一种选育高繁殖性能种公猪的方法

    公开(公告)号:CN108835031A

    公开(公告)日:2018-11-20

    申请号:CN201810614804.9

    申请日:2018-06-14

    Abstract: 本发明公开一种选育高繁殖性能种公猪的方法。本发明主要通过采集具有一定配种生产记录(20胎以上)的种公猪的精液,利用percoll密度梯度离心法分离精子和精清,分别制备精子和精清蛋白样品;通过高通量iTRAQ技术对精子和精清样品进行蛋白定量检测,筛选与公猪繁殖性能相关的精液差异蛋白;再次验证所获精液差异蛋白与种公猪繁殖性能的相关性,并通过体外受精、蛋白表达定位等试验进而确定一批反映种公猪繁殖性能高低的精液蛋白标记;利用这些蛋白标记的相对含量来评定公猪的繁殖性能和精液的受精能力,从而筛选出高繁殖性能的种公猪。在生产上使用方便,通过检测精液蛋白标记含量即可,不会造成种公猪采样损伤和应激。

    一种评定杜洛克公猪受精能力的数学模型及其建立方法

    公开(公告)号:CN105095690B

    公开(公告)日:2018-07-10

    申请号:CN201510431777.8

    申请日:2015-07-21

    Abstract: 本发明公开了一种评定杜洛克公猪受精能力的数学模型及其建立方法,其建立方法包括步骤:对杜洛克公猪数据样本的预测变量进行数据描述;再进行系统聚类,并依据公猪精液受精能力相关的样本数据对不同受精力水平的杜洛克公猪进行划分,划分为高受精能力公猪群和低受精能力公猪群;再进行聚类后的判别分析和Logistic回归分析,生成具体的数学函数。本发明所建立的数学模型的系数及预测准确率可靠,能够提供一种适合广东省种猪场评定在役杜洛克公猪受精能力的函数模型,可作为评定杜洛克公猪受精能力的依据;对于缩小公猪间受精能力的梯度变化区间,以及准确预测公猪受精能力水平具有重要意义。

    一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法

    公开(公告)号:CN104673742B

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201510065430.6

    申请日:2015-02-06

    Abstract: 本发明公开了一种长白仔猪睾丸支持细胞永生系的建立方法,包括步骤:取长白仔猪睾丸组织,获取高比例的长白仔猪睾丸支持细胞以后,完全培养基培养1~2h后更换新鲜培养液,继续培养,最后传代至细胞形态均一的F3代的睾丸成纤维细胞;利用携带Large T和Egfp基因的慢病毒液侵染成纤维细胞,获得特征的并且表达Egfp和支持细胞标记的细胞株;使用优化的培养液培养传代超过50代以后,获得长白仔猪睾丸支持细胞永生系。本发明的长白仔猪睾丸支持细胞永生系体外传代次数已超过90代,对比市场上已建立猪睾丸传代ST细胞,本发明永生化的长白仔猪支持细胞系维持了原代的支持细胞生物学特征,更适合支持细胞的生物学性质研究,可以应用于疫苗开发和药物筛选等方面研究。

    一种评定杜洛克公猪受精能力的数学模型及其建立方法

    公开(公告)号:CN105095690A

    公开(公告)日:2015-11-25

    申请号:CN201510431777.8

    申请日:2015-07-21

    Abstract: 本发明公开了一种评定杜洛克公猪受精能力的数学模型及其建立方法,其建立方法包括步骤:对杜洛克公猪数据样本的预测变量进行数据描述;再进行系统聚类,并依据公猪精液受精能力相关的样本数据对不同受精力水平的杜洛克公猪进行划分,划分为高受精能力公猪群和低受精能力公猪群;再进行聚类后的判别分析和Logistic回归分析,生成具体的数学函数。本发明所建立的数学模型的系数及预测准确率可靠,能够提供一种适合广东省种猪场评定在役杜洛克公猪受精能力的函数模型,可作为评定杜洛克公猪受精能力的依据;对于缩小公猪间受精能力的梯度变化区间,以及准确预测公猪受精能力水平具有重要意义。

    一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法

    公开(公告)号:CN118716335B

    公开(公告)日:2024-11-29

    申请号:CN202411203811.1

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明公开了一种鸡精液冷冻组合物、冷冻方法及去甘油方法。属于精液冷冻技术领域。本发明提供了一种冷冻精液稀释液改良配方,明确了稀释液中单独添加海藻糖和L‑半胱氨酸的最适添加浓度,以及两者组合添加的适宜浓度范围,并且在优化后的稀释液中添加EGCG,极大提升冻后精子质量和保存效果。本发明使用细胞冻存管进行精液冷冻保存,精子冻后活力与用冻精细管冷冻效果无差异,精液剂量提高了6倍。本发明还提供了一种精液中甘油的去除方法,甘油去除率高,且受精率和孵化率能达到与原精液授精相当的效果。

