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公开(公告)号：CN104450696B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201410721269.9
申请日：2015-01-05
Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p‑FRT、p‑loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导，不需其它操作，简便易行。
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公开(公告)号：CN104498540A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410721268.4
申请日：2014-12-03
CPC classification number: C12P7/24 , C12N9/0008 , C12N9/93 , C12Y102/01044 , C12Y602/01012
Abstract: 本发明公开了一种重组菌株及其全细胞催化生产4-羟基肉桂醛的方法，其特征是利用重组菌株全细胞作为生物催化剂催化4-羟基肉桂酸制备4-羟基肉桂醛，包括以下步骤：（1）构建重组菌株E.coli M15/pQE31-4CL1-CCR；（2）制备重组菌株全细胞；（3）利用上述重组菌株全细胞催化生产4-羟基肉桂醛，得到的产品经高效液相色谱串联质谱法检测。本发明首次提出了用生物转化的方法合成4-羟基肉桂醛的途径，具有反应条件温和，酶活性高，节约成本，操作简便等优点，提供了一种新的合成4-羟基肉桂醛的方法，同时也为植物次生代谢产物的生产提供了一种新思路。
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公开(公告)号：CN101531687B
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN200910082656.1
申请日：2009-04-23
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种多羟基化合物的衍生化试剂。该试剂，由DMSO、1-甲基咪唑和乙酸酐组成。本发明的试剂可以在维持单糖天然构象的基础上对其进行乙酰化衍生反应，衍生化反应后可以得到单一的衍生化产物，更能够准确进行定性定量分析各种多羟基化合物，避免了多种衍生化产物对分析的干扰。
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公开(公告)号：CN101544976A
公开(公告)日：2009-09-30
申请号：CN200910083479.9
申请日：2009-05-06
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体。双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体是在出发载体的多克隆位点插入如下DNA分子的重组表达载体：自5’末端依次含有EcoRI酶识别序列、NoS终止子、SacI酶识别序列、kpnI酶识别序列、红色荧光蛋白基因、SmalI酶识别序列、BamHI酶识别序列、XbalI酶识别序列、双向启动子、XholI酶识别序列、SpeI酶识别序列、绿色荧光蛋白、HindIII酶识别序列、HpaI酶识别序列、SalI酶识别序列、NoS终止子和Clal酶识别序列；所述双向启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第5917－6834位。本发明的双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体具备通过直接酶切连接简单操作就可以用于融合功能基因的目的。
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