公开(公告)号：CN114524879A

公开(公告)日：2022-05-24

申请号：CN202111603075.5

申请日：2021-12-24

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 祝钦泷 ,  刘耀光 ,  谭健韬 ,  曾栋昌 ,  赵延昌

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY)，从N端到C端，依次核定位信号bpNLS，脱氨酶TadA8e，DNA单链结合域DBD，SpCas9缺刻酶变体SpRYn，以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器，本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。

公开(公告)号：CN112266420A

公开(公告)日：2021-01-26

申请号：CN202011189809.5

申请日：2020-10-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 刘耀光 ,  祝钦泷 ,  曾栋昌 ,  刘涛利

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/66 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明提供了一种植物高效胞嘧啶单碱基编辑器及其构建与应用。该编辑器包含SpCas9变体融合蛋白PeCBE‑NG，从N端到C端，依次包含1个核定位bpNLS功能元件，1个脱氨酶eCBE功能元件，1个SpCas9变体Cas9n‑NG编码序列，2个串联的尿嘧啶糖基化酶抑制蛋白UGI功能元件，以及1个核定位bpNLS功能元件。相比现有植物胞嘧啶单碱基编辑器，本发明构建的胞嘧啶单碱基编辑器具有高效、无靶序列偏好性、编辑窗口适中、自靶向sgRNA效率低、脱靶效率低、以及广靶向识别NG‑PAM的特点，将有利于植物基因功能研究和作物遗传改良的发展，在植物单碱基替换与饱和突变筛选等方面具有广泛的应用前景。