    一种猪IZUMO2真核蛋白及其单克隆抗体的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118598971A

    公开(公告)日:2024-09-06

    申请号:CN202410870321.0

    申请日:2024-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种猪IZUMO2真核蛋白及其单克隆抗体的制备方法和应用。本发明验证了猪IZUMO2核苷酸CDS全长序列,设计了一种去除其跨膜结构,仅将其膜外序列进行真核表达纯化与单克隆抗体制备的研究方法,IZUMO2蛋白通过CHO‑K1细胞进行分泌表达,该方法表达的蛋白接近天然蛋白,具有生物学活性且操作简单。通过qPCR和ELISA试验验证了IZUMO2蛋白可以降低由LPS诱导的RAW264.7细胞中炎症因子的表达,具有一定的抗炎能力。且实验发现IZUMO2蛋白处理后能促进公猪精子获能,证明该蛋白在制备促进公猪精子获能的试剂中也能够得到应用。

    一种猪精液冷冻保存液及提高猪精液冷冻保存品质的方法

    公开(公告)号:CN118556671A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410605931.8

    申请日:2024-05-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪精液冷冻保存液及提高猪精液冷冻保存品质的方法。在优化基本冷冻保存条件的基础上,通过向猪精液稀释液中添加10~50μM MG冷冻保存,实验结果发现,20μM MG可明显改善冷冻保存的猪精液品质;同时提高猪精子的运动能力,提高精子质膜和顶体完整性、线粒体活性。MG能够通过降降低细胞氧化应激水平,从而提高生殖细胞冷冻后活力,延长精子体外保存时间;同时,冷冻解冻后精子活力与对照组相比能提高10%左右。

    一种猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法

    公开(公告)号:CN105624105B

    公开(公告)日:2020-01-21

    申请号:CN201610087719.2

    申请日:2016-02-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪睾丸间质祖细胞PLCs的长期培养方法,其中包括体外分离、检测和分化,利用猪PLCs的体外增殖培养基培养仔猪睾丸成纤维细胞5~8天后,得到PLCs克隆集落;利用猪PLCs的分化培养基进行培养后,第3天PLCs开始向成熟睾丸间质细胞分化,然而在增殖培养基中培养,在体外最长维持时间达到了6个月。本发明首次建立起一套成熟的猪PLCs的分离、培养、检测和分化的完善方法,最终确立的不同体外培养体系可以实现控制PLCs在体外维持增殖和分化。本发明的方法对于体外研究PLCs生物学性质,以及药物研发和疫苗生产等方面应用具有潜在应用价值。

    一种猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法

    公开(公告)号:CN105624105A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610087719.2

    申请日:2016-02-16

    Abstract: 本发明公开了一种猪睾丸间质祖细胞PLCs的长期培养方法,其中包括体外分离、检测和分化,利用猪PLCs的体外增殖培养基培养仔猪睾丸成纤维细胞5~8天后,得到PLCs克隆集落;利用猪PLCs的分化培养基进行培养后,第3天PLCs开始向成熟睾丸间质细胞分化,然而在增殖培养基中培养,在体外最长维持时间达到了6个月。本发明首次建立起一套成熟的猪PLCs的分离、培养、检测和分化的完善方法,最终确立的不同体外培养体系可以实现控制PLCs在体外维持增殖和分化。本发明的方法对于体外研究PLCs生物学性质,以及药物研发和疫苗生产等方面应用具有潜在应用价值。

    一种评定大白公猪受精能力的数学模型及其建立方法

    公开(公告)号:CN105046083A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510431755.1

    申请日:2015-07-21

    Abstract: 本发明公开了一种评定大白公猪受精能力的数学模型及其建立方法,其建立方法包括步骤:对大白公猪数据样本的预测变量进行数据描述;再进行系统聚类,并依据公猪精液受精能力相关的样本数据对不同受精力水平的大白公猪进行划分,划分为高受精能力公猪群和低受精能力公猪群;再进行聚类后的判别分析和Logistic回归分析,生成具体的数学函数。本发明所建立的数学模型的系数及预测准确率可靠,能够提供一种适合广东省种猪场评定在役大白公猪受精能力的函数模型,可作为评定大白公猪受精能力的依据;对于缩小公猪间受精能力的梯度变化区间,以及准确预测大白公猪受精能力水平具有重要意义。

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