马红球菌致病基因VapA重组蛋白的应用

    公开(公告)号:CN104888208B

    公开(公告)日:2017-12-26

    申请号:CN201510273207.0

    申请日:2015-05-26

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了马红球菌致病基因VapA重组蛋白在制备治疗或检测马红球菌病的制剂中的应用,其特征在于,所述马红球菌致病基因VapA重组蛋白为带MBP标签的MBP‑VapA,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。该重组蛋白具有良好的免疫原性,适于临床治疗用高免血清抗体、疫苗、临床诊断试剂等生物技术产品的开发。

    马红球菌致病基因VapA重组蛋白的应用

    公开(公告)号:CN104888208A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201510273207.0

    申请日:2015-05-26

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体公开了马红球菌致病基因VapA重组蛋白在制备治疗或检测马红球菌病的制剂中的应用,其特征在于,所述马红球菌致病基因VapA重组蛋白为带MBP标签的MBP-VapA,其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示,获得的重组蛋白几乎全部以可溶表达的形式存在。该重组蛋白具有良好的免疫原性,适于临床治疗用高免血清抗体、疫苗、临床诊断试剂等生物技术产品的开发。

    一种血型抗体的间接Dot-ELISA检测方法与应用

    公开(公告)号:CN103487590B

    公开(公告)日:2015-04-08

    申请号:CN201310394101.7

    申请日:2013-09-03

    Inventor: 李守军 李华涛

    Abstract: 本发明具体公开了一种血型抗体的间接Dot-ELISA检测方法与应用。所述方法为将硝酸纤维素膜固定于96孔板上,然后直接将红细胞膜包被硝酸纤维素膜上,与待测抗体反应,通过酶标二抗形成抗原-抗体复合物。所述Dot-ELISA板可以用商业化的ELISA检测分析仪器,进而能够达到自动化操作的目的,达到节省人力,减少人为误差,和高通量检测的目的。本研究用的斑点酶联免疫吸附测定方法是间接Coombs实验的8倍以上,高灵敏度可以增加低浓度和弱亲和抗体的检测准确度,进一步改进了血型检测方法和改善输血安全。

    一种犬源单链抗体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN104017080A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410263525.4

    申请日:2014-06-13

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种犬源单链抗体及其构建方法和应用。本发明通过设计犬抗体可变区简并引物,成功扩增出犬的重链可变区VH和轻链可变区VL基因。在此基础上利用噬菌体展示技术,成功构建犬源单链抗体scFv文库。所构建的scFv单链抗体库具有多样性和足够大的库容量。本发明通过Dot-ELISA方法用犬DEA1.1血型抗原从scFv单链抗体库中筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。其中Clone16具有较强的结合特性。根据Clone16基因构建了pET-32a-Clone16重组蛋白进行原核表达,纯化得到的抗体具有结合活性。为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了坚实的基础。

    一种寡核苷酸基因芯片及其在检测多种病菌方面的应用

    公开(公告)号:CN102260738B

    公开(公告)日:2014-02-19

    申请号:CN201110142523.6

    申请日:2011-05-30

    Abstract: 本发明一种寡核苷酸基因芯片及其在检测多种病菌方面的应用。所述寡核苷酸基因芯片的探针可分别与结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、鸟分枝杆菌(M.avium)、副结核分枝杆菌(M.paratuberculosis)和布氏杆菌(Brucella)的PCR扩增产物进行杂交反应;所述探针分别具有SEQIDNO:25、SEQIDNO:31、SEQIDNO:35、SEQIDNO:37和SEQIDNO:39所示的核苷酸序列。本发明所述基因芯片应用于检测所述病菌具有良好的重复性,批间批内变异系数CV值%均小于15%。对致病菌待测样本的检测表现出了高的准确度,表明该方法特异性良好,灵敏度高,实现了高通量、平行化检测,检测结果快速、准确,从核酸制备到完成检测,整个过程仅需6~8h,在制备病原检测、进出口检疫、流行病学分析用的试剂和产品等方面具有广阔的前景。

    一种寡核苷酸基因芯片及其在检测多种病菌方面的应用

    公开(公告)号:CN102260738A

    公开(公告)日:2011-11-30

    申请号:CN201110142523.6

    申请日:2011-05-30

    Abstract: 本发明一种寡核苷酸基因芯片及其在检测多种病菌方面的应用。所述寡核苷酸基因芯片的探针可分别与结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、牛分枝杆菌(M.bovis)、鸟分枝杆菌(M.avium)、副结核分枝杆菌(M.paratuberculosis)和布氏杆菌(Brucella)的PCR扩增产物进行杂交反应;所述探针分别具有SEQIDNO:25、SEQIDNO:31、SEQIDNO:35、SEQIDNO:37和SEQIDNO:39所示的核苷酸序列。本发明所述基因芯片应用于检测所述病菌具有良好的重复性,批间批内变异系数CV值%均小于15%。对致病菌待测样本的检测表现出了高的准确度,表明该方法特异性良好,灵敏度高,实现了高通量、平行化检测,检测结果快速、准确,从核酸制备到完成检测,整个过程仅需6~8h,在制备病原检测、进出口检疫、流行病学分析用的试剂和产品等方面具有广阔的前景。

    奶牛乳房炎主要致病菌的检测基因芯片及检测方法

    公开(公告)号:CN101492739A

    公开(公告)日:2009-07-29

    申请号:CN200910036528.3

    申请日:2009-01-09

    Abstract: 本发明提供了奶牛乳房炎主要致病菌的检测基因芯片及检测方法。所述基因芯片包括固相载体和固定在固相载体上的特异性检测探针,所述特异性检测探针包含以大肠杆菌16S rDNA保守区为基底序列设计的通用引物序列之间的6种奶牛乳房炎主要致病菌的可变区域内设计的特异性寡核苷酸杂交探针;所述6种奶牛乳房炎主要致病菌为无乳链球菌、停乳链球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌、奇异变形杆菌和金黄色葡萄球菌。本发明精确限定了PCR反应的退火温度、优化了PCR扩增的核酸片段和基因芯片进行杂交的条件,获得很好的杂交效果,最终得到准确的检测结果。本发明特异性好,准确率高,稳定性可靠,检测结果假阳性率低,同时操作步骤简单,易于推广使用。

    一种猫急性应激模型的建立方法及其在诊断标记物筛查中的应用

    公开(公告)号:CN115644140B

    公开(公告)日:2023-06-02

    申请号:CN202211323088.1

    申请日:2022-10-27

    Abstract: 本发明公开了一种猫急性应激模型的建立方法及其在诊断标记物筛查中的应用,属于生物技术领域。该猫急性应激模型的建立方法是采用复合应激或束缚应激刺激实验猫,构建猫急性应激模型。本发明还公开了建立的猫急性应激模型在筛选猫应激反应诊断标志物中的应用。经比较猫急性应激模型和对照组发现,CRH、ACTH和EPI特异性高,影响因素少。并经临床验证实验,发现三种激素联合预测的AUC为0.9422,可作为猫急性应激反应的诊断指标。将以上三种激素与猫应激评分CSS结合,能够准确高效地应用于猫急性应激反应的诊断中,本发明为猫应激机制研究提供了建模手段和数据基础,同时为临床诊疗提供参考。

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