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公开(公告)号：CN114164213B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202111500852.3
申请日：2021-12-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种敲除MIC3基因的重组球虫载体及其检测方法，属于基因工程技术领域。本发明提供一种靶向球虫MIC3基因的sgRNA，所述靶向球虫MIC3基因的sgRNA的靶点位于MIC3基因；由sgRNA、Cas9和同源重组质粒建立基因编辑系统，可精确地敲除球虫MIC3基因并同源重组荧光标记蛋白于MIC3基因，构建一种表达荧光标记蛋白的重组球虫载体。所述重组球虫载体的DNA经过PCR检测和测序，表明荧光标记基因已成功重组于MIC3基因，且重组球虫载体在荧光显微镜下具有明显的荧光信号，表明其已成功敲除MIC3基因并表达荧光标记蛋白。
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公开(公告)号：CN105420362B
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201510927370.4
申请日：2015-12-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及检测技术领域，具体公开了兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR检测引物和试剂盒，所述引物为Me‑F和Me‑R，其序列如SEQ ID NO：1～2所示，基于所述引物优化反应体系和反应条件，研制出一种基于荧光染料法的定量检测兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR试剂盒，试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感性高，结果判定客观。该方法可实现对兔球虫病的流行病学调查及临床诊断，为兔球虫的诊断和防治技术，临床快速而准确的检测兔球虫的感染情况提供技术支持。
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公开(公告)号：CN107132102A
公开(公告)日：2017-09-05
申请号：CN201710465973.6
申请日：2017-06-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种改进的猪寄生虫病粪检方法。先往猪粪便中加入尿素溶液，同时加入表面活性剂，搅拌混匀并过滤粗粪渣后静置，滴加除泡剂后再静置，取表层溶液进行镜检。本发明克服了传统饱和食盐水漂浮法的缺陷，通过利用尿素使蛋白质变性的原理，除去检测物中的蛋白质；再加入一定量的表面活性剂，利用表面活性剂的亲水憎油基和亲油憎水基，使粪便中的脂肪乳化成小分子脂滴，从而除去脂肪对检测的影响，同时加入除泡剂去除在使用表面活性剂时因搅拌而产生的气泡从而改善镜检视野，提高检测率；本发明操作简单、方便，检测率高，原料易得，很适合在实际临床中推广使用。
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公开(公告)号：CN102021246B
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201010570231.8
申请日：2010-12-02
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴别和检测肝片吸虫和大片吸虫的LAMP检测方法和试剂盒。本发明采用具有SEQIDNO：1～SEQIDNO：12所示序列的特异性引物分别对肝片吸虫和大片吸虫的待测模板DNA进行LAMP扩增，并对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳或者SYBRgreenI显色，并在紫外光下实现观察和鉴别。本发明建立了用于肝片吸虫和大片吸虫鉴别的快速、特异、敏感的LAMP方法，可准确地鉴定肝片吸虫和大片吸虫成虫、尾蚴、虫卵。本发明的试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感性高，结果判定客观，可用于肝片吸虫和大片吸虫的快速鉴别。
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公开(公告)号：CN101880726A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010236983.0
申请日：2010-07-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法。本发明用于检测日本血吸虫地域株的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明引物用于检测日本血吸虫地域株时，是用上述引物对待测模板DNA进行CAPS-PCR扩增，并对扩增产物进行CAPS酶切反应，将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外光下观察，阳性结果呈现未被酶切的单带，阴性结果呈现完全酶切的双带。本发明建立了用于日本血吸虫地域株鉴别的快速、特异、敏感的CAPS方法，可准确鉴定日本血吸虫地域株。含有本发明引物的试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感度高，结果判定客观，适合推广应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101230382A
公开(公告)日：2008-07-30
申请号：CN200810026296.9
申请日：2008-02-04
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于猪食道口线虫病诊断的多重PCR检测试剂盒，包括DNA裂解液；PCR反应液；有齿食道口线虫DNA阳性对照和四棘食道口线虫阳性对照。本发明应用猪有齿食道口线虫和四棘食道口线虫的ITS重复DNA片段作为遗传标记，建立了用于猪食道口线虫病诊断的快速、特异、敏感的多重PCR方法；操作简单程序化，结果判定客观，可用于猪食道口线虫病的诊断、流行病学调查及有齿食道口线虫和四棘食道口线虫的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN114164213A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111500852.3
申请日：2021-12-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种敲除MIC3基因的重组球虫载体及其检测方法，属于基因工程技术领域。本发明提供一种靶向球虫MIC3基因的sgRNA，所述靶向球虫MIC3基因的sgRNA的靶点位于MIC3基因；由sgRNA、Cas9和同源重组质粒建立基因编辑系统，可精确地敲除球虫MIC3基因并同源重组荧光标记蛋白于MIC3基因，构建一种表达荧光标记蛋白的重组球虫载体。所述重组球虫载体的DNA经过PCR检测和测序，表明荧光标记基因已成功重组于MIC3基因，且重组球虫载体在荧光显微镜下具有明显的荧光信号，表明其已成功敲除MIC3基因并表达荧光标记蛋白。
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公开(公告)号：CN106834504A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710139019.8
申请日：2017-03-09
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6893
Abstract: 本发明涉及疾病检测试剂制备技术领域，公开了一种猪弓形虫病的特异性检测引物和检测试剂盒，是将致密颗粒蛋白14（GRA14）基因作为弓形虫病诊断的靶基因，设计并筛选出一种弓形虫病的特异性检测引物GRAF‑3和GRAR‑3，GRAF‑3和GRAR‑3的序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；利用该引物检测弓形虫病，特异性强，灵敏度高，PCR的方法结果容易判定，利用该引物制成检测弓形虫病的试剂盒，可实现对弓形虫病的流行病学调查，隐形感染的检测和临床诊断，为弓形虫病的诊断和防治技术等进一步研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102021247A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN201010578687.9
申请日：2010-12-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鉴别日本血吸虫的引物、相应的试剂盒及检测方法。本发明用于鉴别日本血吸虫的上游引物序列如SEQIDNO:1所示，下游引物序列如SEQIDNO:2所示。本发明还建立了用于快速检测日本血吸虫的方法，可准确区分不同类型的血吸虫。将本发明引物制备成试剂盒，具有操作程序简单化，检测特异性强，敏感度高，结果判定客观等优点，适合推广应用。
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公开(公告)号：CN102010863A
公开(公告)日：2011-04-13
申请号：CN201010250378.9
申请日：2010-08-10
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , A61K48/00 , A61P33/10
Abstract: 本发明公开了一种猪蛔虫性别表达差异的miRNA、相应的前体、反义寡核苷酸及其应用。本发明猪蛔虫性别表达差异的miRNA的核苷酸序列如SEQ IDNO：1～3所示的任意一条序列；与本发明猪蛔虫性别表达差异的miRNA相应的前体序列如SEQ ID NO：4～6所示；与本发明猪蛔虫性别表达差异的miRNA相应的反义寡核苷酸序列如SEQ ID NO：7～9所示。本发明猪蛔虫性别表达差异的miRNA均克隆自猪蛔虫成虫，在猪蛔虫雌虫和雄虫中均有表达，但在雌虫中的表达量显著高于雄虫，可以用于制备蛔虫疫苗。
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