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公开(公告)号：CN109136166B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN201810759252.0
申请日：2018-07-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/04 , C07K14/415 , C07K1/30
Abstract: 本发明属于蛋白质组学技术领域，具体首次公开了一种适于双向电泳的水稻叶片质膜磷酸化蛋白的提取方法，包括水稻叶片粗质膜的提取、水稻叶片质膜的纯化及水稻叶片质膜磷酸化蛋白质的富集等步骤。本发明所述提取方法操作简单、提取效率高、成本低，所获的水稻叶片质膜纯度可达93%以上，从质膜蛋白质中富集的质膜磷酸化蛋白质得率为3.33～3.89%。该方法适合于质膜磷酸化蛋白提取困难、干扰杂质多的植物材料；同时所得质膜磷酸化蛋白杂质和干扰物较少，可满足双向电泳的要求，所获双向电泳图谱背景清晰、蛋白质点分布均匀、纵向拖尾和水平横纹现象较少，且具有良好的重复性；该方法适用于单子叶植物质膜磷酸化蛋白质组的制备与分析。
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公开(公告)号：CN113201054A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110556494.1
申请日：2021-05-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种蛋白FoUPE1在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体△Foupe1；试验证明，与Foc4相比，△Foupe1菌落生长速率下降且产孢量显著降低，对氧化胁迫耐受性下降；致病性试验表明，FoUPE1的缺失使Foc4的致病力显著降低；将该基因回补后，其致病力得到恢复。本发明证实FoUPE1是香蕉枯萎病菌分生孢子产生、应对氧化胁迫和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN110656116B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201910986242.5
申请日：2019-10-17
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因FoCWM在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明采用Split‑marker重组技术构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因FoCWM从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体ΔFocwm；该突变体与其野生型相比，生长速率减慢，气生菌丝变得致密，穿透力减弱，并对细胞壁的完整性有重要作用。致病性试验表明，FoCWM的缺失显著降低了香蕉枯萎病菌的致病力。本发明证实FoCWM是香蕉枯萎病菌生长发育、维持细胞壁完整性和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN107641599B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201710903818.8
申请日：2017-09-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种香蕉枯萎病菌培养基及其应用，所述培养基含有以下组分：葡萄糖的终浓度为10 g/L，天冬氨酸的终浓度为2～8 g/L，20×硝酸盐、200×铁盐、1000×维生素、1000×微量元素的体积分数分别为5%、0.5%、0.1%、0.1%；所述培养基的pH值为6.2～6.5。本发明提供的培养基既能促进香蕉枯萎病菌分生孢子的萌发，又能避免外源大分子蛋白质的干扰，有利于香蕉枯萎病菌分泌蛋白质的分析。
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公开(公告)号：CN117965356A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410053109.5
申请日：2024-01-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种鼠灰链霉菌GD4‑20及其在防治香蕉枯萎病中的应用。该菌株名称为鼠灰链霉菌(Streptomyces murinus)GD4‑20，保藏编号：GDMCC No：63854。发现鼠灰链霉菌GD4‑20具有广谱抑制植物病原真菌的效果，且首次聚焦于对Foc4的抑制和香蕉枯萎病的防治效果。试验表明，该菌能够破坏菌丝结构和形态，在平板上对Foc4的菌丝生长抑制率达81.4％；该菌发酵上清液也能有效抑制Foc4的菌丝生长，其抑制率达到74.1％；该菌孢子悬浮液(1×108CFU/g土)和发酵液对香蕉枯萎病的盆栽防效分别达80.5％和89.9％。该菌对开发防治香蕉枯萎病上提供了良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114196681B
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202111086213.7
申请日：2021-09-16
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种FoCupin1基因在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体，获得敲除突变体ΔFoCupin1。该突变体与野生型相比，菌落生长速率、产孢量、细胞壁完整性、抗高渗透胁迫、抗氧化胁迫、玻璃纸穿透等方面没有显著差异。致病性测定表明，FoCupin1基因的缺失导致香蕉枯萎病菌致病性显著降低；将该基因回补后，其致病性则恢复到野生型水平。qRT‑PCR分析表明，敲除突变体中镰刀菌酸5个关键合成基因中有4个基因表达量与野生型相比显著降低。本发明有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN116082473A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211183880.1
申请日：2022-09-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了蛋白MoUPE3在调控稻瘟菌致病力中的应用。本发明通过敲除稻瘟菌中编码蛋白MoUPE3的基因得到了稻瘟菌敲除突变体ΔMoUPE3，另通过回补构建得到了回补突变体ΔMoUPE3‑com。通过对稻瘟菌野生型、稻瘟菌敲除突变体ΔMoUPE3和回补突变体ΔMoUPE3‑com的菌落形态、产孢量、胁迫抗性和致病力等进行检测发现，稻瘟菌蛋白MoUPE3的编码基因可调控稻瘟菌产孢量、抗逆性和致病力，可作为靶点用于防治稻瘟病。本发明丰富了稻瘟菌的致病相关基因，同时为开发有效杀菌剂提供了靶标基因，有助于稻瘟病的防治。
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公开(公告)号：CN113201054B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110556494.1
申请日：2021-05-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种蛋白FoUPE1在调控香蕉枯萎病菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入香蕉枯萎病菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从香蕉枯萎病菌中敲除，获得敲除突变体△Foupe1；试验证明，与Foc4相比，△Foupe1菌落生长速率下降且产孢量显著降低，对氧化胁迫耐受性下降；致病性试验表明，FoUPE1的缺失使Foc4的致病力显著降低；将该基因回补后，其致病力得到恢复。本发明证实FoUPE1是香蕉枯萎病菌分生孢子产生、应对氧化胁迫和致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明香蕉枯萎病菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN113278055A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110556363.3
申请日：2021-05-21
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种分泌蛋白MoUPE2在调控稻瘟菌致病力中的应用，属于植物基因工程领域。本发明通过构建基因敲除载体，将其导入稻瘟菌原生质体；利用同源重组方法将该基因从稻瘟菌中敲除，获得敲除突变体ΔMoupe2；试验证明，相比稻瘟菌野生型，敲除突变体ΔMoupe2的分生孢子萌发和附着胞发育减缓，对细胞壁胁迫和渗透胁迫等更加敏感；致病性试验表明，MoUPE2的缺失显著降低了稻瘟菌的致病力；将该基因回补后，其致病力则恢复到野生型水平。本发明证实MoUPE2是稻瘟菌分生孢子萌发、附着胞发育，以及致病性所必需的。我们的研究有助于深入阐明稻瘟菌的致病分子机制，为开发有效杀菌剂提供了靶标基因。
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公开(公告)号：CN109371044B
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN201811269864.8
申请日：2018-10-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌基因Movan及其应用。本发明研究克隆得到稻瘟菌致病相关基因，并实验证明，将该基因从稻瘟菌中成功敲除后，所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌落生长速度缓慢，气生菌丝较稀疏，菌落颜色呈现灰白色，黑色素沉积明显低于野生型稻瘟菌；此外，突变体的产孢量明显低于野生型稻瘟菌。致病性实验表明，稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑；基因Movan的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的方法和应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。
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