公开(公告)号：CN113801868A

公开(公告)日：2021-12-17

申请号：CN202111085704.X

申请日：2021-09-16

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 李迅 ,  张佳 ,  王询 ,  王飞

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/70 ,  C12N15/60

Abstract: 本发明涉及檀香烯合酶突变酶及其在合成檀香烯中的应用。具体涉及的突变酶有SanSyn(Q527A)、SanSyn(S533A)、SanSyn(S533Q)、SanSyn(Q527A&S533A)，它们分别是将第527位的谷氨酰胺突变为丙氨酸，第533位的丝氨酸突变为丙氨酸、谷氨酰胺以及第527位的谷氨酰胺、533位的丝氨酸均突变为丙氨酸。以葡萄糖为碳源，在宿主大肠杆菌DH5α中合成α‑檀香烯的方法，主要包括构建重组质粒pETDuet‑SanSyn(Q527A)、pETDuet‑SanSyn(S533A)、pETDuet‑SanSyn(S533Q)、pETDuet‑SanSyn(Q527A&S533A)、pMVA；构建大肠杆菌重组菌株，进一步发酵培养，本发明涉及的技术方案显著提高了α‑檀香烯的产量，蛋白可溶性表达也有所提高。为进一步代谢工程改造大肠杆菌生产α‑檀香烯奠定了基础。对萜烯类合酶的改造工作提供参考。