得,上述突变包括如下至少之一:将第57位的L突变为E、第60位的G突变为S或T、将第76位的K突变为S、将第285位的Y突变为L或M、将第288位的N突变为E和将第333位的M突变为D或R。本发明通过对获得自海洋菌株Bacillus nanhaiensis的苯丙氨酸脱氢酶的分子改造,使其底物结合口袋发生了重塑,不仅可以容纳这些大位阻底物,同时拉近了底物与辅酶之间的距离,使其获得对大位阻底物的催化活性,拓展了其催化功能用于生物合成系列具有大位阻疏水侧链的非天然氨基酸。
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