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公开(公告)号：CN102191259A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201110090228.0
申请日：2011-04-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了荷花植物络合素合酶基因NnPCS1及其植物表达载体和构建方法。荷花植物络合素合酶基因NnPCS1，序列为SEQ ID NO.1。NnPCS1是一个新的耐重金属基因，该基因可提高植物耐重金属性。荷花植物络合素合酶基因NnPCS1的植物表达载体，由所述的荷花植物络合素合酶基因NnPCS1与植物表达载体构成。本发明NnPCS1的植物表达载体载体为首次报道，可直接用于农杆菌介导的遗传转化，创造耐重金属新种质，提高植物的耐重金属性，可用于进行植物品种改良。
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公开(公告)号：CN101451140A
公开(公告)日：2009-06-10
申请号：CN200910028638.5
申请日：2009-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种匍匐型地被菊遗传转化的方法，属于菊花分子育种领域。以菊花品种“钟山红枫”RNA为模板扩增合成DREBa基因，克隆到T－载体，双酶切获取的DREBa基因目的片段与pCAMBIA 1301连接，而后转化农杆菌，获得含有重组质粒pCAMBIA1301－DREBa的农杆菌菌液；无菌苗叶圆片用农杆菌液侵染10min，共培养3d、脱菌培养3d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入地被菊基因组DNA中。本发明首次针对匍匐型地被菊建立了其遗传转化体系，为地被菊分子育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其分子育种进程。
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公开(公告)号：CN102676545B
公开(公告)日：2013-05-29
申请号：CN201210172706.7
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及菊花‘钟山紫桂’生长素响应蛋白Aux/IAA编码基因CmIAA1表达载体构建。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmIAA1是由CmIAA1基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmIAA1基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成Aux/IAA蛋白，影响生长素信号途径，对植物生长发育产生负调控作用，抑制植物主根伸长，促使侧根增多，并抑制植物整体生长进度。
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公开(公告)号：CN102154320B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110039094.X
申请日：2011-02-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 菊花抗逆转录因子DgZFP1及其植物表达载体和构建方法及应用，本发明属于分子生物学领域。本发明所构建的表达载体pCAMBIA1301-DgZFP1是由DgZFP1基因插入到克隆载体pMD19-Tsimplevector(Takara)，经BamH (Takara)和Kpn (Takara)双酶切后连接到载体pCAMBIA1301(Invitrogen)的BamH和Kpn位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，DgZFP1基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成DgZFP1蛋白，调控下游基因的表达，提高植物耐盐性。
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公开(公告)号：CN102175554A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110007021.2
申请日：2011-01-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物栽培与育种技术领域，公开了从多个切花菊品种中筛选氮利用效率相对最高的品种的方法，该方法包括以下几个步骤：a、获取水培苗；b、砂培初筛：将水培苗分为两组，一组进行低氮处理，另一组进行正常氮处理；分别测定每个品种的筛选指标：相对干物质重、相对含氮量、相对叶绿素含量，筛选出2～6个氮利用效率较高的品种和2～6个氮利用效率较低的品种作为对照；c、营养液培养复筛：将步骤b中筛选出的品种进行营养液培养，重复筛选出1个氮利用效率相对最高品种和1个氮利用效率相对最低的品种。本方法最终筛选出的切花菊品种，为进一步对现有切花菊品种进行了改良，研究其生物学特性和生理生化机制提供材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101451140B
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN200910028638.5
申请日：2009-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种匍匐型地被菊遗传转化的方法，属于菊花分子育种领域。以菊花品种‘钟山红枫’RNA为模板扩增合成DREBa基因，克隆到T-载体，双酶切获取的DREBa基因目的片段与pCAMBIA 1301连接，而后转化农杆菌，获得含有重组质粒pCAMBIA1301-DREBa的农杆菌菌液；无菌苗叶圆片用农杆菌液侵染10min，共培养3d、脱菌培养3d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入地被菊基因组DNA中。本发明首次针对匍匐型地被菊建立了其遗传转化体系，为地被菊分子育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其分子育种进程。
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公开(公告)号：CN100574612C
公开(公告)日：2009-12-30
申请号：CN200710019345.1
申请日：2007-01-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种菊花种质资源离体保存的方法，专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体，以腋芽进行继代增殖。在分别附加了20～40mg.L-1脱落酸(ABA)的MS+0.3mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA培养基中进行保存，10个月后存活率均为100%，比正常培养基上生长的试管苗延长存活6个月。保存材料恢复生长正常，其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用在培养基中添加脱落酸保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定，不但保存10个月后植株生长正常，而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
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公开(公告)号：CN105510292A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610031066.6
申请日：2016-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种体外检测菊花胚胎败育过程中Caspase活性的方法及其应用，该方法包括：1)获得菊花远缘杂交后不同发育时期的正常与败育胚珠；2)采用TCA/丙酮沉淀法分别提取步骤1)中所取得的胚珠样品的蛋白质；3)将步骤2)中的蛋白质预处理后分别用Bradford法进行蛋白质定量，并分别调整蛋白浓度；4)用Caspase活性荧光检测方法对正常与败育胚珠的蛋白进行Caspase活性检测。本发明针对菊花远缘杂交后胚胎败育的细胞衰老和凋亡现象，提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎败育过程中诱导细胞死亡的关键Caspase酶，为研究菊花胚胎败育的分子机理，挖掘调控胚胎败育的关键基因和蛋白提供了研究基础。
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公开(公告)号：CN102860222B
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201210259784.0
申请日：2012-07-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G7/00
Abstract: 本发明公开了一种通过叶型特征鉴定菊花品种的方法，属于菊花品种资源鉴别与品种权保护领域，该方法包括：测定菊花植株不同叶位的叶型指标，确定植株叶型保守的叶位；采集菊花品种不同单株间保守的叶位的叶型指标，并将该叶型指标在不同品种间作差异显著性分析，确定在不同品种间存在显著性差异的叶型指标为特异性叶型特征指标；将多个特异性叶型特征指标通过多元判别分析法进行品种判定。本发明鉴定方法通过对品种成熟叶片特征的测定，综合品种的叶型特征指标进行类别（品种）判定，检测成本低廉，易实施，特异性强，准确度高。
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公开(公告)号：CN103472182A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310385454.0
申请日：2013-08-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N30/89
Abstract: 本发明公开了一种鉴定菊花远缘杂交胚胎败育相关蛋白的方法，属于菊花育种与蛋白质组学领域。该方法包括：以栽培小菊作母本，野菊菊花脑作父本开展远缘杂交工作。授粉后不同时间剪下已授粉的花序，分别取形态发育完整、饱满的子房和形态发育异常、不饱满的子房，取样后立即在液氮中速冻后保存于-80℃冰箱中。样品用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质，保存于-80℃。最后运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白，并进行生物信息学分析，获得与菊花远缘杂交育种中胚胎败育的相关蛋白。本发明针对菊花及其近缘属野生种，提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎发育过程中不同发育阶段的不同形态的胚胎差异蛋白，为解决菊花远缘杂交胚胎败育提供研究基础。
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