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公开(公告)号：CN101665841A
公开(公告)日：2010-03-10
申请号：CN200810214354.0
申请日：2008-09-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法，包括：(1)从感染了待检测毒株的马外周血白细胞中提取DNA；(2)以该DNA为模板，以P1/P3为引物进行第一轮PCR扩增；(2)以P2/P3为引物进行第二轮PCR扩增；(3)PCR产物进行双酶切分析；如果酶切出了340bp，190bp和150bp片段，则该检测毒株为美洲流行毒株；如果仅切出了340bp片段，则该检测毒株为中国弱毒疫苗株。本发明方法可以对阿根廷代表毒株感染马和中国疫苗免疫马进行准确的区分，可以灵敏特异的检测感染马传贫病毒的马匹，能够鉴别到0.2ng细胞染色体DNA中的病毒特异性DNA片段，而且只用5-7小时就可以快速的进行区分。
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公开(公告)号：CN103898070A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410076834.0
申请日：2014-03-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种H3N8亚型马流感重组病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用。本发明的疫苗中含有由SEQ？ID？NO.1和SEQ？ID？NO.2所述核苷酸序列用昆虫/杆状病毒表达系统表达后所得的重组病毒样颗粒蛋白和药物学上可接受的载体、佐剂或赋形剂。本发明的重组病毒样颗粒与天然病毒粒子的形态结构类似，具有良好的免疫原性，由其制备得到的疫苗免疫小鼠后能够诱导小鼠产生良好的保护性免疫反应，且没有活病毒的任何危险，同时还能够区分自然感染者和免疫者，不干扰流行病学调查，因此，本发明的一种H3N8亚型马流感病毒样颗粒疫苗可以作为预防和治疗马流感的候选疫苗。
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公开(公告)号：CN103757054A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410010283.8
申请日：2014-01-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/861 , A61K48/00 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及一种重组复制缺陷型腺病毒载体马流感基因工程疫苗及其应用。本发明将所分离的马流感病毒的HA基因插入到复制缺陷型腺病毒载体中，构建了H3N8亚型马流感HA基因重组腺病毒活载体疫苗rAd-XJ3-HA。小鼠和马免疫试验结果表明，本发明rAd-XJ3-HA疫苗能够诱导所有马产生中和抗体，具有良好的免疫原性，可作为预防或治疗EI的候选疫苗。
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公开(公告)号：CN101892200B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201010139024.7
申请日：2010-03-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途。本发明分泌抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC No.3543。通过EL1SA和Western-blot方法鉴定证明：本发明单克隆抗体与马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、正常鸡胚尿囊液均无交叉反应，本发明H3N8/10的腹水ELISA效价为1∶1.6×104。本发明抗H3N8亚型的单克隆抗体可应用于马A型流感病毒的抗原性分析、血清学诊断、疫苗质量监测及流行病学调查等方面。
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公开(公告)号：CN102242082A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201110105382.0
申请日：2011-04-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了马流感病毒核蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明利用原核表达的马流感病毒(EIV)核蛋白(NP)为免疫原，细胞融合后通过有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选，获得两株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株2G11和3E10。两株单抗均能产生较高的腹水效价，Western-blot分析表明，所获得的2株单抗均能特异性识别EIV NP重组蛋白；间接免疫荧光试验证明，2株单抗能够与天然EIV结合；ELISA测定，2株单抗与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马乙型脑炎病毒均不发生交叉反应。本发明为抗EIV NP单抗的制备及后期EIV检测方法的建立提供了物质基础。
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公开(公告)号：CN101735986A
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200810177560.9
申请日：2008-11-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了分泌抗猪戊型肝炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用。其中，所述杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC.2696。经生物学特性鉴定，由该杂交瘤细胞株所分泌的针对IV型猪戊型肝炎病毒ORF2-M1蛋白的单克隆抗体，具有效价高、特异性好的特点，采用间接免疫荧光法将其作为诊断猪戊型肝炎病毒病原的试剂，检测结果具有很高的特异性和敏感性，可作为IV型猪戊型肝炎病毒的诊断试剂。
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公开(公告)号：CN101451994A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200710144764.8
申请日：2007-12-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: G01N33/531 , G01N33/561
Abstract: 一种改进型马传染性贫血琼扩抗原生产工艺，清除毒细胞培养物中的细胞、牛血清及色素；将收获的接毒细胞培养物分为细胞相病毒和液相病毒并分别进行处理；毒细胞培养物的细胞相病毒直接加入原体积份数的20％的0.01MpH7.4PBS，3次冻融裂解细胞；倒入有玻璃珠的三角瓶中，加入乙醚摇晃，然后进行机械正压鼓风除乙醚，放入冰箱冷藏室中在4℃条件下沉降2小时吸出上清，制备出无色透明的马传染性贫血病琼脂扩散反应诊断抗原，再标定其效价；最后冻干保存。本发明工艺简单、成本低廉，比现有技术提高成品率4倍，与我国现行《规程》生产马传贫琼扩抗原液在外观性状和抗原性没有差别；比国外同类产品所产生的琼扩沉淀线更清晰、更致密而且更长，更有利于判断，即抗原性更好，可广泛用做各种马的马传贫检测抗原。
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公开(公告)号：CN101328508A
公开(公告)日：2008-12-24
申请号：CN200810132409.3
申请日：2008-07-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种诊断马流感病毒(EIV)和鉴定其亚型的多重RT－PCR方法，包括：以待检样品RNA为模板，以SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4两组核苷酸序列为多重引物进行RT－PCR反应；如果从样品中只扩增出了227bp的产物，则该样品为EIV的H7N7亚型；如果同时扩增出了227bp和595bp的产物，则该样品为EIV的H3N8亚型；如果未扩增出227bp的产物，则该样品不含有EIV。本发明根据RT－PCR技术原理，根据EIV只有两种HA亚型的特点，建立了多重RT－PCR检测方法，其敏感性强、特异性高，可以用于EIV的快速诊断和亚型鉴定。
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公开(公告)号：CN1218038C
公开(公告)日：2005-09-07
申请号：CN01123620.5
申请日：2001-08-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明涉及马传染性贫血病驴胎皮肤细胞弱毒疫苗株，其培育方法，以及由其制备的疫苗。由本发明的疫苗株制备的疫苗由此不仅提高了质量，大大降低了成本，生产方法简便并防止可能混入的潜在病原和其它外源致病因子，而且可更有效的控制和预防马传染性贫血病。
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公开(公告)号：CN1401768A
公开(公告)日：2003-03-12
申请号：CN01123620.5
申请日：2001-08-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明涉及马传染性贫血病驴胎皮肤细胞弱毒疫苗株，其培育方法，以及由其制备的疫苗。由本发明的疫苗株制备的疫苗由此不仅提高了质量，大大降低了成本，生产方法简便并防止可能混入的潜在病原和其它外源致病因子，而且可更有效的控制和预防马传染性贫血病。
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